信阳师范学院生命科学学院大别山农业生物资源保护与利用研究院
- 作品数：27 被引量：83H指数：5
- 相关作者：王慧芳李小艳杨明影王晓菲更多>>
- 相关机构：信阳农林学院生物与制药工程学院荆楚理工学院生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省科技成果转化计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程天文地球更多>>
- 大豆TGA转录因子基因GmTGA26在盐胁迫中的功能分析被引量：2
- 2022年
- TGA转录因子是bZIP的一个亚家族,在病原体和非生物胁迫反应中发挥重要作用。本研究在大豆中筛选并克隆得到1个TGA转录因子家族基因GmTGA26,同源蛋白比对表明GmTGA26具有保守的亮氨酸拉链结构域,与野生大豆同源性最高。基因表达特性分析表明,GmTGA26在大豆中受盐胁迫诱导表达。此外,GmTGA26编码核定位蛋白并且具有转录激活活性。通过发根农杆菌介导的大豆毛根转化,得到过表达GmTGA26的“复合体”大豆植株,在盐胁迫条件下,与空载体对照相比,“复合体”大豆植株生长状态更好,丙二醛含量和相对质膜透性明显降低(P<0.05),而叶绿素含量和根系活力则有显著的升高(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,盐胁迫条件下在大豆毛状根中过表达GmTGA26可显著上调胁迫响应基因的表达。以上结果表明,过表达GmTGA26显著增强了“复合体”大豆植株的耐盐能力。推测GmTGA26通过调控下游一系列胁迫响应基因从而参与调控大豆盐胁迫应激反应过程。
- 柯丹霞霍娅娅刘怡李锦颖刘晓雪
- 关键词：大豆耐盐性
- 大豆GmHDL57基因的克隆及抗盐功能鉴定被引量：2
- 2018年
- HD-Zip I类转录因子在植物抵御非生物胁迫过程中发挥重要功能,本研究克隆得到1个大豆HD-Zip I类基因Gm HDL57(Glycine max homeodomain-leucine zipper protein 57)。序列分析表明,Gm HDL57基因包含1个1038 bp的开放读码框,编码345个氨基酸,具有HD-Zip类家族蛋白典型的保守结构域。基因时空表达分析表明,大豆Gm HDL57基因在大豆植株的各个不同时期及不同器官中均有表达,在花中表达量最高。采用实时荧光定量PCR技术分析了4种非生物胁迫(脱落酸、Na Cl、PEG、冷)对幼苗期大豆根中Gm HDL57基因表达的影响。结果表明,该基因表达量受高盐胁迫诱导显著升高,在脱落酸及干旱胁迫下上升幅度较小,但在冷胁迫下呈下降趋势。盐胁迫前后Gm HDL57基因在根中的表达量明显高于茎和叶,在盐胁迫48 h时达到峰值,72 h和96 h时表达量缓慢下降。此外,构建Gm HDL57基因的植物超表达载体,利用根癌农杆菌转化法获得转基因百脉根,200 mmol L–1 Na Cl处理条件下,转基因百脉根的株高、根长、叶绿素含量、根系活力以及阳离子K+、Ca2+含量显著高于野生型,而丙二醛含量、相对质膜透性以及Na+的含量明显低于野生型。以上研究结果表明,Gm HDL57基因参与了大豆对非生物胁迫的应答过程,过量表达Gm HDL57基因能够显著提高百脉根的抗盐能力。
- 柯丹霞彭昆鹏张孟珂贾妍王净净
- 关键词：大豆非生物胁迫抗盐性
- 斜纹夜蛾SlSCP-2真核表达载体的构建及对胆固醇的吸收被引量：1
- 2018年
- 构建pcDNA5/FRT-SlSCP-2和阳性对照pcDNA5/FRT-GFP真核表达载体,将斜纹夜蛾固醇转运蛋白SlSCP-2和绿色荧光蛋白GFP分别整合进入Flp-In^(TM)CHO细胞基因组中的FRT位点上,利用western blotting方法和荧光倒置显微镜观察鉴定SlSCP-2和GFP蛋白在CHO细胞的表达情况.结果表明,重组质粒瞬时转染CHO细胞24h后,pcDNA5/FRT-SlSCP-2和pcDNA5/FRT-GFP均能正确表达目的蛋白,SlSCP-2能够增加细胞对胆固醇的吸收.同时确定了筛选稳定转染细胞株合适的潮霉素浓度.
