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复旦大学附属华山医院器官移植科: 作品数：20 被引量：56H指数：4; 相关作者：芮晓辉更多>>; 相关机构：东南大学附属中大医院南京医科大学第一临床医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技计划项目上海市卫生局科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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受体猪表达供体MHCⅡDRβ分子对肝移植物存活的影响被引量：1: 2006年; 目的通过回输表达供体部分MHCⅡDRβ分子的自体骨髓细胞,观察受体对供体肝移植物的排斥情况。方法将供体猪MHCⅡDRβ分子进行克隆,并通过基因重组技术将其克隆到反转录病毒载体pLNCX2上,经过细胞学操作获得有感染性的病毒颗粒；体外感染受体骨髓细胞,并将感染后的骨髓细胞回输给受体,随后采用Nothern杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法检测供体基因的表达,并通过MLR反应检测受体对供体的免疫排异反应；之后进行全肝脏移植实验,观测移植物的排异反应。结果实验组6头受体全部有外源基因的表达；进行回输后受体免疫功能都基本回复,MLR检测显示受体对供体的反应性明显下降,而对第三方的有较强的排异反应；进行移植后实验组中的5头移植物存活良好,而对照组于12～18周先后死亡,两者差异有统计学意义(P＜0．05)。结论猪受体在接受供体肝脏移植前,如果用供体的部分MHCⅡDRβ分子进行修饰并在体内进行表达,可以明显延长移植物的存活时间。; 钱建民张浩芮晓辉史留斌王乾伟李国祥; 关键词：肝移植骨髓细胞

调节性T细胞和共刺激通路阻断剂抑制大鼠肝移植急性排斥反应的研究被引量：4: 2007年; 目的探讨 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞、共刺激通路阻断剂 CD154单抗及两者联合应用在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法 48例原位肝移植大鼠(DA→Lewis)分为 A 组:对照组;B 组:术前7 d 回输经 DA 大鼠脾细胞体外激活的 Lewis 大鼠 CD4^+CD25^+细胞;C 组:术后第1、2 d 腹腔注射 CD154单抗(15 mg/kg);D 组:联合应用 CD4^+CD25^+细胞和 CD154单抗。术后7 d 各组处死6只受体,观察移植肝病理变化,检测移植肝内 T 细胞亚群和细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10和转化生长因子β1(TGFβ1)表达情况;分离脾淋巴细胞与供体行单向混合淋巴细胞反应观察刺激指数。余大鼠观察生存情况。结果 D 组平均存活时间(52.00±10.64)d 明显长于其他各组(P<0.01);移植肝内淋巴细胞浸润数量(2.47±0.61)×10~6和 CD8^+细胞百分比(14.2±3.0)%明显低于 B、C 组(P<0.05、P<0.01),而 CD4^+CD25^+细胞比例(16.4±4.3)%高于 B、C 组(P<0.05,P<0.01)。移植物内 IL-2 mRNA 表达 A 组最高,D 组最弱;IL-4 mRNA 各组均弱表达;IL-10mRNAB、D 组高表达,A、C 组未表达;TGFβ1 mRNA B、D 组表达明显强于 A、C 组。单向混合淋巴细胞反应 D 组刺激指数最低(P<0.05)。结论 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞和共刺激通路阻断剂 CD154单抗均能抑制大鼠肝移植急性排斥反应;联合应用 CD154单抗明显增强 CD4^+CD25^+调节性 T 细胞对急性排斥反应的抑制作用。; 史留斌张弘炜彭承宏; 关键词：肝移植 CD4^+CD25^+T细胞

肝移植病人术后急性肾功能衰竭18例临床分析被引量：3: 2007年; 目的:探讨影响肝移植术后发生急性肾功能衰竭的原因及处理方法。方法:回顾性分析我院91例肝移植病人中发生与未发生术后急性肾功能衰竭病人的临床资料,采用单因素分析和Logistic回归模型进行多因素分析。结果:肾衰组病人1年生存率低于对照组;与术后发生早期急性肾功能衰竭的有关因素包括术前血清肌酐、总胆红素、总手术时间、术中出血量、输血量、术中输液总量、术中尿量。术前血清肌酐高和术中尿量是术后早期急性肾功能衰竭发生的独立影响因素。移植术后发生急性肾功能衰竭的病人ICU留置时间延长,术后住院时间延长,住院费用升高。结论:肝移植术后有较高的急性肾功能衰竭发生率,对术后少尿、血清肌酐水平升高的病人及早实施肾脏替代等治疗能有效降低其发病率和死亡率。; 王乾伟史留斌芮晓晖钱建民; 关键词：肝移植手术后并发症

