滨州医学院附属医院临床医学实验中心
- 作品数：26 被引量：97H指数：6
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- 相关机构：南京中医药大学护理学院滨州医学院烟台附属医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金烟台市科学技术发展计划项目山东省高等学校科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 康柏西普对兔眼准分子激光角膜切削术术后角膜上皮下雾状混浊的影响被引量：6
- 2019年
- 目的探讨康柏西普(conbercept)对兔眼准分子激光角膜切削术术后角膜上皮下雾状混浊(haze)的影响。方法采用随机数字表法将64只纯种新西兰大白兔分为单纯手术组、生理盐水组、conbercept0.5mg组和conbercept1.0mg组,每组16只,均行右眼准分子激光角膜切削术(PRK),术后单纯手术组不做任何处理,其余3个组分别给予术眼结膜下注射生理盐水0.05ml、conbercept0.5mg(0.05ml)和conbercept1.0mg(0.10ml),另选取8只兔作为正常对照组。术后裂隙灯显微镜下观察角膜上皮愈合情况及haze程度并进行Fantes分级,各手术组术后1周和4周分别空气栓塞法处死8只,正常对照组处死4只,取其角膜组织行苏木精-伊红染色,并通过免疫组织化学法检测角膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达。结果术后兔眼角膜上皮均于3~5d完全愈合,各组兔眼术后角膜上皮愈合时间比较,差异无统计学意义(F=0.37,P=0.77)。在观察期间,各手术组haze均于术后4周时最明显,conbercept1.0mg组haze最严重,其次为单纯手术组和生理盐水组,conbercept0.5mg组haze较其他手术组明显减轻,各组兔眼不同时间点haze分级比较,差异均有统计学意义(F组别=20.114,P=0.000;F时间=8.084,P=0.006)。苏木精-伊红染色示PRK术后1周,术区角膜上皮细胞增生,细胞排列紊乱、形态各异,浅基质层成纤维细胞数量增多,胶原纤维排列紊乱。角膜上皮及浅基质层的增生程度由强到弱依次为conbercept1.0mg组、单纯手术组和生理盐水组、conbercept0.5mg组。术后4周各手术组术区角膜组织结构较术前1周紊乱,各组增生程度次序同术前1周。免疫组织化学法检测显示,术后1周conbercept1.0mg组术区角膜组织中TGF-β1、α-SMA和MMP-2的表达最强,其次为单纯手术组和生理盐水组,conbercept0.5mg组次之,各手术组3种因子的表达较正常对照组明显增强,差异均有
- 刘蓓张磊刘玉震高洪莲隋文君
- 关键词：准分子激光角膜切削术角膜上皮下雾状混浊Α-平滑肌肌动蛋白基质金属蛋白酶-2
- HIV衣壳蛋白P24与TRIM22在HEK293T细胞中的表达及共定位被引量：2
- 2015年
- 目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)衣壳蛋白P24与三基序蛋白22(TRIM22)在HEK293T细胞中的共定位情况。方法以慢病毒载体p LP1为模板,通过PCR法扩增p24编码序列,克隆至p DsRed-Monomer-N1真核表达载体。经菌落PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定。将p DsRed-Monomer-N1-p24与p EGFP-N3-TRIM22载体共同转染HEK293T细胞,用荧光显微镜观察p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP的表达及共定位情况。结果经菌落PCR、双酶切及测序鉴定,成功构建p DsRedMonomer-N1-p24真核表达载体。通过荧光显微镜检测发现,p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP在HEK293T细胞中存在共定位关系。结论 HIV衣壳蛋白P24与TRIM22存在共定位。
- 孙大康安新业周玉明纪兵宋向芹徐殿红
- 关键词：人类免疫缺陷病毒衣壳蛋白P24共定位
- 巨细胞病毒感染与女性不孕的相关性研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究巨细胞病毒感染与女性不孕的相关性。方法随机选取了300例女性不孕患者作为研究组,300例孕前健康查体患者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的抗HCMV IgM抗体。结果研究组中45例阳性,阳性率为15.0%;对照组中7例阳性,阳性率2.3%,两组比较,差异非常显著(P<0.01)。结论女性不孕症的发生与HC-MV感染有较密切的关系。
- 郑静卓越李彩玉孙大康胡凤爱倪娜
- 关键词：巨细胞病毒不孕酶联免疫吸附试验
- Th9细胞与IL-9在肺炎支原体感染患儿中的检测及其临床意义被引量：21
- 2015年
