新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室
- 作品数：18 被引量：66H指数：5
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- 长期丰富环境对由神经毒素MPTP所致的帕金森病小鼠模型抑郁情绪的作用被引量：1
- 2021年
- 目的探讨长期丰富环境(EE)对由神经毒素MPTP所致的帕金森病(PD)小鼠模型抑郁情绪的作用。方法采用随机分组法将40只7月龄雄性C57BL/6N小鼠,分为EE+MPTP组、EE+NS组、SE+MPTP组与SE+NS组,每组10只。EE组和标准环境(SE)组在干预3个月后,MPTP组小鼠进行神经毒素MPTP造模(腹腔注射,30 mg/kg),每天注药1次,连续7 d;NS组给予腹腔注射等量的0.9%NaCl作为对照观察。采用行为学方法评估小鼠行为学表现。行免疫组织化学染色方法观察酪氨酸羟化酶(TH)与5-HT1A受体阳性面密度值变化情况。结果行为学结果显示MPTP组的小鼠的强迫游泳评分较NS组小鼠低(P<0.01);悬尾实验静止不动时间延长(P<0.01)。EE+MPTP组的上述抑郁表现轻于SE+MPTP组(P<0.05)。从免疫组织化学染色结果中发现,SE+MPTP组和EE+MPTP组小鼠的TH与5-HT_(1A)受体阳性表达水平较NS组小鼠降低(P<0.01),而EE+MPTP组小鼠TH及5-HT_(1A)受体阳性表达水平降低程度较SE+MPTP组小鼠小(P<0.05)。结论 MPTP小鼠的行为学异常以及TH阳性面密度值减少提示PD模型制作成功。EE+MTPT组小鼠5-HT_(1A)受体受损较SE+MPTP组小鼠轻,提示丰富环境可能缓解MPTP诱导的PD小鼠模型的抑郁情绪。
- 车祥源郑志勇李超堃邢红霞
- 关键词：帕金森病丰富环境1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶行为学抑郁情绪
- Janus激酶3通过影响钙池操纵性钙通道促进乳腺癌细胞的迁移被引量：4
- 2019年
- 本研旨在探讨Janus激酶3 (JAK3)对乳腺癌细胞迁移能力的影响以及其作用机制。利用si RNA (si JAK3)沉默乳腺癌MCF-7细胞JAK3的表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用荧光钙成像技术检测钙池操纵性钙通道(store-operatedcalcium channel,SOCC)活性,用Westernblot和RT-PCR检测钙池操纵性钙内流(store-operatedcalciumentry,SOCE)过程中的重要分子Orai1和STIM1表达水平。结果显示,SOCC抑制剂2-APB对MCF-7细胞的迁移能力有抑制作用。si JAK3转染可显著抑制MCF-7细胞的迁移能力,降低SOCC活性,下调Orai1和STIM1的m RNA和蛋白表达水平。在JAK3沉默细胞中过表达Orai1或STIM1,可使MCF-7细胞迁移力恢复。上述结果提示,JAK3通过影响SOCC促进乳腺癌细胞的迁移。
- 刘夏魏婷高招娣赵修粱吴慧晴严静
- 关键词：CA2+
- 针刺对高脂饮食肾损伤大鼠过氧化物酶增殖体活化受体γ蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察针刺对高脂饮食肾损伤大鼠过氧化物酶增殖体活化受体γ(PPAPγ)蛋白表达及肾细胞凋亡的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组(n=10)和高脂组(n=40),高脂组建立高脂饮食肾损伤大鼠模型,再随机分为模型组(n=10)和针刺组(n=10),针刺组大鼠取足三里穴、内庭穴和天枢穴行针刺治疗,模型组大鼠不做治疗,14 d后处死,苏木精-伊红染色法观察模型组和针刺组大鼠肾组织形态学变化,免疫组织化学法检测肾组织PPARγ蛋白表达变化,原位末端转移酶标记法检测肾细胞凋亡情况,并与正常组大鼠进行比较。