东北农业大学生命科学学院黑龙江省动物细胞与遗传工程重点实验室
- 作品数：14 被引量：23H指数：3
- 相关作者：孙梦杨康更多>>
- 相关机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- Mito-Tempo修复过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤机制研究被引量：2
- 2023年
- 本研究探讨线粒体靶向抗氧化剂Mito-Tempo对过氧化氢诱导猪卵母细胞线粒体损伤修复的影响。在猪卵母细胞体外成熟过程中添加10 mmol·L^(-1)过氧化氢或过氧化氢+0.1μmol·L^(-1)Mito-Tempo,检测卵丘细胞扩散、卵母细胞成熟及线粒体功能相关因子,观察孤雌胚胎发育情况。结果表明,与过氧化氢组相比,添加Mito-Tempo可显著提高卵丘细胞扩散指数,显著降低Mito SOX水平,提高膜电位及线粒体功能基因表达水平,显著改善猪卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎发育能力(P<0.05)。证明Mito-Tempo对过氧化氢诱导的猪卵母细胞线粒体损伤具有修复功能。
- 金君学綦新月刘子瑜张吉龙马祥钧孙婧陶
- 关键词：卵母细胞线粒体
- Krt19在小鼠早期妊娠子宫的表达和调节被引量：1
- 2023年
- 角蛋白19(Keratin19,Krt19)是Ⅰ型角蛋白家族中的一员,为研究Krt19在小鼠早期妊娠过程中的表达及调控,本研究利用原位杂交、免疫组织化学、Western blot、real-time PCR等技术,结合小鼠早期妊娠模型、激素处理模型、延迟着床与激活模型和人工诱导蜕膜化模型,研究了Krt19 mRNA以及蛋白在小鼠子宫中的表达情况。结果显示,Krt19 mRNA和蛋白在小鼠早期妊娠1~4 d的腔上皮和腺上皮中强表达,在5~8 d子宫腔上皮、腺上皮及蜕膜中表达;在延迟着床时,Krt19在子宫腔上皮和腺上皮强表达,注射雌激素激活后,Krt19在腔上皮和腺上皮的表达减弱,在激活的胚胎着床位点下基质细胞中有弱表达;雌激素上调Krt19在子宫中的表达;Krt19在人工诱导蜕膜化的子宫基质细胞中表达。结果表明,Krt19参与了胚胎着床过程,并受类固醇激素的调控,与蜕膜化过程密切相关。
- 王静徐鹏王梦媛孙宇孟令帅李世杰马兴红
- 关键词：胚胎着床蜕膜化角蛋白小鼠子宫
- 稳定pH值对猪精液液态保存效果的影响被引量：8
- 2018年
- 为了研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,找到适合猪精液液态保存pH值,从而改进液态保存液的配方,提高人工授精效率,试验比较了不同pH值条件下猪精液液态保存效果,通过检测精子活力、存活时间、顶体完整性和质膜完整性等参数,研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,并尝试改进保存缓冲液。结果表明:采用Androhep保存时,最佳初始保存pH值为6.40。在保存的第3天稳定pH值组能够显著提高精子活力(P<0.05),用2-吗啉乙磺酸(MES)代替Androhep保存液中的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES),在保存的第3天能显著提高精子活力、存活时间(P<0.05),同时维持更高的质膜完整性,但是顶体完整性差异不显著(P>0.05)。说明采用能够稳定pH值的保存液更有利于精液常温保存。
- 邢月超汪顺伟孙梦温晶王娜杨康张宇霆岳巍岳顺利周佳勃谭景和
- 关键词：猪精液PH值缓冲剂精子活力人工授精
- 和厚朴酚对猪热应激卵母细胞体外成熟的影响被引量：2
- 2022年
- 在成熟液中添加10μmol/L和厚朴酚,44 h后,检测卵母细胞中Sirt3蛋白表达、SOD2的乙酰化水平、活性氧水平、线粒体膜电位及孤雌激活胚胎的发育能力。结果显示,在成熟液中加入和厚朴酚后,可显著提高热应激卵母细胞体外成熟率及其后续胚胎体外发育能力(P<0.05)。此外,在和厚朴酚作用下,卵母细胞中Sirt3蛋白的表达显著提高、SOD2的乙酰化水平显著降低;同时,卵母细胞ROS水平降低,线粒体膜电位升高。结果表明,和厚朴酚可提高Sirt3活性,调节SOD2乙酰化水平,从而提高热应激猪卵母细胞体外成熟率和胚胎发育能力。
- 金小虎石学颖孙良振林敬轶刘雪郭海涛王婧然王漠然岳顺利周佳勃
- 关键词：猪卵母细胞和厚朴酚热应激体外成熟
- EGTA对猪精液液态保存的影响被引量：3
- 2019年
- 猪精液液态保存体系中,钙离子浓度升高将降低精子活力,缩短精子体外保存时间。常用的金属螯合剂EDTA的溶解度较低,且容易发生沉淀,因此改进螯合剂对于改进猪精液保存液配方,提高猪精液液态保存质量十分重要。本研究中我们在精液液态保存液中分别添加不同浓度(1.5,3,6,12 mmol/L)的钙离子螯合剂EGTA,检测其对猪精子的活力、质膜完整性、顶体完整率、获能情况以及受精能力的影响。结果表明,精液保存液中添加EGTA能显著提高猪精子保存质量,其中添加3 mmol/L EGTA效果最好(P<0.05)。与对照组相比,添加3 mmol/L EGTA时,体外受精率和囊胚率显著提高(P<0.05)。因此,精液保存液中添加EGTA有助于提高猪精液液态保存的质量。
