上海市农业遗传育种重点实验室
- 作品数：233 被引量：1,140H指数：16
- 相关作者：殷秀辰黄亦辰何建华王天娇沈锋更多>>
- 相关机构：上海市农业科学院上海海洋大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目国家自然科学基金上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 犬诱导发情技术的研究进展
- 当前，我国犬的繁育工作明显滞后于其它家畜，不能满足社会需要，其主要原因之一就是犬的繁殖生理比较特殊，繁殖效率较低。有效的诱导发情技术可解决这一问题，同时也可以推动犬胚胎工程的研究工作。虽然已有多种药物用于犬诱导发情的研究...
- 滑志民戴建军张廷宇张树山吴彩凤
- 不同供体细胞及其处理对猪核移植重构胚体外发育的影响被引量：24
- 2007年
- 系统探讨了体细胞的组织来源及培养代数对猪核移植重构胚发育的影响。体外成熟培养40～44h的猪卵母细胞去核后，将经血清饥饿（0．5％FBS）培养2～9天、0．1mg／L Aphidicolin（APD）培养＋0．5％FBS培养2～9天或一般培养法（10％FBS）培养的卵丘细胞、颗粒细胞、输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞，直接注射到去核的卵母细胞质中，或注射到卵周隙中，再经电融合（100V／mm，30μs，电脉冲1次）构建重构胚．重构胚以钙离子载体A23817或电脉冲结合6．DMAP激活处理，体外培养6天。耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经0．1mg／LAPD＋0．5％FBS培养处理后的重组胚卵裂率，均高于血清饥饿和一般培养处理的同种供体细胞（P〈0．01）。卵丘细胞、颗粒细胞经0．1mg／LAPD＋0．5％FBS处理后进行核移植的分裂率和发育率均高于输卵管上皮细胞和耳皮成纤维细胞（P〈0．05）。以猪颗粒细胞为核供体时，电融合法的重构胚分裂率显著高于胞质内注入法（P〈0．05），但囊胚发育率无显著差异（P〉0．05）。培养3代和6代的猪颗粒细胞以及培养6代和10代的耳皮成纤维细胞，其具有正常二倍染色体的细胞比例均无显著差异（P〉0．05）；以这2种细胞不同培养代数做供体进行核移植时，各代之间核移胚的体外分裂率、囊胚发育率无显著差异（P〉0．05）。这些结果表明：（1）猪耳皮成纤维细胞和颗粒细胞经培养传代所建立起来的细胞系相对比较稳定；（2）0．1mg／LAPD预培养处理供体细胞能提高猪体细胞核移植的效果，血清饥饿培养则无明显效果；（3）猪颗粒细胞和耳皮成纤维细胞等均可做供核细胞，核移植后都能得到体细胞克隆的囊胚，但前者的效果略优于后者，且其核移植效果不受供核细胞培养代数的影响；（4）电融合核移植胚胎的发育率高于胞质内直接注入法，但�
- 张德福刘东汤琳琳王英陈茵王凯王根林KARL SchellanderLIN Cailu
- 关键词：体细胞核移植细胞周期
- 猪流感病毒SYBR GreenⅠ定量RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：11
- 2010年
- 为研究猪流感病毒(SIV)感染后SIV在体内的分布规律,本研究设计针对SIV NP基因保守区引物,建立了SIV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。该方法对SIV核酸检测灵敏度为30TCID50,对健康猪肺组织cDNA、猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)核酸呈阴性反应。采用建立的荧光定量RT-PCR方法对人工感染A/swine/Shanghai/1/2007/H1N2(Sw/SH/1/2007)猪进行检测,结果显示:病毒在猪鼻腔粘膜持续存在至感染后第8d;肛门拭子在感染后2d～8d可持续检测到病毒核酸;喉头、气管在感染后第3d可检到病毒核酸,并持续至第10d;肺部淋巴结、脾脏在感染后5d～7d检测到病毒核酸阳性;其它脏器均未检测到病毒核酸,从而确定呼吸道系统及脾脏是SIV定殖的主要场所,SIV感染猪后向外排毒周期约为1周。
- 张鹏超师小潇哈卓刘永杰刘惠莉
- 关键词：猪流感病毒SYBR
- 糯玉米离体培养获取耐盐变异体被引量：3
- 2009年
- 为获取糯玉米耐盐变异体,以120mg/L的平阳霉素预处理糯玉米自交系(S1、S2)种子20h,萌发后用茎尖诱导胚性愈伤组织,比较了激素组合对胚性愈伤组织诱导、继代和分化的影响。结果表明,2,4-D2.0mg/L和6-BA0.25mg/L组合诱导胚性愈伤的效果最好;在添加100mg/L CH、6-BA0.25mg/L和2,4-D2.0mg/L的继代培养基上愈伤组织生长良好。将胚性愈伤组织依次在含10、15和20g/L NaCl培养基中进行筛选,获得耐盐变异体,转入分化培养基中诱导再生植株,自交1代种子在含15和20g/LNaCl的培养基上萌发率较对照种子高数倍,在20g/L NaCl的胁迫下,变异体自交1代种子幼苗叶片中脯氨酸含量及K+/Na+比例明显高于对照。
- 陆瑞菊何婷王亦菲陈志伟杜志钊张燕敏黄剑华陈佩度沈雪芳王义发
- 关键词：糯玉米平阳霉素离体培养胚性愈伤组织耐盐变异体
- 重组牛白细胞介素-2对猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗的免疫增强试验
- 为确定重组牛白细胞介素-2(rbIL-2)对猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)疫苗的免疫增强作用,分别利用巴马小型猪和杜长上杂交肉猪(断奶初期)进行了猪蓝耳病弱毒疫苗接种时的牛IL-2注射试验.试验证明:rbIL-2制品对蓝...