结果正常组大鼠肾脏正常皮质结构存在,未见髓质结构;模型组大鼠有个别肾小球内毛细血管局灶性玻璃样变性,近曲小管肿胀、变性、空泡形成,肾间质可见大量炎性细胞浸润;针刺组大鼠仍可见肾小管上皮细胞玻璃样变性,与模型组大鼠相比,肾小球内毛细血管玻璃样变性减少,肾小管上皮细胞空泡变性显著减少。与正常组大鼠比较,针刺组肾组织PPARγ蛋白表达无显著变化(P>0.05),而模型组大鼠肾组织PPARγ蛋白表达显著降低(P<0.05);针刺组大鼠肾组织PPARγ蛋白表达与模型组比较显著升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组和针刺组大鼠的肾细胞凋亡指数均显著升高(P<0.05),但针刺组大鼠肾细胞凋亡指数与模型组比较显著降低(P<0.05)。结论针刺可能通过提高大鼠PPARγ蛋白表达,抑制肾细胞凋亡,减轻高脂饮食对肾脏的损伤。
- 侯慧芳王永玲孟莉高建芝
- 关键词：针刺高脂血症
- 动脉粥样硬化的发生机制及西药治疗现状被引量：12
- 2013年
- 探讨动脉粥样硬化(AS)的发生机制及西药治疗现状。通过查阅近几年国内外有关AS的文献,分析、归纳关于AS发生原因、发病机制及目前临床上所应用西药的治疗机制及疗效,总结出目前AS发病机制尚未完全阐明,炎症反应在AS发生发展中可能起着重要作用。今后应在AS炎症发病机制上做更深入的研究,同时也为研发治疗AS的新型药物提供更好的思路和方法。
- 郭志刚尹雅玲李鹏潘国聘孙瑞利贾岩龙万光瑞
- 关键词：动脉粥样硬化
- 孕酮对小鼠放射性脑损伤的神经保护作用及分子机制被引量：7
- 2018年
- 目的探讨孕酮对小鼠放射性脑损伤的神经保护作用及其可能分子机制。方法 144只小鼠分为溶剂对照组、单纯照射组和孕酮组,采用Morris水迷宫实验评价小鼠空间学习和记忆能力;干/湿法测定脑含水量;ELISA法检测脑脊液三磷酸腺苷(ATP)、环氧合酶-2(COX-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的含量;Western blot法检测脑组织P2X7受体蛋白表达水平。结果单纯照射组小鼠第4~7天平均潜伏期时间和寻找平台的路径总长均明显大于溶剂对照组,孕酮组明显短于单纯照射组(P=0.000 1);单纯照射组脑含水量和细胞凋亡率明显高于溶剂对照组,孕酮组明显低于单纯照射组(P=0.000 0);单纯照射组脑脊液ATP、COX-2、TNF-α和IL-6的含量明显高于溶剂对照组,孕酮组明显低于单纯照射组(P=0.010 9、0.004 6、0.007 8、0.001 4);单纯照射组小鼠脑组织P2X7受体蛋白的表达高于溶剂对照组,而孕酮组P2X7受体蛋白的表达水平明显低于单纯照射组。结论孕酮可能通过抑制ATP介导的P2X7R活化和炎症介质的释放,进而减轻脑水肿和减少细胞凋亡,起到保护放射性脑损伤所致的神经损害作用。
- 李卓张海三李新娟魏林郁
- 关键词：孕酮放射性脑损伤炎症介质
- 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活剂-1α rs2946385基因多态性与帕金森病的相关性被引量：2
- 2021年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活剂-1α(PGC-1α)rs2946385基因多态性与帕金森病(PD)发病风险及患者焦虑、认知的关系。方法选择2018年3月至2019年12月就诊于新乡医学院第一附属医院的86例PD患者(PD组)及86例健康体检人员(对照组)为研究对象。PD组患者根据运动症状分为强直少动型(AR-PD)组(n=44)和震颤为主型(TD-PD)组(n=42)。采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、统一帕金森病评定量表第三部分(UPDRS-Ⅲ)运动评分、简易精神状态评价量表(MMSE)及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)分别来评估PD患者的抑郁状态、焦虑状态运动功能及认知功能。取受试者外周静脉血提取基因组DNA,采用聚合酶链反应法扩增目的基因片段,并进行DNA测序,寻找突变。应用Chromas软件对rs2946385位点进行基因分型。