- 张丽丽万星王娟薛竞帆武怡琼靳爽
- 关键词：斜纹夜蛾瞬时转染
- 水稻种子主要营养物质合成及调控研究与展望被引量：12
- 2018年
- 淀粉、储藏蛋白和脂类等物质是水稻种子中最主要的营养物质,它们在水稻种子中的组成及其含量对稻米品质的优劣起决定性的作用。本文综述了近年来水稻种子中淀粉、储藏蛋白、脂类物质和氨基酸等主要营养物质的合成及其相关基因的表达与调控等方面所取得的新进展,并分析了这些营养物质在水稻遗传改良过程中面临的挑战与展望,以期为今后稻米品质的遗传改良与新品种的培育提供参考与借鉴。
- 彭波彭宇彭娟孔冬艳何璐璐孙艳芳黄雅琴宋世枝
- 关键词：水稻营养物质
- 云南软米在豫南稻区的品质性状检测与分析被引量：2
- 2021年
- 以豫南稻区引进的38份云南软米种质资源为试验材料,利用砻谷机、精米机和近红外谷物分析仪等仪器,结合生化和理化分析的技术方法,对云南软米在豫南稻区的外观品质、研磨加工品质、营养品质和蒸煮食味品质等主要性状进行了检测与分析.结果表明:供试软米的垩白率、垩白面积、垩白度、粒长、粒宽、长宽比、糙米率、精米率、整精米率、蛋白质含量、总氨基酸含量、总必需氨基酸含量、直链淀粉含量、食味值和糊化温度等品质性状存在丰富的变异类型.特别是软米中的总氨基酸含量、总必需氨基酸含量、垩白性状、粒型以及糊化温度等重要品质性状在软米水稻材料中的变异范围较大.
- 彭波赵雨贺董超黄月茹冯佳华汤翠凤彭娟田夏雨孙艳芳黄雅琴汪全秀周伟阿新祥
- 关键词：软米品质性状种质资源
- 云南软米水稻种质资源Waxy基因的检测与分析被引量：1
- 2020年
- 【目的】云南软米水稻种质资源材料中Waxy等位基因功能性遗传变异位点的检测,结合其稻米中的直链淀粉含量检测结果综合分析,为优质软米水稻新品种的分子育种提供理论依据。【方法】利用Waxy基因的4个功能性分子标记,针对75份云南软米水稻种质资源材料进行了PCR检测与分析,并利用近红外谷物分析器对其稻米中的直链淀粉含量进行了检测与综合分析。【结果】云南软米水稻种质资源材料中Waxy基因功能标记In1位置处为GG基因型的有39份,其余的36份为TT基因型或GT基因型;在Waxy基因功能标记E2位置处存在缺少的软米水稻种质资源材料有63份;在功能标记E4mq位置处为A基因型、G基因型、C或T基因型的软米水稻种质资源材料分别有8、37和30份;在功能标记E4op/hp位置处为A基因型、G基因型、C或T基因型的软米水稻种质资源材料分别有18、15和42份;Waxy基因功能标记E2、E4mq和E4op/hp位置处,携带不同的基因型,其对应稻米中的直链淀粉含量存在显著性差异。【结论】本试验对云南软米水稻种质资源材料中Waxy等位基因功能标记的检测,结合其稻米中直链淀粉含量检测的结果,发现携带不同Waxy等位基因型,其对应稻米中的直链淀粉含量明显不同,这为利用Waxy基因功能标记辅助选育优质软米水稻新品种奠定基础。
- 彭波阿新祥郑梦阳郭莹谷雨张凯璇彭娟宋晓华田夏雨刘子月孙艳芳庞瑞华李金涛汪全秀周伟
- 关键词：软米种质资源WAXY基因直链淀粉含量
- 大豆半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因GmCYS2的功能鉴定被引量：1
- 2018年
