目的探讨组织工程骨对大鼠骨缺损的修复效果。方法取16只成年健康Wistar大鼠,体重250~300g,雌雄不限,制备血小板裂解液(plateletlysate,PL)。将PL、异体脱钙骨颗粒(allogeneic decalcified bone granules,ADBG)与ColⅠ凝胶混合,构建PL/ADBG/ColⅠ(PAC)及ADBG/ColⅠ(AC)。取8只成年健康Wistar大鼠,体重250~300g,雌雄不限,分离培养BMSCs。取第5代BMSCs以1×106个/mL浓度接种至PAC复合培养,体外构建组织工程骨(PACB)。另取成年健康Wistar大鼠40只,制备双侧股骨髁缺损模型,随机分为A、B、C、D4组(n=10),分别植入400mgPACB、PAC、AC和ColⅠ。术后4周,行X线片及组织学观察、ALP活性检测,评价骨缺损修复效果。结果术后4周,A、B、C、D组骨密度分别为(7.31±0.54)、(4.36±0.67)、(2.12±0.47)、(1.09±0.55)像素;修复区新生骨软骨和成活的移植骨片总面积分别为(412.82±22.31)、(266.57±17.22)、(94.34±20.22)、(26.12±12.51)像素/视野;股骨髁内ALP含量分别为(94.31±7.54)、(69.88±4.12)、(41.33±3.46)、(21.03±3.11)U/L;以上指标A组均高于B、C、D组,D组最低,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪分析显示,T细胞亚群CD3+CD4+CD8-、CD3+CD8+CD4-百分比和CD4/CD8比值在各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论体外构建的PACB可促进大鼠骨缺损修复。
目的探讨组织工程学血小板裂解液(PL)对骨重建的干预效应。方法将制备的同种异体PL、同种异体脱钙骨颗粒(ADBG)与I型胶原凝胶(collagen type I,CG)复合构建重组合材料后,取成年健康Wistar大鼠30只,制双侧股骨髁缺损,分A、B、C3组(10只/组),分别植入等量PL/ADBG/CG、ADBG/CG和CG,移植4周时经放射学、组织学及组织形态计量学、生物力学和免疫学检测,评价骨缺损的重建效果。结果(1)X线显示A组修复区阻射影密度接近正常骨质,骨密度计量分析显示A组(4.2±1.0),显著高于B(2.4±0.9)和C组(1.1±0.5),差异有统计学意义(P〈0.01);(2)组织学观察发现A组修复区有较多新生骨或移植骨片成活,无明显的淋巴细胞浸润,成骨活动和移植骨片破骨细胞性骨吸收均较B和C组明显活跃;形态计量分析显示A组单个视野的成骨面积(286.7±17.2)显著大于B(94.3±33.6)和C组(19.1±14.5),差异有统计学意义(P〈0.01);(3)抗压生物力学测试结果:破断载荷A、B、C、正常对照组分别为(259.6±34.6)、(187.9±21.1)、(91.3±26.6)、(311.94±82.4);破断能量A、B、C分别为(10.8±1.4)、(7.8±0.9)、(3.8±1.1)和(13.0±3.4);破断载荷和能量A组均显著高于B和C组,但低于正常对照,差异有统计学意义(P〈0.01);(4)三色流式细胞术分析显示,T细胞亚群CD3^+CD4^+CD8^-、CD3^+CD8^+CD4^-和CD4/CD8在各组间差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论组织工程学PL(PL/ADBG/CG)可加速骨缺损再生修复,并促进异体骨移植后骨吸收,从而加速骨整合重建。