结果PD组患者中认知功能下降、焦虑、抑郁患者所占比例显著高于对照组(P<0.05)。AR-PD组与TD-PD组患者中焦虑、抑郁患者所占比例比较差异均无统计学意义(P>0.05),AR-PD组患者中认知功能下降患者所占比例显著高于TD-PD组(P<0.05)。PD组患者与对照组CC基因型、等位基因C频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。AR-PD组与TD-PD组患者CC基因型、等位基因C频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。PD组中合并焦虑与不合并焦虑患者的基因型和等位基因分布比较差异均无统计学意义(P>0.05)。TD-PD组合并焦虑与不合并焦虑患者的基因型和等位基因分布比较差异无统计学意义(P>0.05)。AR-PD组合并焦虑患者中基因型CC患者所占比例及等位基因C频率显著低于不合并焦虑患者(P<0.05)。PD组、TD-PD组、AR-PD组合并认知功能下降与不合并认知功能下降患者的基因型和等位基因分布比较差异均无统计学意义(P>0.05)。年龄、性别、病程、PGC-1αrs2946385不是AR-PD合并焦虑的独立危险因素(P>0.05),UPDRS-Ⅲ评分
- 谷晓源车祥源马静宋净洋邢红霞李超堃
- 关键词：帕金森病基因多态性过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
- 一种适用于膜片钳研究的豚鼠心室肌细胞急性分离方法
- 2011年
- 目的获得适用于心肌细胞膜片钳研究的单个心室肌细胞。方法应用酶消化和机械分离的方法分离出生25~30 d的豚鼠心室肌细胞,从形态学及电生理学方面鉴定急性分离的豚鼠心室肌细胞活性,在电镜下观察活性较好的豚鼠心室肌细胞形态学特点,并选用活性较好的单个心室肌细胞进行膜片钳钳制,记录心室肌细胞Ik电流。结果形态学方面：活性较好的心室肌细胞边缘整齐,横纹清晰,膜的弹性较好,立体感较强。电生理方面：选用活性较好的单个心室肌细胞记录出典型的Ik电流曲线。结论该法可获得形态和生理特性良好的单个心室肌细胞。该方法适用于心肌细胞膜片钳研究,对深入探讨药物和毒物对心肌细胞离子通道及信号转导机制的作用机制具有重要价值。
- 张艳董献红李新强李晓娟李东亮
- 关键词：心室肌细胞全细胞膜片钳技术延迟整流钾电流
- 线粒体细胞色素b基因多态性与豫北地区帕金森病的关系
- 2020年
- 目的探讨线粒体细胞色素b(MT-CYB)基因多态性与豫北地区帕金森病(PD)的关系。方法选择2018年3月至2019年12月新乡医学院第一附属医院收治的104例PD患者为研究对象(PD组),另选择同期与PD组性别、年龄相匹配的95例健康体检者为对照组,抽取2组受试者清晨空腹肘静脉血4 mL,按照血液线粒体DNA提取试剂盒说明书提取线粒体DNA,采用MT-CYB基因的特异性引物序列及聚合酶链反应特异性扩增MT-CYB的基因序列,采用DNA测序分析MT-CYB基因变异情况。结果 MT-CYB基因存在m.14784 T> C位点、m.15043 G> A位点、m.15301G> A位点等3个与病变相关联的位点突变,其中PD组患者与对照组受试者m.14784 T> C位点均存在CC(纯合突变型)、CT(杂合突变型)、TT (野生型) 3种基因型,m.15043 G> A位点均存在AA(纯合突变型)、AG(杂合突变型)、GG(野生型) 3种基因型,m.15301G> A位点均存在AA(纯合突变型)、AG(杂合突变型)、GG(野生型)3种基因型。PD组患者MT-CYB基因m.14784 T> C位点CC基因型频率和C等位基因频率显著高于对照组受试者(P <0.05),TT基因型频率和T等位基因频率显著低于对照组受试者(P <0.05),CT基因型频率与对照组受试者比较差异无统计学意义(P> 0.05)。PD组患者MT-CYB基因m.15043 G> A位点GG基因型频率和G等位基因频率显著高于对照组受试者(P <0.05),AA基因型频率和A等位基因频率显著低于对照组受试者(P <0.05),AG基因型频率与对照组受试者比较差异无统计学意义(P> 0.05)。PD组患者MT-CYB基因m.15301 G> A位点AA基因型频率和A等位基因频率显著高于对照组受试者(P <0.05),GG基因型频率和G等位基因频率显著低于对照组受试者(P <0.05),AG基因型频率与对照组受试者比较差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 MT-CYB基因多态性在豫北地区PD发病中具有重要作用,MT-CYB基因m.14784 T> C、m.15043 G> A、m.15301G> A多态性可能与豫北地区PD的发生、发展相关。
