桂林医学院科学实验中心
- 作品数：115 被引量：290H指数：8
- 相关作者：王建红陶叶杏武家才邱华锋曾攀更多>>
- 相关机构：广西医科大学药学院桂林理工大学材料科学与工程学院内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区卫生厅重点科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- 应用反义寡核苷酸沉默PDGFR-α表达对RPE细胞增生和凋亡的影响被引量：5
- 2012年
- 背景视网膜色素上皮（RPE）细胞能分泌血小板源性生长因子（PDGF），又具有PDGF受体（PDGFR），已有研究表明PDGF对增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的形成起着关键性作用。目的应用反义寡核苷酸（ASODN）技术抑制血小板源性生长因子受体-α（PDGFR-α）基因的表达，观察其对RPE细胞增生和凋亡的影响。方法将人RPE细胞株在含质量分数10％胎牛血清的低糖DMEM培养基中进行培养，取对数生长期细胞调节细胞密度为5×10^5个／孔，接种于96孔板，待细胞生长至80％～90％融合时进行转染。空白对照组不加PDGFR—dASODN及阳离子脂质体Lipofectamine 2000，1．0μmol／LLipo—ASODN组、2．0μmol／LLipo—ASODN组使用阳离子脂质体Lipofectamine2000将靶向PDGFR—a基因的ASODN转染至RPE细胞株。细胞转染48h后，MTT法检测各组细胞的吸光度（4）值并以A490表示，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测PDGFR—dmRNA在RPE细胞中表达的变化；hoechst33258荧光染色观察培养细胞的凋亡情况；流式细胞仪检测RPE细胞的细胞周期和凋亡率。结果空白对照组、1．0μmol／LLipo—ASODN组及2．0μmol／LLipo—ASODN组RPE细胞的A490值分别为1．45±0．12、1．07±0．06、0．65±0．05，差异有统计学意义（F=97．72，P=0．00），1．0μmol／LLipo—ASODN组和2．0μmol／LLipo—ASODN组RPE细胞A490值明显低于空白对照组，差异均有统计学意义（P=0．00、0．00）；2．0μmol／L Lipo—ASODN组RPE细胞A490值明显低于1．0μmol／LLipo—ASODN组，差异有统计学意义（P=0．00）。Hoechst33258荧光染色显示，转染PDGFR—αASODN后RPE细胞凋亡数量多于空白对照组。流式细胞仪检测表明，转染PDGFR—αASODN后RPE细胞阻滞于G0／G1期（F=206．70。P=0．00），1．0μmol／LLipo—ASODN组和2．0μmol／LLipo—ASODN组RPE细胞凋亡率均明显高于空白对照组（37．8±1．3vs10．5±0．1，61．2±1．9�
- 彭燕一邱梅园丁芝祥廖妙云范才文
- 关键词：反义寡核苷酸视网膜色素上皮细胞增生凋亡
- 桃金娘叶的化学成分研究被引量：8
- 2020年
- 目的:研究桃金娘Rhodomyrtus tomentosa(Ait.)Hassk.叶的化学成分。方法:应用各种色谱技术对桃金娘叶95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,并利用质谱及1H-NMR、13C-NMR等波谱技术鉴定化合物结构。结果:从桃金娘叶95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到12个化合物,分别鉴定为:19-norergosta-5,7,9,22-tetraene-3β-ol(1)、28-norlupa-17(22),20(28)-dien-3-ol,(3β)-(9CI)(2)、lupeol(3)、β-香树脂醇(4)、α-香树脂醇(5)、β-sitostenone(6)、对羟基苯乙酸甲酯(7)、(-)-loliolide(8)、(7S,8R)-4,9,9′-三羟基-3,3′-二甲氧基-7,8-二氢苯并呋喃-1′-丙基新木脂素(9)、4-羟基-2,3-二甲基-2-壬烯-4-内酯(10)、邻苯二甲酸二异丁酯(11)、邻苯二甲酸二丁酯(12)。结论:其中,化合物1、2、7~12为首次从该属植物中分离得到。
- 莫青胡周先丽周云罗琴黄晓陈旭梁成钦
- 关键词：桃金娘化学成分三萜类化合物
- CDC5L蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义被引量：1
- 2020年
