复旦大学上海医学院基因研究中心
- 作品数：37 被引量：57H指数：5
- 相关作者：胡匀陈晓宁徐沁殷祥富罗凌枫更多>>
- 相关机构：南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室南通医学院神经科学研究所复旦大学附属华山医院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Tollip与DC-SIGN的相互作用及其功能研究
- DC-SIGN(Dendritic cell-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin)是 C 型凝集素受体超家族的成员,它主要在树突状细胞表面表达。DC-SIGN 能够通过其碳水化合物识...
- 郭亮顾建新
- 文献传递
- A549细胞中过表达p16^(INK4A)引起细胞衰老样表型的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 研究p16 INK4A对A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3 p16质粒转染 p16基因缺失的A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系并通过Northernblot和Westernblot鉴定 p16基因的异位表达 ,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化 ,利用Westernblot和SA β gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化。结果 证实了在A5 4 9中 p16 INK4A能稳定表达。p16 INK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变 ,Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在。发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型 ,如细胞体积变大 ,细胞形态呈明显的扁平状态 ,并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色。结论 在A5 4 9细胞中表达 p16 INK4A能使细胞发生衰老样表型并提示 p16
- 胡匀罗凌枫颜峻顾建新
- 关键词：A549细胞衰老
- 汉防己甲素对肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质的作用
- 1 材料与方法1.1 动物模型制备首先行左肾切除,术后第1W和第5 W时两次静脉注射阿霉素,剂量分别为5 mg/kg和3 mg/kg。于第12 W宰杀大鼠。1.2 动物分组及给药大鼠随机分为4组,即(1)正常对照组(Sh...
- 董兴刚安增梅杨海春周江华殷祥雷刘旭东顾建新
- 文献传递
- N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶在人星形胶质细胞瘤中的表达
- 2005年
- 目的分析与N-糖链合成相关β-1,4半乳糖基转移酶-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β1,4-galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤的表达变化。方法采用RT-PCR方法,分析β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤的表达存在。以扩增的3种同工酶cDNA片段作为探针进行标记,Northernblot分析其mRNA在正常脑组织和各级人星形胶质细胞瘤中的表达变化。结果RT-PCR检测到β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人星形胶质细胞瘤中的表达存在。northernblot发现β-1,4-GalT-Ⅱ、Ⅴ在正常脑组织中有表达,但β-1,4-GalT-Ⅱ的表达较低,而β-1,4-GalT-Ⅰ在正常脑组织中表达极低。β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在星形胶质细胞瘤中的表达显著高于正常脑组织。其中,β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ在各级胶质瘤中的表达没有明显差异。而β-1,4-GalT-Ⅴ的表达随胶质瘤分级的增高而增加。结论N-糖链合成相关的β-1,4-GalT-Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ在人脑星形胶质细胞瘤发生过程中的表达不同,尤其是β-1,4-GalT-Ⅴ的表达与人星型胶质瘤的恶性程度显著相关。
- 严美娟沈爱国邵晓轶李爱红王惠民顾建新程纯
- 关键词：半乳糖基转移酶N-糖链正常脑组织NORTHERNNORTHERN脑星形胶质细胞瘤
- 轴突导向分子及受体结构与功能进展被引量：5
- 2001年
- 在神经发育过程中 ,轴突导向分子引导轴突选择正确途径 ,从而成功到达靶区 .近年有关轴突导向分子及其受体的研究进展迅速 ,主要介绍了Netrin DCC和UNC5 ,semaphorin neuropilins和 plexins ,Slit robo,Eph受体酪氨酸激酶及其配体的结构和功能 .
- 张勇陈淳徐晋麟顾建新
- 关键词：受体神经元
- 汉防己甲素对肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质的作用
- 1.材料与方法1.1动物模型制备:首先行左肾切除,术后第1周和第5周时两次静脉注射阿霉素,剂量分别为5mg/kg和3mg/kg。于第12周宰杀大鼠。1.2动物分组及给药:大鼠随机分为四组,即(1)正常对照组(Sham手术...