- 孙梦汪顺伟王娜郭海涛杨康马思楠岳顺利周佳勃
- 关键词：猪精液螯合剂液态保存钙离子EGTA
- 尿酸对猪精液液态保存效果的影响被引量：1
- 2022年
- 旨在探究尿酸对液态保存猪精子质量的影响。通过精子分析仪检测精子活力,低渗肿胀法检测精子的质膜完整性、比色法和硫代巴比妥酸法分别检测总抗氧化能力和丙二醛含量,荧光探针染色检测顶体完整性、活性氧含量和线粒体膜电位,体外受精检测精子受精能力和胚胎发育能力。结果显示,在保存液中添加一定质量浓度的尿酸有助.于提高猪精子质量,同时发现尿酸主要是通过提高精子的抗氧化能力和线粒体膜电位来维持精子质量。此外,本研究发现尿酸还能够提高精子受精能力和胚胎发育能力。结果表明,添加5.0 mg/L尿酸对17℃液态保存的猪精液有利,可为新型猪精液保存液的研发提供依据。
- 林敬轶刘雪金小虎石学颖张天羽李丹彤岳顺利周佳勃
- 关键词：猪精子尿酸液态保存抗氧化能力
- UHRF1在小鼠早期妊娠子宫中的表达与激素调节
- 2022年
- 泛素样PHD和含环指结构域的蛋白1(UHRF1)广泛表达在成人和胎儿的胸腺、胎儿的肝脏及骨髓中,其在胚胎发育、调节细胞周期、调控细胞的生长以及维持基因组的稳定性中发挥着重要的作用。本研究利用组织切片、原位杂交、免疫组织化学、Western blot、Real-time PCR等试验技术分析UHRF1的mRNA和蛋白的表达情况,来探究其在着床及蜕膜化过程中的表达规律。结果表明,UHRF1参与胚胎着床过程,其表达受到类固醇激素的调控,与蜕膜化过程密切相关。
- 金鑫王静孙宇李世杰马兴红
- 关键词：着床蜕膜化小鼠子宫
- 哺乳动物孤雌干细胞与孤雌生殖
- 2021年
- 未受精的孤雌胚胎衍生的孤雌胚胎干细胞(parthenogenetic embryonic stem cells,pESCs),具有与胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)相似的多向分化和自我更新能力,且具备来源广泛、获取高效及低致瘤性等优势,因此成为近年来的研究热点。该文概述了pESCs特殊的组织相容性和基因组印迹特征,综述其在孤雌生殖等方面的应用,并对其在遗传疾病及临床研究中的价值进行了展望。
- 方园柴梦佳孔庆然刘忠华
- 关键词：孤雌胚胎干细胞组织相容性基因组印迹孤雌生殖
- 氢化可的松对保存过程中猪精子的影响
- 2020年
- 动物长期处于应激状态会影响其生育能力。应激对雄性动物生殖影响的研究多在体内进行,但在体外研究甚少,因此本试验在体外添加糖皮质激素研究其对猪精子各项生理指标的影响。试验首先在液态保存中分别添加不同质量浓度的氢化可的松(0.1,0.25,0.5,10.0,50.0 mg/L),检测其对猪精子活力的影响。结果显示,从0.25 mg/L应激质量浓度氢化可的松开始精子活力逐渐下降且均低于对照组(P<0.05)。之后通过蛋白质印迹法在射出的猪精子中证明存在糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)。免疫荧光检测表明GR主要在精子顶体后区及尾部中段表达。精子保存第5天时,氢化可的松+米非司酮处理组精子活力显著高于氢化可的松单独处理组(P<0.05)。随后又检测了长期(5 d)处于应激质量浓度氢化可的松作用下,精子DNA碎裂(DFI)、线粒体膜电位(MMP)、精子凋亡水平。结果表明,精子DFI增加,线粒体功能下降,凋亡比例增加,而这些作用可以被米非司酮拮抗。因此表明氢化可的松可能是通过与其受体GR结合干扰线粒体功能而影响猪精子。
- 孙欢欢王娜孙良振郭海涛王婧然杨康周佳勃谭景和
- 关键词：猪精液液态保存糖皮质激素受体米非司酮
- 10种血清型腺相关病毒在哺乳动物子宫原代细胞中的转导
- 2023年
- 为探究10种血清型腺相关病毒(AVV)在哺乳动物子宫原代细胞中的转导情况并筛选出转导效率高的血清型,通过酶消化法获取哺乳动物子宫上皮和基质细胞、Real-Time PCR测定病毒滴度以及荧光显微镜观察和Western blot技术探究其转导效率。结果显示,10种血清型在小鼠子宫上皮细胞中,AAV-DJ可转导;在小鼠子宫基质细胞中的转导效率为AAV-DJ>AAV1、AAV2、AAV5>AAV9。在兔子宫上皮细胞中的转导效率为AAV5、AAV-DJ>AAV2>AAV9;在兔子宫基质细胞中的转导效率为AAV-DJ>AAV1、AAV2、AAV5>AAV9。在猪子宫上皮和基质细胞中的转导效率为AAV-DJ>AAV2、AAV5>AAV1。在人子宫基质细胞系中的转导效率为AAV-DJ>AAV2、AAV9>AAV1、AAV3>AAV8。综上所述,在转导哺乳动物子宫上皮细胞时,AAV-DJ、AAV5和AAV2效果较好;在转导哺乳动物子宫基质细胞时,AAV-DJ、AAV2、AAV9、AAV5、AAV1效果较好。
- 王梦媛孙宇孟令帅李世杰马兴红
- 关键词：腺相关病毒哺乳动物血清型