- 目的:研究CDC5L蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达变化,分析其与临床病理的关系。方法:通过GEO公共数据库中的基因芯片数据分析CDC5L在口腔鳞癌和正常组织中的mRNA表达差异。采用免疫组织化学SP法检测CDC5L在口腔鳞癌组织及其癌旁黏膜组织中的蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理特征之间的关系。结果:口腔鳞癌中CDC5L mRNA和蛋白表达水平显著高于癌旁口腔黏膜组织(P<0.05),并且其在OSCC中的蛋白表达量与肿瘤分期显著相关,T1~T2期的癌组织中的表达量显著高于T3~T4期(P<0.05),与其他参数(年龄、性别、民族、血型、肿瘤大小、原发灶部位、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、吸烟、饮酒)均无显著相关性(P>0.05)。结论:CDC5L在OSCC中高表达,且蛋白表达量与肿瘤分期显著相关,提示CDC5L可能参与了OSCC的发生过程,与OSCC的关系值得进一步研究。
- 贾文仙蒋敏刘佳艺檀燕君韦怡李萍杨小丽
- 关键词：口腔鳞状细胞癌免疫组织化学GEO
- EGCG对鼻咽癌细胞株CNE-2及相关基因表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:研究EGCG对鼻咽癌细胞系CNE-2的增殖与凋亡作用,探讨其对细胞增殖与凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。方法:应用MTT实验、流式细胞仪检测细胞的增殖与周期;Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果:EGCG明显抑制CNE-2细胞的增殖,诱导其凋亡,该作用具有剂量-效应关系。EGCG抑制CNE-2细胞Bcl-2表达,诱导CNE-2细胞Bax、Caspase-3表达。结论:EGCG在体外具有抗鼻咽癌细胞的作用,此作用可能是通过调节细胞增殖与凋亡基因的表达实现的。
- 雷迅孔中雨范才文易世江向秋刘强和
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯鼻咽肿瘤CNE-2
- 顺铂诱导人鼻咽癌CNE2细胞衰老及其相关基因表达谱的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨顺铂体外诱导人鼻咽癌CNE2细胞衰老的效应及其分子机制。方法采用MTT比色法观察顺铂对CNE2细胞增殖的抑制作用,衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性评判细胞衰老,流式细胞术分析细胞周期分布,实时定量PCR法检测78个人类细胞衰老相关基因的表达。结果顺铂对CNE2细胞的增殖具有明显抑制作用;1.0 mg/L顺铂处理后第6和第8天检测SA-β-gal染色阳性细胞数分别达到67.63%和89.22%,细胞阻滞于G2期;TP53、TP63、p16Ink4a,p27Kip1、PTEN、RB1、Cdc25C、TBX3、Gadd45a、IGF1R、PIK3CA、BMI-1、B2M、MORC3、MYC和SPARC等16个衰老相关基因的m RNA水平显著升高(P<0.05或0.01),Cyclin A2、Cyclin B1、Cyclin E1、CDK6、ATM、ETS2、MDM2、E2F1、ETS1、FN1、IGFBP3、RBL2、SERPINB2及SIRT1等14个基因表达水平下降(P<0.05或0.01)。结论顺铂能够在体外诱导CNE2细胞衰老,其机制涉及p16和p27介导的p53-p RB和PTEN衰老信号调控网络。
- 杨飞城黄岚珍阳晶黄希仕蒋晓山
- 关键词：顺铂鼻咽癌细胞周期阻滞
- p27在荔枝核总黄酮抑制人肝星状细胞LX2增殖过程中的表达及其意义被引量：5
- 2015年
- 目的:研究荔枝核总黄酮(total flavonoids of litchi,TFL)对人肝星状细胞LX2增殖的影响及其相关作用机制.方法:使用不同浓度(7.8125、15.6250、31.2500、62.5000、125.0000μg/m L)TFL处理LX2.采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,通过流式细胞仪分析各组细胞周期的分布,使用RT-PCR和Western blot技术测定细胞中p27基因m RNA和蛋白的表达.结果:TFL作用48、72 h可抑制LX2细胞增殖,且随着时间延长,抑制效果更加明显.T F L处理72 h后可测得L X2细胞被阻滞在S期,且明显上调p27基因的m RNA和蛋白的表达.结论:TFL抑制人肝星状细胞增殖并将其阻滞在S期,该作用机制可能与p27表达上调相关.
