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江西科技师范大学生命科学学院江西省生物加工过程重点实验室: 作品数：45 被引量：162H指数：7; 相关作者：常军何晓峰吴文婷季波毛洁更多>>; 相关机构：江西师范大学生命科学学院江西师范大学生命科学学院江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室江西中医药大学科技学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目更多>>; 相关领域：生物学农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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荧光标记米曲霉细胞器菌株构建及细胞器形态观察: 2024年; 多核丝状真菌米曲霉(Aspergillus oryzae)的细胞器具有多态性。为了观察米曲霉细胞器的形态以及为米曲霉中未知蛋白的定位分析和一系列生物反应通路的揭示提供参考,将不同的亚细胞定位信号与荧光蛋白融合,得到不同亚细胞定位的荧光蛋白表达载体,再利用农杆菌介导转化法(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT)将构建好的载体转入米曲霉中,通过显微观察证明成功构建了米曲霉荧光标记细胞核、线粒体、内质网、液泡、脂滴、过氧化物酶体和高尔基体的报告菌株。通过小分子特异性染料对线粒体、细胞核和脂滴荧光定位报告菌株染色进行共定位,对报告菌株进行了进一步验证。本研究对这些荧光标记的细胞器在不同生长时期和不同培养条件下的分布和形态进行了动态观察。报告菌株的构建为研究米曲霉的细胞器形态提供了工具,同时也为米曲霉中未知目的蛋白的定位以及亚细胞层面上的研究提供了工具。; 尚怡彤金奇黄慧秦坤海闫欢欢胡志宏; 关键词：米曲霉细胞器共定位

东乡野生稻内生放线菌分离及菌株S123次级代谢产物分析被引量：13: 2015年; 【目的】从东乡野生稻(Oryza rufipogon)中分离和鉴定内生放线菌,对其进行抗菌活性筛选,并分析高抗菌活性菌株S123的次级代谢产物。【方法】采用S培养基对东乡野生稻内生放线菌进行分离、纯化,并构建16S r RNA基因序列系统发育进化树进行菌株鉴定。以琼脂扩散法和菌丝生长速率法进行抗菌活性筛选,同时设计简并引物检测菌株I型聚酮合酶(PKS-I)基因。对具广谱抗菌活性的菌株S123进行分批大量发酵,运用多种色谱方法对发酵产物进行分离、纯化,利用MS和NMR分析鉴定化合物的结构。【结果】从东乡野生稻中共分离到11株内生放线菌,分别属于链霉菌属(8株)和假诺卡氏属(3株)。其中有8株具有抗菌活性,8株呈现I型PKS阳性。从高抑菌活性菌株S123中分离到化合物Nigericin和17-O-demethylgeldanamycin,其中Nigericin对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及水稻纹枯病菌均有抑制活性。【结论】对东乡野生稻内生放线菌进行了分离、鉴定和抗菌活性筛选,并从中分到两种与I型PKS基因相关活性的化合物Nigericin和17-O-demethylgeldanamycin,为研究东乡野生稻内生放线菌的多样性和次级代谢产物的分离提供依据。; 张志斌邓映明熊瑶瑶汪涯颜日明朱笃; 关键词：东乡野生稻内生放线菌次级代谢产物

羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE被引量：3: 2013年; S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成。该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1%和100%。; 张志斌吴小芳杨慧林颜日明曾庆桂汪涯朱笃; 关键词：生物催化羰基还原酶密码子优化

球毛壳菌小麦秸秆发酵产物抑制辣椒疫霉的稳定性及机制: 2024年; 【目的】由辣椒疫霉(Phytophthora capsici)侵染引起的疫病给辣椒等作物产业带来了巨大的经济损失。论文旨在明确球毛壳菌(Chaetomium globosum)代谢产物抑制辣椒疫霉的稳定性和抑菌机制,为研究与开发辣椒疫霉的微生物源抑菌剂提供参考。【方法】将球毛壳菌发酵粗提物分别在不同温度(40—121℃)、pH(1—13)、光照时间(0—12 d)和储存时间(0—60 d)条件下进行处理,采用菌丝生长抑制法测定经不同处理后粗提物对辣椒疫霉的抑制率,以探究粗提物抑制辣椒疫霉的热、酸碱、光和时间稳定性。利用光学显微镜观察粗提物对辣椒疫霉菌丝形态的影响,通过多种生理生化试验探究粗提物作用于辣椒疫霉12—72 h后,对辣椒疫霉细胞壁、细胞膜、活性氧代谢、蛋白质含量、还原糖含量和致病力的影响。【结果】在所设置的处理范围内,球毛壳菌发酵粗提物(1 mg·mL^(-1))经不同光照时间和储存时间处理后对辣椒疫霉的抑制率没有显著降低,抑制率维持在93%左右;粗提物在40—70℃的热处理范围内对辣椒疫霉的抑制率没有显著降低,70℃以上的热处理会显著降低粗提物对辣椒疫霉的抑制率,但抑制率不低于70%;粗提物在pH 1—5和9—13的酸碱处理范围内会显著降低对辣椒疫霉的抑制率,但抑制率也不低于70%。粗提物处理影响辣椒疫霉菌丝形态,使菌丝发生严重的扭曲皱缩现象,并影响活性氧代谢,使菌丝中的活性氧大量积累。辣椒疫霉经粗提物处理12—72 h后,其培养液中的碱性磷酸酶活性、β-葡萄糖苷酶活性、核酸和蛋白质含量均显著升高,且其菌丝中的丙二醛和过氧化氢含量显著增加。辣椒疫霉菌丝中的过氧化氢酶活性、可溶性蛋白和还原糖含量则在粗提物处理12—72 h内显著降低,而超氧化物歧化酶、过氧化物酶、多聚半乳糖醛酸酶和β-葡萄糖苷酶活性则仅在一定时间显著降低。【�; 廖宏娟谭佳思张志斌余璟蓉张馨月江玉梅朱笃; 关键词：球毛壳菌辣椒疫霉抑制率

