浙江日升昌药业有限公司
- 作品数：43 被引量：14H指数：2
- 相关机构：华东理工大学上海中医药大学山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省重大科技专项资金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 一种新霉素树脂提取分离装置
- 本实用新型提供了一种新霉素树脂提取分离装置，属于分离机械技术领域。它解决了现有的用于新霉素树脂提取分离的设备无法良好地完成清洗的问题。本提取分离装置包括筒体，筒体上下贯穿，筒体的上方盖设有上盖，筒体的下方设有金属网，筒体...
- 秦涛吕稼锋斯晓忠
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- 一种药品灌装机的药品送料机构
- 本实用新型提供了一种药品灌装机的药品送料机构，属于制药技术领域。它解决了现有的药品包装过程无法进行全自动集成式包装的问题。本药品灌装机的药品送料机构包括三向控制阀，该三向控制阀包括具有阀腔的阀体、旋转阀芯和旋转驱动机构，...
- 傅龙云吕稼锋张欣英
- 文献传递
- 一种药品灌装装置
- 本实用新型提供了一种药品灌装装置，属于制药技术领域。它解决了现有的药品包装过程无法进行全自动集成式包装的问题。药品灌装装置包括两组，每组药品包装装置均包括纵封装置、纵切装置、横封装置和横切装置，两组药品包装装置中的各装置...
- 王富军张欣英谢先文
- 文献传递
- 凋亡素融合蛋白在HeLa细胞中的转导及体外活性分析被引量：1
- 2010年
- 研究胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)的肝素结合域(HBD)在HeLa细胞中的转导活性,并证实HBD具有运载药物蛋白(凋亡素)进入细胞并诱导肿瘤细胞凋亡的能力。通过克隆表达的HBD-EGFP融合蛋白经Ni2+-NTA纯化后,观察其转导活性;并利用HBD-凋亡素融合蛋白表达纯化后,用噻唑蓝(MTT法)检测肿瘤细胞的凋亡。结果表明:用荧光显微镜可观察到HeLa细胞内有绿色荧光;MTT法检测表明凋亡素融合蛋白能诱导HeLa细胞的凋亡;HBD具有转导活性,能携带药物蛋白(凋亡素)进入细胞并能诱导HeLa细胞的凋亡。
- 华迪赵健范立强王富军汪雅雯
- 关键词：穿膜肽EC-SODHELA细胞
- 一种软管制剂产品的铝管包装盒
- 本实用新型涉及一种软管制剂产品的铝管包装盒，包括盒体，其特征在于，所述盒体由复合膜构成，所述复合膜由内至外依次包括蜂窝纸板内层、油墨印刷中间层和镭射防伪膜外层，所述蜂窝纸板内层设置有若干限位条，所述限位条四条，其中两条限...
- 王富军傅龙云张涛铸单含文
- 文献传递
- 重组黄杆菌肝素酶Ⅲ的纯化、表征及培养条件对酶生产的影响(英文)被引量：1
- 2009年
- 肝素酶III是一种特异性地裂解乙酰肝素的酶,在大肠杆菌中表达时容易形成包涵体。为实现肝素酶III的可溶性表达,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)与肝素酶III融合性能,通过构建相应的表达质粒pGEX-heparinaseIII,在大肠杆菌中实现了肝素酶Ⅲ的可溶性表达。粗酶通过一步亲和纯化其纯度可达95%以上。通过对LB培养基摇瓶培养Escherichia coli BL21的诱导时机、诱导剂用量、诱导时间等培养条件的优化,确定了该可溶性肝素酶III融合蛋白的最适生产条件。通过对纯酶的最适反应温度、pH、Ca2+浓度等一系列性质研究,确定了该酶的最适反应条件。
- 高兴赵健范立强李素霞王富军姬胜利袁勤生
- 关键词：谷胱甘肽-S-转移酶可溶性表达
- TAT-凋亡蛋白质制备与抗肿瘤活性研究
- 2009年
- 目的制备TAT-凋亡蛋白质并研究其抗肿瘤活性。方法将重组质粒pET-28b-TAT-vp3转入E.coliBL21(DE3)中表达其蛋白质,利用Ni-NTA亲和柱纯化目的蛋白质包涵体,纯化样品透析复性后研究其抗肿瘤活性。结果30℃时重组蛋白质包涵体表达量最高,尿素变性条件下用Ni-NTA亲和柱层析纯化包涵体,用500mmol/L咪唑溶液洗脱,从镍柱上解离的目标蛋白质纯度达到92%以上。MTT实验表明,纯化后蛋白质浓度10μg/mL时,HeLa细胞存活率降至42%(IC50=4.2μg/mL);动物实验表明,样品组抑瘤率可达到48.3%。结论大肠杆菌表达的TAT-凋亡蛋白质具有抗肿瘤效应。
- 高鹏赵健傅文彬王富军袁勤生刘建文
- 关键词：抗肿瘤活性
- 一种新型细胞穿膜肽
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种新型细胞穿膜肽、基因、重组载体、转化体及其用途和穿膜给药系统。本发明公开了一种新型细胞穿膜肽，其特征在于所述新型细胞穿膜肽为a)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述的多肽；或b)除氨...