- 徐伶俐罗伟生谭宁徐庆徐宾诸葛福艳
- 关键词：荔枝核总黄酮人肝星状细胞增殖S期P27
- 短发夹RNA对肝癌细胞细胞间粘附分子-1基因表达的影响被引量：5
- 2006年
- 目的利用小片段干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil-1/ICAM-1质粒,免疫组织化学结果显示:RNA干扰(RNAi)能特异而有效地抑制HepG2细胞中ICAM-1基因的表达。结论构建的pGenesil-1/ICAM-1重组质粒能有效抑制ICAM-1基因在肝癌细胞株HepG2中的表达和瘤细胞增殖。
- 廖维甲梅铭惠覃理灵向秋徐静范才文
- 关键词：短发夹RNAICAM-1HEPG2细胞基因表达
- 高校开放实验室在研究生培养中的思考被引量：4
- 2015年
- 我校科学实验中心是1个开放实验室,实行主管院长领导下的主任负责制,现有专职管理与技术人员13人。为了改善科学实验中心的实验条件与环境,近年来学校加大资金和人力投入,整合和购进一批大型精密仪器设备,建立了分子生物学、细胞生物学、流式分析、显微成像分析、基因分析、
- 范才文向秋
- 关键词：研究生培养实验室管理
- 甘草查尔酮A对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其机制被引量：2
- 2019年
- 目的探讨甘草查尔酮A(LCA)对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法将人骨肉瘤细胞分为空白组(LCA浓度为0μmol/L)、5μmol/LLCA组、10μmol/LLCA组、20μmol/LLCA组和40μmol/LLCA组。应用相应浓度的LCA干预5组细胞,干预24、48及72h后,分别检测5组人骨肉瘤细胞增殖的抑制率。干预48h后,检测5组细胞的凋亡率,以及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果空白组、5μmol/LLCA组、10μmol/LLCA组、20μmol/LLCA组、40μmol/LLCA组细胞增殖抑制率依次升高(均P<0.05),且各浓度LCA组细胞增殖的抑制率均有随时间增加的趋势(均P<0.05)。10μmol/L、20μmol/L、40μmol/LLCA组的细胞凋亡率依次升高,且均高于空白组(均P<0.05)。与空白组相比,20μmol/L、40μmol/LLCA组Bcl-2蛋白表达降低,10μmol/L、20μmol/L、40μmol/LLCA组Bax蛋白表达升高。结论LCA可以抑制人骨肉瘤细胞的增殖,且呈浓度及时间依赖性,并诱导其凋亡,亦具有一定的浓度依赖性,其分子机制可能与调控Bcl-2和Bax蛋白的表达有关。
- 王梨明范志浩范晓丽王娟王锐英辛林伟唐际存
- 关键词：骨肉瘤增殖凋亡凋亡相关蛋白
- 异麦芽酮糖减少小鼠肝脏脂肪堆积的关键基因筛选与验证被引量：1
- 2022年
- 为筛选和验证异麦芽酮糖减少小鼠肝脏脂肪堆积的关键基因,本研究利用Limma软件包对异麦芽酮糖和蔗糖饲喂22周的雄性小鼠肝脏转录组数据进行差异表达分析(GSE54723,n=14),共筛选出49个DEGs,通过Metascape软件对DEGs进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析,使用Cytoscape软件和WGCNA软件包构建基因共表达网络,取重叠基因搜寻关键节点基因,挖掘得到10个关键节点基因Pnliprp1、Prss2、Clps、Tff2、Pnlip、Ctrl、Cpa1、Cel、Dmbt1、Vil1,基因功能分析表明Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps与脂质代谢相关。qPCR结果显示,异麦芽酮糖组肝脏组织中这4个与脂质代谢相关基因的表达量显著高于蔗糖组,通过比较正常人和非酒精性脂肪肝患者肝脏组织转录组数据中上述基因的表达量(GSE163211,n=318),发现正常人Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps基因表达量亦显著(P<0.05)高于病例组。本研究揭示了异麦芽酮糖通过上调Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps的合成促进脂肪分解从而降低肝脏脂质的积累,为异麦芽酮糖影响肝脏脂质代谢的分子机制研究提供了理论支撑。
- 何秋玲张彩平桂静刘泳杏季久秀周波张震
- 关键词：异麦芽酮糖脂质代谢