- 李震周宗清于瑞嵩黄建珍孙景元赵磊刘惠莉李祥瑞
- 关键词：猪繁殖呼吸综合征猪蓝耳病免疫增强
- 文献传递
- 富含β-胡萝卜素转基因水稻EH基因水平转移研究
- 2016年
- 以富含β-胡萝卜素转基因水稻EH喂养大鼠,在90 d喂养试验结束后,分别对大鼠十二指肠、回肠、咬肌及肠道微生物进行相关基因PCR扩增,分析特异性片段在大鼠体内的转移情况。结果显示:试验中饲喂含45%转基因大米饲料、含45%亲本‘中花11'大米配合饲料和全价营养饲料的所有大鼠均未发生基因水平转移,表明转基因水稻EH中的外源基因没有向大鼠的组织和肠道微生物进行转移。
- 吴洋洋许燕胡瑞丽任方方赵凯唐雪明赵笑
- 关键词：转基因水稻基因水平转移
- 猪圆环病毒2型LAMP可视化快速检测方法的研究被引量：4
- 2016年
- 本研究旨在建立有效的针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及开发试剂盒。采用环介导等温扩增方法(LAMP)检测猪圆环病毒2型(PCV2),对PCV2的ORF2基因设计出3对特异性引物,扩增PCV2基因的最佳温度和时间优化到59℃孵育55 min。用该方法对临床样品进行检测,LAMP检测对PCV2的检测限为10拷贝/μL,而常规PCR检测法的检测限为1 000拷贝/μL,表明LAMP检测法灵敏度高。该检测法不会与猪圆环病毒Ⅰ型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎的猪病毒和轮状病毒发生交叉反应。用建立起的LAMP检测法对1 100个临床样品进行检测,950个样品被检测出为阳性样品。稳定性试验表明该试剂盒可以耐受至少40次的反复冻融。结果显示,该方法建立的猪圆环病毒2型诊断方法灵敏度高,特异性强,稳定性好。
- 胡瑞丽倪建平赵笑赵庆史斌赵桓震赵斌安赵凯
- 关键词：猪圆环病毒2型环介导等温扩增诊断试剂盒
- 转基因抗除草剂大豆ZH10-6转化体特异性定量检测体系的建立
- 2024年
- 以新型转基因抗除草剂大豆ZH10-6外源插入片段的旁侧序列为靶标,建立了转化体特异性实时荧光PCR和单通道微滴式数字PCR精准定量检测体系,并邀请8家农业农村部检测中心对检测方法的准确性进行验证。结果表明:该转化体特异性实时荧光定量检测方法具有良好的特异性、重复性及广泛的适用性,定量极限达到50 copies∕μL,检测极限达到5 copies∕μL。该检测方法有望作为检测标准用于转基因抗除草剂大豆ZH10-6的定量检测,为该大豆品系的商业化应用及转基因标识等监管提供技术支撑。
- 白蓝贾军伟贾军伟章寅潘爱虎吴潇
- 关键词：实时荧光PCR
- CRISPR-Cas系统在核酸检测中的应用研究被引量：1
- 2021年
- CRISPR-Cas系统是一种高效、实用的基因编辑工具,被广泛应用于基因组编辑和调控机制研究。目前发现的Cas系列核酸酶工具为开发用于各种目的的不同类型核酸检测,具有广阔的应用前景。CRISPR-Cas系统的高灵敏度和高特异性,使其在病原体检测、单核苷酸多态性(SNP)分析以及基因突变检测等发挥了极其重要的作用;另外,CRISPR-Cas系统在核酸检测领域的精确、高效性,间接推动了基础生物学和应用生物学研究的进展。概述了不同类型的靶向特定核酸检测的CRISPR-Cas系统的最新进展和用途,以及与之对应的新一代的体外检测平台,旨为核酸检测领域提供新的研究思路和理论依据。
- 胡秀文刘华王宇唐雪明唐雪明曾海娟王金斌李红
- 关键词：核酸检测
- 气孔保卫细胞大小与油菜单倍体及二倍体倍性的相关性研究被引量：5
- 2012年
- 对甘蓝型油菜2105品系种子萌发的二倍体植株和小孢子来源再生单倍体植株的不同叶位叶片气孔保卫细胞大小进行了测定,考察了不同叶片的保卫细胞长轴长、短轴长以及其周长差异,并对气孔保卫细胞大小与植株倍性的相关性进行了研究。结果表明:油菜单倍体与二倍体叶片气孔保卫细胞的长轴长、短轴长以及其周长存在显著差异;单倍体和二倍体气孔保卫细胞的周长计算值范围分别为43～59μm和75～94μm;相对于单一的长轴长或短轴长观测指标,利用长轴与短轴长度计算的周长值指标对单倍体与二倍体鉴定具有更宽的区分窗口,可用于油菜双单倍体群体构建中植株倍性的快速鉴定。
- 何婷刘成洪杜志钊高润红徐红卫邹磊王亦菲
- 关键词：油菜气孔保卫细胞倍性鉴定