Cavaplasty(腔静脉成型术)在原位肝移植中的应用--附63例报告: 目的:对一种新的肝移植术式(腔静脉成型术)进行评价. 方法:总结2001年6月至2003年12月期间采用腔静脉成形技术完成的63例原位肝移植的临床资料,并与同期采用经典原位肝移植技术完成的32例肝移植病人资料进行对...; 钱建民张元芳张浩史留斌芮晓晖张群华宋宁石伟王乾伟倪泉兴; 关键词：肝移植术血流动力学适应证; 文献传递

核因子-κB和诱导性一氧化氮合成酶在大鼠肝脏小移植物缺血预处理中的作用被引量：6: 2005年; 目的　探讨核因子 κB(NF κB)和诱导性一氧化氮合成酶 (iNOS)在大鼠肝脏小移植物缺血预处理中的作用。方法　雄性SD大鼠随机分成 5组 :假手术组 (A组 ) ;小移植物组 (B组 ) ;应用二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)的小移植物组 (C组 ) ;应用缺血预处理 (IPC)的小移植物组 (D组 ) ;应用PDTC +IPC的小移植物组 (E组 )。电泳迁移率改变法 (EMSA )检测小移植物植入后 5个时间点肝脏组织中NF κB活性 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测iNOS在肝组织中的表达 ,检测肝脏脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)的浓度。结果　A组肝组织中NF κB的活性很弱。B、C、D、E 4组NF κB变化趋势相仿 ,一般在恢复灌注后即活化 ,峰值出现在 3h(IPC) ;活化峰值强度B组 >C组 >D组 >E组。再灌注 2h后B、C、D、E组肝组织中iNOS表达水平开始升高 ,6h达到峰值 ,其值B组 >D组 >C组 >E组 (P <0 .0 5 ) ,随后逐渐下降 ;至 12h仍高于对照组的水平。MDA的结果变化和iNOS表达水平变化类似 ,SOD呈相反变化。结论　NF κB在大鼠肝脏缺血预处理小移植物中起重要作用。抑制供肝组织中NF κB的活性可显著降低再灌注早期供肝组织中iNOS表达和氧自由基水平 ,并有效改善供肝的再灌注损伤。针对NF; 钱建民张浩吴晓峰; 关键词：移植物鼠肝缺血预处理 INOS表达超氧化物歧化酶(SOD)

反转录病毒载体介导猪MHCⅡ分子在猪骨髓细胞中的表达被引量：2: 2005年; 目的构建猪MHCⅡ分子的反转录病毒表达载体,建立产生病毒颗粒的包装细胞株,体外转导小型猪骨髓细胞并观察目的基因的表达情况,为研究小型猪转导同种异体MHCⅡ分子对于肝脏移植特异性免疫耐受的诱导提供实验基础和实验材料。方法利用基因重组技术将目的基因SLA-DRBdd、SLA—DQAdd和SLA-DQBdd克隆到反转录病毒载体pLNCX2上,通过脂质体转染包装细胞AmphoPackTM-293细胞,从G418筛选阳性克隆细胞培养上清中获得了有感染性的病毒颗粒;并对体外培养的猪骨髓细胞进行了感染,采用Nothern杂交和逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)等方法检测了目的基因在骨髓细胞中的表达。结果经过酶切和测序验证已成功构建了 MHCⅡ分子的反转录病毒表达载体,在转染AmphoPackTM-293细胞后可以产生有感染性的重组病毒颗粒,稳定的CFM-GFG418抗性率为6％～11％,RT结果显示抗性细胞中有目的基因的RNA 转录产物存在,而转染空载体的对照组没有。结论重组有目的基因的逆转录病毒载体pLNCX2 经过包装细胞AmphoPackTM-293产生的病毒颗粒可以有效地将猪MHCⅡ分子转导入猪的骨髓细胞并获得长期稳定的表达。; 钱建民芮晓晖史留斌王乾伟李国祥; 关键词：逆转录病毒载体

