广东第二师范学院生物与食品工程学院广东高校应用生态工程技术开发中心
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
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- 不同倍性白姜花切花挥发性成分差异分析被引量：1
- 2023年
- 为比较二倍体和四倍体白姜花(Hedychium coronarium)切花挥发性成分差异,采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术测定了二倍体和四倍体白姜花切花初开期、盛开期和初衰期释放物质种类,通过峰面积归一法测定了各成分的相对含量,建立正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型进行主成分分析和变量重要性投影(VIP)分析。结果表明,白姜花切花挥发性成分包含63种萜烯类、40种苯丙素类和22种脂肪酸衍生物类物质;萜烯类物质相对含量大于其他两类,四倍体白姜花在初开和盛开期挥发物质总质量极显著大于二倍体。二倍体与四倍体挥发性成分的组间差距明显,两个倍性组内差距在正常范围内;挥发性成分约63.7%的代表性特征得到较好聚类;优势成分和劣势成分均是两个倍性白姜花差异的重要成分。在盛开期和初衰期,α-罗勒烯是四倍体特有的且相对含量最大的优势成分,β-罗勒烯是二倍体中相对含量最大且显著多于四倍体的优势成分;二倍体和四倍体共有的优势成分和贡献较大的物质是石竹烯、沉香醇、桉树脑、α-金合欢烯和苯甲酸甲酯等。总体上,二倍体白姜花在四倍化过程中挥发性成分种类和总含量增加,相同倍性不同时期的挥发性成分种类和含量也存在差异,白姜花切花的挥发性成分以萜烯类为主。
- 张爱玲涂红艳肖望陆秋婵钟晓晴吕雨欣易新萍卢娜何灏城
- 关键词：四倍体挥发性成分气相色谱-质谱联用
- 白姜花生理生化和细胞结构变化与花衰老的相关分析被引量：1
- 2023年
- 以白姜花二倍体和四倍体切花为试材,通过蒽酮比色法、酸性茚三酮法和透射电镜法比较切花发育过程中生理生化指标和显微特征,解析影响白姜花切花衰老的生理机制,以期进一步了解白姜花切花衰老机理。结果表明:随着瓶插时间延长,二倍体花瓣和旗叶的可溶性糖含量显著下降,四倍体保持相对稳定并高于二倍体;花瓣可溶性蛋白质含量变化不明显,四倍体含量高于二倍体;花瓣脯氨酸含量呈现升高趋势,二倍体花瓣脯氨酸含量高于四倍体。花瓣和花冠管丙二醛含量变化不明显,花瓣丙二醛含量高于花冠管;二倍体花瓣和花冠管丙二醛含量均高于四倍体。花冠管相对电导率显著升高发生早于花瓣,四倍体花瓣和花冠管相对电导率显著升高发生晚于二倍体。在萎蔫期花瓣细胞出现空腔化,各种细胞器结构消失,出现小泡或囊泡。综上,细胞自噬是花瓣和花冠管细胞膜透性增加的原因。较高的可溶性糖和可溶性蛋白质含量以及花瓣和花冠管细胞质膜破坏推迟等是小花弯颈和花瓣萎蔫延迟的因素之一,有利于切花寿命的延长。
- 肖望涂红艳陆秋婵张爱玲梁水珍黄金维
- 关键词：四倍体切花衰老生理
- 利用薄层细胞培养技术建立所罗门姜黄高效植株再生体系被引量：3
- 2015年
- 以所罗门姜黄试管苗为外植体，从其茎基部依次横向切成0．5-0．8mm的薄层，研究不同激素组合、不同薄层部位和不同培养条件对不定芽诱导的影响．结果表明，从试管苗茎基部所切取的薄层以第1条生根部位所切薄层出芽能力最强；在MS＋3mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA的芽诱导培养基中，光照培养45d后，一棵试管苗所切薄层中最高可获得15个不定芽．不定芽在1／2MS＋1g/L活性炭的成苗培养基中长成完整植株．再生植株经过驯化，移栽室外存活率达95％以上．
- 涂红艳肖望谢君魏燕霞
- 关键词：植株再生体系
- 白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立被引量：13
- 2016年