- 赵健汪雅雯王富军傅龙云张涛铸吕稼锋单含文
- 文献传递
- 白树毒素融合蛋白的筛选及其抗肿瘤作用和凋亡途径研究被引量：2
- 2018年
- 通过白树毒素(Gelonin)与多种穿膜肽(Cell-Penetrating Peptide,CPP)融合,获得一种抗肿瘤活性最高的Gelonin-HBP重组蛋白并研究其抑制肿瘤细胞增长的分子机制。以大肠杆菌BL21(DE3)重组表达及NI-NTA亲和纯化4种CPP(R9、TAT、HBD和HBP)与Gelonin融合的重组蛋白,通过超螺旋切割和体外翻译抑制实验检测其生物活性;激光共聚焦显微镜观察Gelonin重组蛋白穿膜效率、以MTT法检测其对肿瘤细胞的作用、并用流式细胞术及Western blot法观察其细胞凋亡的分子机制。结果显示,获得了保留Gelonin原有生物活性的4种Gelonin重组蛋白,连接CPP的Gelonin均能促进Gelonin的穿膜及抑杀肿瘤细胞效应,其中Gelonin-HBP活性最强,对于He La、B16、MCF-7和Hep G2四种肿瘤细胞比单独的Gelonin活性分别提升16.4倍、9.6倍、14.0倍和24.6倍;免疫印迹分析表明Gelonin-HBP诱导了肿瘤细胞Caspas 3、Caspas 8及Caspas 9的活性、Bax表达量显著增加,而Bcl-2的表达量显著降低。CPP促进了Gelonin对肿瘤细胞的抑杀和促凋亡作用,其中来源于人肝素结合表皮生长因子样生长因子的HBP连接Gelonin的抗肿瘤作用最强,其诱导肿瘤细胞凋亡的机制与线粒体和死亡受体介导的凋亡信号通路有关。
- 翟逸舟卢美雅赵健王富军
- 关键词：穿膜肽抗肿瘤细胞凋亡
- EGFP-Arg7融合蛋白表达及在HeLa细胞中的转导活性
- 2010年
- 目的构建pET-28a-EGFP-Arg7重组子,观察表达的融合蛋白EGFP-Arg7在细胞内的转导活性。方法构建EGFP-Arg7(阴性对照为EGFP)序列,与pET-28a连接后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并经Ni2+-NTA纯化。纯化产物作用于HeLa细胞后用荧光显微镜观察其转导活性。结果重组pET-28a-EGFP-Arg7经酶切鉴定和序列分析,证明构建正确。转化E.coli BL21(DE3)后,重组蛋白获得可溶性表达。纯化后的融合蛋白纯度达90%以上。重组蛋白EGFP-Arg7作用于HeLa细胞后用荧光显微镜可观察到强绿色荧光。结论 Arg7具有很好的转导活性,能携带与其连接的蛋白质穿过HeLa细胞膜。
- 肖伟华迪汪雅雯单含文吕稼锋赵健
- 关键词：蛋白转导域HELA细胞