- 半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin,CYS)在结瘤,根瘤发育和衰老过程中起重要作用。本研究克隆了1个大豆CYS家族基因GmCYS2,氨基酸序列比对及进化树分析表明,GmCYS2与木豆(Cajanus cajan)CYS相似性最高。在体外对该基因编码蛋白进行了表达和纯化,重组蛋白GmCYS2的酶活性抑制实验显示,该蛋白对L类和B类组织蛋白酶的抑制活性明显高于对H类组织蛋白酶,并且在30 d根瘤提取物中的抑制活性高于在60 d根瘤提取物中。此外,构建GmCYS2的植物表达载体,通过百脉根毛根转化法获得转GmCYS2基因的超表达复合体植株。GmCYS2的超量表达增加了百脉根的结瘤数目,并且上调共生标记基因的表达。结果说明GmCYS2蛋白具有一定的酶活性抑制作用,并且正调控百脉根共生结瘤过程。
- 柯丹霞彭昆鹏贾妍曾硕王英枝张静怡
- 关键词：大豆半胱氨酸蛋白酶抑制剂半胱氨酸蛋白酶共生结瘤百脉根
- 茉莉酸对水稻根系生长素合成及运输的调控被引量：1
- 2021年
- 以水稻中花11和DR5∷GUS转基因植株为实验材料,观察茉莉酸(Jasmonic acid,JA)对水稻根系中生长素积累和分布的影响.结果表明,JA负调控水稻主根、冠根和侧根的生长,抑制DR5∷GUS在水稻根系形态学下端的表达.实时定量PCR结果显示,在JA处理的水稻根系中,7个水稻生长素合成基因OsYUCCAs(OsYUCCA1~7)全部显著下调表达,4个生长素输入载体基因OsAUX1,OsAUX3~5显著上调表达,4个生长素输出载体基因OsPIN1b、OsPIN1c、OsPIN2、OsPIN9显著下调表达.
- 李金涛任梦迪柴梦梦张寒雪王子瑶谷超凡田晴彭春雨李怡想樊海燕
- 关键词：茉莉酸生长素根系水稻
- 乙烯调控水稻根系生长素合成及运输研究被引量：2
- 2020年
- 用乙烯的前体物质乙烯利处理水稻根系,观察根系表型、DR5∷GUS转基因材料GUS活性、生长素的合成基因和生长素运输载体基因表达水平的变化.结果表明:低浓度乙烯利促进侧根伸长;高浓度乙烯利抑制初生根和侧根的伸长以及侧根的起始;乙烯利处理表现出促进根毛的伸长;DR5∷GUS活性在根系中随乙烯利浓度升高而增强;生长素合成相关基因OsYUCCA1、OsYUCCA3、OsYUCCA4、OsYUCCA6上调表达;生长素输入载体基因OsAUX1、OsAUX2、OsAUX4、OsAUX5下调表达;生长素输出载体基因OsPIN5a、OsPIN5b、OsPIN8、OsPIN9显著下降表达.
- 李金涛杨玉娜柴梦梦胡启琰杨文倩袁景佳李杨意董钰刘彬文樊海燕
- 关键词：水稻根系乙烯生长素
- 利用酵母双杂交系统筛选大豆结瘤因子受体NFR1α的互作蛋白被引量：4
- 2020年
- 大豆是重要的植物蛋白作物和粮豆间作作物,挖掘大豆的生物固氮潜力,对推动生态农业的可持续发展具有深远意义。大豆结瘤因子受体蛋白GmNFR1?(Nod Factor Receptor)对结瘤至关重要,但其具体调控机制尚不明确。本研究以大豆mRNA为模板,利用RT-PCR方法扩增到GmNFR1α蛋白的激酶结构域(GmNFR1α-pk),构建了pGBKT7-GmNFR1α-pk诱饵表达载体,通过酵母双杂交技术,筛选大豆根瘤AD-cDNA文库,从文库中分离到与GmNFR1α-pk相互作用的71个阳性克隆,经测序和同源性分析筛选到12种与GmNFR1α-pk互作的蛋白,包括钙离子结合手性蛋白、豆血红蛋白、结瘤素Nod44等蛋白。以大豆豆血红蛋白GmLbc2为例,回转酵母以及烟草体内BiFC验证其与诱饵蛋白的相互作用,对其进行同源蛋白比对及系统进化树分析,并利用百脉根毛根转化技术鉴定GmLbc2在结瘤过程中的生物学功能。研究结果进一步补充和完善了GmNFR1α介导的结瘤信号传递途径,为大豆与根瘤菌共生互作机制提供了新的分子证据。
- 柯丹霞彭昆鹏
- 关键词：大豆共生固氮酵母双杂交豆血红蛋白