- 将白姜花(Hedychium coronarium)未成熟花丝接种在MS+4 mg·L^(-1) 2,4-D+4 mg·L^(-1) NAA+1 mg·L^(-1) 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织:Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg·L^(-1) 2,4-D、0.25 mg·L^(-1) NAA、0.25 mg·L^(-1) 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐+0.25 mg·L^(-1) NAA+0.5 mg·L^(-1) TDZ+维生素B5+100 mg·L^(-1)谷氨酰胺+230 mg·L^(-1)脯氨酸+100 mg·L^(-1)麦芽提取物+45 g·L^(-1)蔗糖的体胚诱导培养基中培养20d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50~60个体胚。成熟体胚在MS+0.2mg·L^(-1) IAA+0.5 mg·L^(-1) 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2MS+1 g·L^(-1)活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体(2n=3x=51)、6株四倍体(2n=4x=68)和2株六倍体(2n=6x=102)。
- 肖望涂红艳张爱玲
- 关键词：胚性愈伤组织植株再生
- PI3K信号通路关键基因在猪卵泡发育中的表达规律被引量：5
- 2018年
- 【目的】研究不同时期猪卵巢卵泡发生的形态特征及磷脂酰肌醇3–激酶(Phosphoinositide 3-kinase,PI3K)信号通路关键基因在卵泡发生发育中的作用。【方法】通过HE染色观察12日龄、30日龄、70日龄、20月龄卵泡期及黄体期、48月龄的长大二元母猪卵巢卵泡发育的形态变化,应用实时荧光定量PCR检测PI3K通路关键基因在这些时期的表达规律,并通过Western blot法检测PI3K通路重要的下游效应因子p-rpS6在不同时期猪卵巢的表达情况。【结果】12日龄母猪卵巢皮质边缘有大量的原始卵泡,皮质与髓质交界处可见少量初级卵泡及个别的次级卵泡;30日龄母猪卵巢次级卵泡数量增加;70日龄出现3级卵泡;20月龄卵泡期、黄体期分别有大量成熟卵泡、大体积的黄体;48月龄较难观察到原始卵泡。PI3K通路抑制因子PTEN、TSC1、TSC2与激活因子PDK1、AKT1、mTOR的mRNA均在12日龄表达量最高,70日龄、48月龄表达量次之,30日龄和20月龄表达量最低;下游效应基因rpS6的mRNA 30日龄表达量最高,20和48月龄表达量最低,p-rpS6蛋白在12日龄、20月龄、48月龄母猪卵巢高表达,在30日龄、70日龄中几乎不表达。【结论】PI3K通路关键基因在不同时期母猪卵巢中的表达水平不同,说明该通路参与了猪卵泡的早期发生及卵泡成熟的调控过程。
- 辛晓萍袁晓龙陈炫张爱玲陈赞谋陈赞谋张哲张豪
- 关键词：PI3K通路卵泡发育
- 猪FAM213B基因mRNA和启动子的克隆及序列分析被引量：1
- 2017年
- 【目的】获得猪FAM213B基因完整mRNA和启动子序列,研究猪FAM213B基因表达,为探讨母猪妊娠的建立和胚胎发育调控机制奠定基础。【方法】通过5'RACE和3'RACE技术,获得基因完整mRNA序列,分析不同物种该基因氨基酸序列相似性;通过PCR克隆启动子区,并通过双荧光素酶报告基因载体系统转染猪子宫内膜细胞,研究其转录活性。【结果】猪FAM213B基因mRNA全长808 bp,其中5'UTR、CDS区和3'UTR长度分别为67、609(含终止密码子)和132 bp(不含poly A序列),在17~106位氨基酸之间存在硫氧还蛋白折叠结构域;与猪FAM213B基因其他2个潜在转录本相比,三者都包含硫氧还蛋白折叠结构域,但蛋白三级结构存在较大差异;猪FAM213B氨基酸序列与山羊、牛和绵羊高度相似,相似性分别为94.03%、93.03%和91.54%。克隆获得2 261 bp(-2 231/+30)的基因启动子序列,将其连接至双荧光素酶报告基因载体,转染猪子宫内膜细胞,发现获得的启动子片段能够启动下游报告基因的转录,在启动子区存在潜在的典型NFκB等转录因子结合位点。【结论】本研究获得猪FAM213B基因转录本长度为808 bp,其蛋白存在硫氧还蛋白折叠功能结构域,其启动子序列(-2 231/+30)在猪子宫内膜细胞中具有较强的转录活性。
- 张爱玲孙显月卢孝璋李加琪张豪
- 关键词：转录启动子子宫内膜细胞硫氧还蛋白
- 白姜花切花细胞程序性死亡标志检测
- 白姜花是我国南方重要的一种香型切花植物,也是香料工业的重要原料。白姜花切花寿命短（2-3d）,大大降低了其观赏价值和经济价值,影响白姜花切花寿命的分子机制亟待阐明。本课题组前期通过薄片培养结合秋水仙素诱变技术,获得的四倍...