CD4^＋CD25^＋T细胞联合CD154单抗抑制大鼠肝移植急性排斥反应的研究被引量：8: 2007年; 目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞联合应用CD154单抗在抑制大鼠肝移植急性排斥反应中的作用。方法分离Lewis大鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞后与DA大鼠脾细胞单向混合淋巴细胞反应行体外激活。用“二袖套法”行DA到Lewis的原位肝移植48例。A组为对照组；B、C组单独术前回输体外激活的CD4^＋CD25^＋T细胞或术后腹腔注射抗CD154单抗；D组联合应用CD4^＋CD25^＋T细胞和CD154单抗。每组大鼠12对。术后7d各组处死6只受体，检测移植肝内T细胞亚群和细胞因子水平。余大鼠观察生存情况，死亡大鼠观察移植肝病理变化。结果D组受体生存期（52．00±10．64）d明显长于B、C组（P〈0．01）；移植肝内CD4^＋CD25^＋T细胞比例（16．43±4．28）％明显高于B、C组（P〈0．05、P〈0．01），而淋巴细胞浸润数量[（3．47±1．21）％×10^6]和CD8^＋T细胞百分比（14．19±3＋02）％明显低于B、C组（P〈0．05、P〈0．01）；移植肝内白细胞介素-2（IL-2）水平（6．44±1．83）ng／L低于B、C组（P〈0．05）。IL-10（43．72±7．55）ng／L和转化生长因子-β1（TGF-β1）（270．06±46．91）ng／L明显高于B、C组（P〈0．05、P〈0．01）。结论联合应用CD154单抗能明显增强CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对大鼠肝移植急性排斥反应的抑制作用。; 张弘炜史留斌彭承宏; 关键词：肝移植 T细胞 CD154 排斥反应

下游调控元件拮抗调节子基因在人肝癌组织中的表达及其意义: 2008年; 目的观察人肝癌组织下游调控元件拮抗调节子（DREAM）的表达。方法应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测10例人中晚期肝癌及其癌旁正常组织中DREAM mRNA基因的相对表达量，并采用免疫组织化学法检测DREAM在上述组织中的表达情况。结果80％（8／10）的肝癌组织中DREAM表达缺失，而癌旁组织中仅30％（3／10）该基因表达缺失，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论中晚期肝癌中DREAM表达处于失活状态，可能在肝癌的发生、发展过程中发挥重要作用。; 周业庭吴柏华刘伟平钱建民; 关键词：DREAM

MCM2p、p16INK4A和Ki-67在肝癌组织中的表达被引量：1: 2008年; 目的探讨MCM2p在肝癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖活性的关系。方法采用免疫组织化学法检测MCM2p、p161NK4A和Ki-67在肝细胞肝癌及其相应的癌旁正常组织中的表达。结果肝癌组织MCM2p和Ki-67的表达显著高于癌旁肝组织（P〈0．01），而p161NK4A表达显著低于癌旁肝组织（P〈0．01）。MCM2p的表达和Ki-67的表达状况关系密切，呈正相关，而与p161NK4A表达呈负相关。结论MCM2p和Ki-67在肝癌组织中呈高表达，并与肝癌的发生发展及肿瘤的增殖活性有关。; 周业庭吴柏华钱建民; 关键词：肝细胞免疫组织化学 P16 KI-67

腔静脉成形术在原位肝移植中的应用(附63例报道)被引量：1: 2004年; 目的　对腔静脉成形术这种新的肝移植术式进行评价。方法　总结 2 0 0 2年 6月～ 2 0 0 4年 6月采用腔静脉成形术完成的 6 3例原位肝移植患者的临床资料 ,并与同期采用经典原位肝移植技术完成的 32例肝移植患者的资料进行对比。结果　腔静脉成形肝移植组术中大剂量血管收缩药的应用、术后腹腔出血再次探查和术后肾功能衰竭的发生率较经典原位肝移植组显著减少 (P <0 .0 5 ) ;前者未发生腔静脉并发症 ,后者发生腔静脉并发症 4例 ;腔静脉成形肝移植组的手术时间为 (5 .3± 1.9)h ,明显短于经典原位肝移植组的 (7.7± 2 .5 )h(P <0 .0 1) ;腔静脉成形肝移植组的无肝期时间为 (6 2± 13)min ,经典原位肝移植组为 (73± 19)min ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;腔静脉成形肝移植组的失血量和输血量分别为 (2 10 0± 114 0 )ml和 (2 4 0 0± 110 0 )ml,均明显少于经典原位肝移植组的 (4 380± 2 10 0 )ml和 (4 80 0± 170 0 )ml(P值均 <0 .0 1) ;腔静脉成形肝移植组的术后腹腔引流量为 (970± 2 30 )ml,明显少于经典原位肝移植组的 (116 0± 310 )ml(P <0 .0 5 )。两组拔除气管插管时间、重症监护室留置时间和住院时间的差异无显著性。结论　腔静脉成形肝移植术无需解剖肝后腔静脉 ,肝下腔静脉得以保留。; 钱建民张浩芮晓晖史留斌宋宁石伟王乾伟张元芳; 关键词：原位肝移植并发症输血量手术时间肝移植术

复旦大学附属华山医院器官移植科

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