- 董兴刚安增梅杨海春周江华殷祥雷刘旭东顾建新
- 文献传递
- 鬼臼乙叉甙对星形胶质细胞瘤表达β1,4-半乳糖基转移酶的影响被引量：3
- 2005年
- 目的 研究鬼臼乙叉甙(Etoposide ,又称VP16)影响人星形胶质细胞瘤SHG 44细胞周期过程中,与N 糖链合成有关的β1,4 半乳糖基转移酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β- 1,4 -galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β- 1,4- GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)表达变化。方法 首先应用流式细胞仪技术分析VP16处理SHG 44细胞过程中细胞增殖情况的变化,再采用NorthernBlot方法分析处理过程中的SHG 44细胞中β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的表达变化。结果 流式细胞仪检测表明,细胞培养基加入12 0 μmol/LVP161～6h后能引起SHG 44细胞的S期阻滞。NorthernBlot显示,VP16作用1～6h过程中,β- 1,4 GalT -Ⅰ、Ⅴ表达无显著变化。而β- 1,4- GalT -Ⅱ表达在此过程中则有升高趋势。结论 VP16能够引起星形胶质细胞瘤细胞SHG 44细胞周期改变过程中,β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅴ的表达无变化,而β- 1,4 -GalT- Ⅱ的表达明显升高。提示VP16引起肿瘤细胞周期改变,可能通过影响β- 1,4- GalT- Ⅱ的表达,引起有关蛋白质的糖基修饰而实现的。
- 严美娟沈爱国程纯邵晓轶李爱红顾建新
- 关键词：星形胶质细胞瘤半乳糖基转移酶鬼臼乙叉甙流式细胞仪技术VP16细胞增殖情况
- β-1,4半乳糖基转移酶-I在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化被引量：2
- 2003年
- 目的 分析 β 1,4半乳糖基转移酶 I (β 1,4 galactosyltransferaseI,β 1,4 GalT I)mRNA在正常和损伤坐骨神经髓鞘上的定位及其表达变化。方法 采用RT PCR方法 ,分析 β 1,4 GalT I在小鼠坐骨神经中的表达水平。将RT PCR扩增的 β 1,4 GalT I片段 ,克隆到pGEM T载体中。采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义 β 1,4 GalT IRNA探针。通过原位杂交及图像分析的方法 ,分析 β 1,4 GalT ImRNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的定位及其表达变化。结果 检测到 β 1,4 GalT I在大鼠坐骨神经的髓鞘中有表达 ,并在坐骨神经损伤后 1～ 2d内表达最高 ,随后表达下降。结论 提示 β 1,4 GalT I可能在周围神经最主要的胶质细胞—施万细胞中表达 ,并在周围神经损伤后发生表达变化 ,这样为进一步分析 β 1,4 GalT I在周围神经再生中的调控机制奠定基础。
- 朱敏沈爱国丁斐顾建新顾晓松
- 关键词：坐骨神经损伤RNA探针原位杂交胶质细胞
- β-1,4-半乳糖基转移酶V对星形胶质细胞起源肿瘤细胞恶性行为影响的初步研究
- 2004年
- 背景与目的:在恶性转化的肿瘤细胞中有β-1,4-半乳糖基转移酶V(beta-1,4-gaiactosyltransferase V,β-1,4-GaiT V)基因的高表达。我们在以往的研究中发现:随着人脑星形胶质起源肿瘤恶性程度的增高,β-1,4-GaiT V的基因表达也相应增高。为研究β-1,4-GaIT V与人脑星形胶质细胞起源肿瘤恶性行为的关系,本研究检测β-1,4-GaiT V对星形胶质细胞起源肿瘤细胞株SHG-44的迁移和增殖能力的影响。方法:采用划痕试验的方法,将转染了β-1,4-GaIT V正义、反义和空载体的SHG-44细胞株接种于包被有纤连蛋白或层连蛋白的板上,观察划痕后不同时间向划痕处生长不同距离的细胞数。同时采用MTT法分析SHG-44细胞转染不同质粒后对细胞增殖的影响。结果:与转染空载体的SHG-44细胞株相比,转染正义β-1,4-GaITV的SHG-44细胞迁移和增殖速度均加快,而转染反义β-1,4-GaIT V的SHG-44细胞迁移和增殖速度均减慢。结论:β-1,4-GaIT V对SHG-44细胞的迁移和增殖能力均有影响,提示β-,4-GaIT V可能与SHG-44细胞的恶性生物学行为有关。
- 程纯严美娟沈爱国邵晓轶顾建新
- 关键词：星形胶质瘤细胞起源肿瘤细胞恶性行为
- 地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用被引量：2
- 2003年
- 为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。
- 沈爱国龚蕾蕾丁斐严美娟王汉洲顾建新
- 关键词：地高辛标记小鼠RNA探针