- 宋净洋谷晓源吴亦琦范军林范玲玲王冠玉王小婉邢红霞李超堃
- 关键词：帕金森病基因多态性线粒体线粒体细胞色素B
- 胞外高浓度ATP诱导SH-SY5Y细胞的自噬和凋亡被引量：5
- 2014年
- 目的:观察胞外高浓度ATP损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,探讨损伤中自噬和凋亡发生的规律和特点。方法:培养的SH-SY5Y细胞按照加入ATP的浓度和作用时间进行分组。CCK-8法检测细胞生存率,单丹磺酰戊二胺染色检测自噬空泡的变化,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率变化,蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达。结果:(1)与对照组相比,不同浓度(3、6、9、12、15 mmol/L)的ATP作用3 h均使SH-SY5Y细胞存活率明显降低,且呈剂量依赖性;不同作用时间(1、2、3、6 h)ATP(6 mmol/L)也可使SHSY5Y细胞存活率明显降低,3 h达高峰,呈时间依赖性。(2)ATP作用1 h时SH-SY5Y细胞自噬空泡显著增多(P<0.05),随时间延长,6 h时降到对照水平;ATP作用1 h时,LC3-Ⅱ表达显著增强(P<0.05),形成高峰,与自噬空泡增多的时点重合,2 h、3 h时LC3-Ⅱ表达水平逐渐减弱,6 h时降到对照水平。(3)与对照组相比,ATP作用3 h后细胞凋亡率达高峰(P<0.05),6 h时仍然保持在3 h的水平;cleaved caspase-3表达量同步增强(P<0.05),6 h时达高峰。结论:胞外高浓度ATP能够诱导SH-SY5Y细胞自噬和凋亡;自噬增强在前,凋亡高潮在后;随着ATP作用时间的延长,凋亡占主导地位。
- 卢娜白瑞樱魏林郁李超堃李新娟赵红岗李东亮
- 关键词：腺苷三磷酸自噬
- γ-氨基丁酸受体ρ2亚基重组蛋白构建及表达被引量：1
- 2018年
- 目的构建γ-氨基丁酸受体ρ2(GABA_CR ρ2)基因的原核表达载体,诱导重组蛋白GABA_CR ρ2表达,转染SH-SY5Y细胞,实现GABA_CR ρ2亚基重组蛋白一过性表达。方法构建重组质粒p ET-ρ2-GFP-Tat;应用免疫印迹法检测GABA_CR ρ2表达;应用Ni^(2+)亲和层析柱纯化重组蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测GABA_CR ρ2蛋白纯度;荧光显微镜下观察GABA_CR ρ2的转导作用及细胞定位。将SH-SY5Y细胞分为正常组和低氧低糖组,正常组分为正常对照组(高糖培养基培养且无蛋白转染)和正常转染组(高糖培养基培养且进行蛋白转染);低氧低糖组分为处理组(低氧低糖条件下培养)和处理转染组(低氧低糖条件下培养且进行蛋白转染);使用细胞计数试剂盒检测各组细胞活力。结果重组质粒p ET30-ρ2-Tat构建正确。纯化后的重组蛋白ρ2-Tat成功透过细胞膜转染SH-SY5Y细胞。正常对照组、正常转染组、处理组和处理转染组的细胞活力分别为(100.0±6.9)%、(89.3±3.6)%、(51.4±3.6)%和(66.1±8.5)%。正常对照组与正常转染组细胞活力比较差异无统计学意义(P>0.05);处理组细胞活力显著低于正常对照组(P<0.01),处理转染组细胞活力显著高于处理组(P<0.01)。结论重组蛋白ρ2在Tat转导肽介导作用下透过细胞膜,成功建立了一过性表达重组蛋白ρ2的SH-SY5Y细胞株,为研究ρ2亚基的功能提供了新的研究方法。
- 王琪李超堃李敏安欣芳付自醒
- 关键词：原核表达