- 张爱玲涂红艳幸洁华彭洁婷谭炽彤肖望
- 关键词：四倍体PCD
- 文献传递
- 猪LPAR3基因克隆及其在子宫内膜细胞的表达
- 2019年
- 【目的】获得猪LPAR3基因完整mRNA及基因结构,研究其启动子活性;探究LPAR3基因在子宫内膜的转录调控及可能影响母猪产仔的机制。【方法】应用5'RACE和3'RACE技术获取LPAR3基因完整mRNA序列;预测5'调控区潜在的启动子转录因子结合位点及CpG岛,构建不同长度的启动子双荧光素酶报告基因重组载体,与pRL-TK质粒共同转染至猪子宫内膜细胞,检测启动子活性;应用RT-qPCR比较LPAR3基因在妊娠第12天的二花脸猪和长大二元猪子宫内膜的相对表达量;应用亚硫酸氢钠修饰后测序比较LPAR3基因在妊娠第12天的二花脸猪和长大二元猪子宫内膜的甲基化状态。【结果】猪LPAR3 mRNA全长为2 127 bp,其中5'UTR和3'UTR的长度分别为202和860 bp,CDS区为1 065 bp。克隆获得包括LPAR3转录起始位点上游3 080 bp (–2 430/+650bp)的5'调控序列,分析预测显示该调控区不存在TATA box,存在GC元件、CPBP及糖皮质激素受体IR3等调控因子结合位点,且在–190/–84和–44/+651 bp处存在2个潜在CpG岛。成功构建9个不同长度的5'缺失报告重组载体并转染猪子宫内膜细胞。双荧光素酶活性检测结果显示,启动子P4(+454/+80 bp)的转录活性最高,其次是P6(–123/+80 bp)。RT-qPCR结果显示,妊娠第12天二花脸猪LPAR3基因在子宫内膜的表达量高于在其他组织的表达量,且极显著高于在妊娠第12天长大二元猪子宫内膜的表达量,LPAR3在2个猪种子宫内膜均处于低甲基化状态且差异不显著。【结论】猪LPAR3 mRNA全长为2 127 bp,妊娠第12天LAPR3基因在二花脸猪子宫内膜表达高于其在长大二元猪子宫内膜的表达,显示LPAR3可能参与了猪早期妊娠并影响产仔数。
- 廖妙容吴龙张爱玲钟玉宜温丽娟张豪袁晓龙李加琪张哲
- 关键词：启动子子宫内膜妊娠甲基化
- 猪羰基还原酶1(CBR1)基因克隆及组织表达谱分析被引量：1
- 2016年
- 为了深入研究猪羰基还原酶1(CBR1)基因的表达调控,通过PCR获得包括猪CBR1基因启动子和外显子、内含子的序列,并进行蛋白结构分析和系统进化关系比较,通过RT-PCR方法检测了CBR1基因在不同组织的表达丰度。结果表明,猪CBR1基因启动子区长度为2 875 bp,具有潜在典型的NFκB等转录因子结合位点;CBR1基因由3个外显子和2个内含子组成,外显子长度分别为289、108和437 bp,其中5′UTR和3′UTR分别为107 bp和242 bp,内含子长度分别为572 bp和3 219 bp,编码区由289个氨基酸组成;该蛋白为亲水性蛋白,无明显的信号肽,有2个跨膜区域;蛋白二级结构和三级结构主要由7个α-螺旋、7个β-折叠以及loop环构成。猪CBR1基因氨基酸序列与人、绵羊氨基酸的相似性较高,为84.48%。q RT-PCR结果表明,怀孕12 d的二花脸子宫内膜中CBR1基因m RNA的表达量极显著高于长大二元母猪;在怀孕12 d母猪9个组织中,CBR1在肾脏中的表达量最高,其次是肝脏和小肠。
- 张爱玲孙显月尹琪李加琪张豪
- 关键词：基因表达启动子
- 基于转录组测序的SSR位点在不同倍性白姜花株系多态性分析
- 研究姜花二倍体形成四倍体过程中与mRNA对应的DNA序列上的SSR是否发生变异,为探索四倍体白姜花性状发生变化可能的遗传机制奠定基础。在前期转录组测序基础上,统计SSR位点,设计特异SSR引物,提取二倍体和四倍体白姜花的...
- 张爱玲涂红艳吴泳薇林雅柔吴思彤莫水秀钟春晖蔡瑜佳丘妙莹肖望
- 关键词：多态性四倍体
- 文献传递