东乡野生稻内生真菌的分离鉴定及其抗菌活性研究: 植物内生真菌作为一类特殊生境的微生物资源已成为研究和发现新的天然药物和生物活性成分的重要资源库.东乡野生稻具有耐寒、抗旱以及抗病虫害等优良性状,含有丰富的内生真菌资源.本研究采用组织分离的方法从东乡野生稻不同生长时期的根...; 高波良汪涯张志斌颜日明朱笃; 关键词：东乡野生稻内生真菌抗菌活性

3株拮抗内生放线菌的鉴定及其抑菌活性初步研究被引量：6: 2015年; 对分离自江西东乡野生稻根部的3株内生放线菌进行鉴定和抑菌活性研究,根据菌株的形态与培养特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列系统发育分析,将菌株FRo1、FRo2和FRo3分别鉴定为委内瑞拉链霉菌、娄彻氏链霉菌和肉质链霉菌.采用管碟法和菌丝生长速率法分析菌株拮抗病原细菌与病原真菌的活性.结果表明:菌株FRo1发酵液对所有测试细菌均有抑制作用,显示较广谱抑细菌活性;菌株FRo2显示出较强抑制金黄色葡萄球菌和7种病原真菌的活性,其中对金黄色葡萄球菌抑菌直径为22.33 mm,对小麦赤霉、水稻纹枯病菌、车前草核盘菌及胶胞炭疽菌的抑制率分别为70%、45%、58%和65%;而菌株FRo3发酵液对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及伤寒杆菌表现出不同程度的抑制,除车前草核盘菌外对所测试的病原真菌均有抑制活性,但抑制率均低于50%,这些菌株抑菌效果良好,显示出较好的生防潜力.; 熊瑶瑶敖武李怡何晓峰张志斌朱笃; 关键词：内生放线菌链霉菌属抑菌活性

内生真菌β-D-葡萄糖醛酸苷酶固定化及其性质研究被引量：1: 2017年; 以海藻酸钠为载体、戊二醛为交联剂,对内生真菌Chaetomium globosum S108的高选择性β-D-葡萄糖醛酸苷酶的固定化及部分特性进行了研究。结果表明:β-D-葡萄糖醛酸苷酶的最佳固定化条件为海藻酸钠1.5%、戊二醛1.5%、添加酶量3 500 U、Ca Cl2浓度2%,交联时间30 min。β-D-葡萄糖醛酸苷酶固定化后,其最适温度提高5℃,最佳pH值由6.0~6.8拓展为5.2~7.6,热稳定性和pH稳定性明显改善;米氏常数(Km)明显增大,而最大反应初速度(Vmax)明显减小。固定化酶重复操作15次,其相对酶活仍保持71%。; 闫宜江肖依文汪涯吴文婷常军何巧璇朱笃; 关键词：甘草酸固定化内生真菌

蛇足石杉内生真菌无柄盘菌Pezicula sp.JR14中抑制乙酰胆碱酯酶的次级代谢产物分离被引量：5: 2018年; 采用形态学及ITS-rDNA序列分析法,对具有抑制乙酰胆碱酯酶活性的蛇足石杉内生菌株JR14进行鉴定,确定为无柄盘菌Pezicula sp.。开展了乙酰胆碱酯酶抑制活性化合物的分离,从Pezicula sp.JR14乙酸乙酯提取物中分离到4个化合物,利用核磁共振及质谱技术将其鉴定为behenic acid(1)、himeic acid B(2)、secalonic acid A(3)和palmitic acid(4)。采用改进的Ellman比色法对分离的化合物进行活性检测,结果表明,himeic acid B(2)具有较强的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其IC50为205μg/mL(0.64mmol/L)。; 郑瑞张志斌颜日明汪涯肖依文朱笃; 关键词：蛇足石杉内生真菌乙酰胆碱酯酶抑制剂

东乡野生稻内生放线菌Streptomyces sp. PRh5抑菌活性次级代谢产物研究被引量：1: 2018年; 从东乡野生稻中分离到一株生产较强抑菌活性代谢产物的内生放线菌菌株Streptomyces sp. PRh5,利用活性追踪法结合正相硅胶、凝胶柱层析等色谱技术从PRh5菌株发酵液中分离到4种抑菌活性化合物,经~1H NMR、^(13)C NMR和MS等波谱分析鉴定为邻苯二甲酸二丁酯(1)、尼日利亚菌素(2)、13-Docosenamide(3)、诺卡胺素(4)。这表明菌株PRh5具有开发为新型抑菌生物制剂的潜力。; 包建莹张志斌肖依文汪涯颜日明朱笃; 关键词：内生放线菌 STREPTOMYCES 抑菌活性次级代谢产物

天然产物基于离子通道调控胰岛素分泌的研究进展被引量：3: 2017年; 胰岛素的分泌受多种机制调控,包括多种离子通道。近年来,国内外研究者在离子通道调控胰岛素分泌方面进行了大量研究。本文就天然产物通过影响离子通道来调控胰岛素分泌的研究作一综述,为进一步开发利用天然产物提供理论参考。; 胡庆娟崔申申李玉萍; 关键词：离子通道胰岛素分泌

江西科技师范大学生命科学学院江西省生物加工过程重点实验室

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