- 目的探讨辅助性T细胞9(Th9)及其细胞因子白细胞介素-9(IL-9)在肺炎支原体(MP)感染患儿中的临床意义。方法 2013年1月至2014年6月诊断为MP感染患儿86例,分为上呼吸道感染组(URI组,n=29)、轻症MP肺炎(MPP)组(n=32)和重症MPP组(n=25)。另选取28例同期行健康体检儿童为对照组。Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测各组外周血Th9细胞百分率;ELISA法检测各组血清细胞因子IL-9水平。结果 URI组、轻症MPP组和重症MPP组患儿外周血Th9细胞百分率及IL-9水平均高于对照组(P<0.05);轻症MPP组和重症MPP组患儿外周血Th9细胞百分率及IL-9水平均高于URI组(P<0.05),且重症MPP组显著高于轻症MPP组(P<0.01)。结论 MP感染患儿外周血Th9细胞百分率及其细胞因子IL-9的表达水平升高,且随病情加重而增加,推测Th9细胞及IL-9可作为MP感染患儿病情发展及转归的评价指标。
- 王建勇郑静邢海燕贾秀红
- 关键词：肺炎支原体TH9细胞IL-9儿童
- Trim22缺失突变体真核表达载体的构建被引量：1
- 2011年
- 目的构建Trim22缺失突变体的真核表达载体,为进一步研究Trim22与HIV-1衣壳蛋白的相互作用奠定基础。方法以野生型Trim22真核表达质粒为模板,用PCR方法扩增出5种类型Trim22缺失突变体的基因片段,克隆到5`-Flag-pcDNA3.1(+)真核表达载体,通过酶切、菌落PCR及测序进行鉴定。将该载体转染HEK293T细胞,用蛋白印迹及免疫沉淀检测Trim22缺失突变体的蛋白表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建5种人Trim22缺失突变体的表达载体,载体均可以在HEK293T细胞中表达。结论成功构建5种人Trim22缺失突变体的真核表达载体,为探寻Trim22与HIV-1衣壳蛋白相互作用的关键结构域奠定了基础。
- 孙大康宿振国安新业周荣佼刘永云
- 关键词：缺失突变体艾滋病病毒
- 不同固定液固定豚鼠视网膜效果的比较被引量：2
- 2022年
- 近视是常见的眼科疾病[1],高度近视眼底病变是致盲的主要原因,随着近视屈光度的增加和眼轴的增长,眼底病发生率升高,如后巩膜葡萄肿、黄斑劈裂、黄斑出血、豹纹状眼底等[2]。因此近视防控是社会关注的焦点,也是研究的热点。而豚鼠是建立近视模型中最常用的实验动物,其视网膜组织的病理切片在实验中有着重要作用,但因视网膜结构复杂,在制作视网膜组织病理切片时,易出现视网膜断裂折叠、细胞固缩、胞核不清等问题,影响实验研究.
- 邱宇高洪莲张磊
- 关键词：固定液视网膜石蜡切片HE染色免疫荧光
- 富氢生理盐水对小肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的保护作用被引量：1
- 2021年
- 目的探讨富氢生理盐水(HRS)对小肠缺血再灌注损伤(IIRI)大鼠肠黏膜屏障的影响。方法将24只8周龄健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组(每组8只):假手术组、模型组和HRS组。HRS组大鼠在小肠缺血第30分钟时腹腔注射HRS(10 mL/kg);模型组大鼠在相同时间点腹腔注射9 g/L盐水(10 mL/kg)。小肠缺血持续45 min,再灌注6 h后取材。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-17A水平;免疫组织化学染色(IHC)检测回肠黏膜闭合蛋白(Occludin)表达,免疫荧光(IF)检测黏连蛋白1(ZO-1)表达;Western blot检测回肠黏膜Occludin、ZO-1和Lysozyme蛋白表达,实时荧光PCR(qPCR)检测Lysozyme和α-defensin的mRNA表达。结果ELISA结果显示:HRS组大鼠血清TNF-α与IL-1β水平较模型组明显降低[(62.02±29.97)ng/L比(113.40±44.58)ng/L,(21.68±0.35)ng/L比(28.29±3.49)ng/L];IL-17A水平升高[(28.18±5.28)ng/L比(15.10±3.60)ng/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。IHC结果显示:与模型组大鼠相比,HRS组大鼠回肠黏膜Occludin染色较深,表达均匀连续。IF染色结果显示:与模型组大鼠相比,HRS组大鼠回肠黏膜ZO-1的荧光信号强度显著增加,分布连续清晰。Western blot结果显示:与模型组大鼠相比,HRS组大鼠回肠黏膜Occludin与ZO-1的蛋白表达明显增加(0.79±0.06比0.54±0.04,0.91±0.11比0.51±0.13);Lysozyme的蛋白表达减少(1.50±0.40比2.99±0.80),差异均有统计学意义(均P<0.05)。qPCR结果显示:与模型组大鼠相比,HRS组大鼠Lysozyme的mRNA表达降低(1.64±0.33比2.20±0.40);α-defensin的mRNA表达明显升高(0.82±0.19比0.47±0.13),差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论HRS通过维持肠黏膜屏障紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达及调节抗菌肽α-defensin和Lysozyme的分泌减轻大鼠IIRI。
- 姜帅耿磊刘希杰徐铭冯文玉丁国建徐晓亮刘乃国傅廷亮
- 关键词：小肠缺血再灌注损伤肠黏膜屏障抗菌肽
- Trim5α对TAB2诱导的NFκB启动子荧光素酶报告基因活性的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建人Trim5α的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Trim5α,观察其对TAB2诱导的NFκB启动子荧光素酶报告基因活性的影响。方法提取Hela细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增出Trim5α基因编码区全长片段,克隆到5`-Flag-pcDNA3.1(+),经酶切、菌落PCR及测序进行鉴定。转染HEK293T细胞,Western blot检测Trim5α蛋白的表达,双萤光素酶报告基因系统检测Trim5α对TAB2诱导的NFκB报告基因活化的影响。结果经鉴定,成功构建Trim5α表达载体,该载体可在HEK293T细胞中表达Trim5α,Trim5α对TAB2诱导的NFκB报告基因活化无显著影响。结论 Trim5α对TAB2诱导的NFκB报告基因活化未见显著影响,初步建立了Trim蛋白对NFκB报告基因影响的功能筛选平台。
- 孙大康安新业郑静胡凤爱李彩玉
- 关键词：核因子ΚB
- ω-3多不饱和脂肪酸对梗阻性黄疸患者术后全身炎症反应综合征的影响被引量：5
- 2011年
- 目的观察含有ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3PUFAs）的肠外营养对梗阻性黄疸术后患者全身炎症反应综合征（SIRS）的影响。 方法选择2008年6月至2009年10月在滨州医学院附属医院肝胆外科住院的40例梗阻性黄疸患者，采用随机数字表法分为PUFAs组和常规组，每组20例。常规组用中长链脂肪乳剂，PUFAs组用添加ω-3PUFAs的中长链脂肪乳剂。使用等氮、等热量肠外营养，共9 d，其中非蛋白质热量为117.15 kJ/（kg·d）、氮量为0.2 g/（kg·d）。测定两组患者术前1 d和术后第1、3、5、7、9天血清白细胞介素-6、C反应蛋白和肿瘤坏死因子α水平，同时观察SIRS和多器官功能不全综合征（MODS）的发生率。结果PUFAs组术后第3、5、7、9天的血清白细胞介素-6、C反应蛋白和肿瘤坏死因子-α水平较常规组显著下降（P均＜0.05）。PUFAs组的SIRS持续时间为（3.85±2.36）d，明显短于常规组的（5.31±1.47）d（P=0.0230）。PUFAs组的MODS发生率为10%，明显低于常规组的25%（P=0.0076）。结论添加ω-3PUFAs的肠外营养能阻断梗阻性黄疸患者术后过度炎症反应、保护重要器官功能，有利于细胞及器官功能的恢复。
- 张帆张凤芝林绪涛黄椠陈强谱胡凤爱
- 关键词：Ω-3多不饱和脂肪酸肠外营养梗阻性黄疸炎症
- CYP3A5基因多态性对膜性肾病患者他克莫司初始剂量的预测价值被引量：10
- 2015年
- 目的检测不同CYP3A5基因型的特发性膜性肾病患者应用他克莫司（TAC）后达到目标血药物浓度时的用药剂量，明确不同基因型与药物用量间的关系，初步探索TAC的最佳初始用药剂量。方法采用回顾性分析的方法，病例来自滨州医学院附属医院肾内科确诊的特发性膜性肾病患者60例，荧光染色原位杂交（FISH）法检测CYP3A5基因型。依据基因型将患者分为AA、AG、GG3组。均相酶扩大免疫分析法（EMIT）测定患者他克莫司的全血谷浓度（C0）；比较3组患者用药后8、12、16、24周时他克奠司全血谷浓度（C0）、用药剂量、全血谷浓度与用药剂量（C0／D）的比值。按照临床疗效分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）和无效（NR）3组，比较各访视点患者的TAC药代动力学指标。结果60例特发性膜性肾病患者CYP3A5基因多态性（A6986G）G的基因频率为53．33％，其中AA组12例（20％）；AG组32例（53．33％）；GG组16例（26．67％）。3组患者他克莫司用药8、12、16、24周后的用药剂量、全血谷浓度／用药剂量比值的差异有统计学意义（均P〈0．05）。AA组患者他克莫司用药剂量约为GG组的2～3倍，AG组约为GG组的1～2倍。治疗24周AA组患者的缓解率显著低于AG、GG组（16．67％比81．25％、16．67比87．25％，均P〈0．001）。CR、PR组的C0以及C0/D值均较NR组高，且随用药时间延长而升高，但组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度明显相关，CYP3A5基因型检测对指导特发性膜性肾病患者的个体化用药有一定临床实用价值。
- 杨敏魏传梅刘乃国刘云启
- 关键词：肾小球肾炎膜性肾病综合征他克莫司CYP3A5
