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温州医学院生命科学学院: 作品数：264 被引量：994H指数：14; 相关作者：董杰影朱涛沈炳棣何秋莎卓佳更多>>; 相关机构：华中师范大学生命科学学院温州大学生命与环境科学学院浙江海洋学院海洋科学与技术学院更多>>; 发文基金：温州市科技计划项目浙江省自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>

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美达霉素产生菌中立体专一性酮基还原酶基因med-ORF12的表达: 2012年; 美达霉素是链霉菌产生的具有强抗肿瘤活性的芳香聚酮类抗生素,其砒喃环并内酯结构对于其抗癌活性非常重要。位于美达霉素生物合成基因簇中的基因med-ORF12编码立体专一性酮基还原酶,可能参与美达霉素的砒喃环并内酯结构中手性中心(C3S)的形成,但在美达霉素产生菌中的功能和表达还未曾研究。【目的和方法】为了研究med-ORF12在野生菌中的表达情况以及与美达霉素生物合成的关系,本文采用了原核表达、抗体制备、免疫杂交等技术方法对这个基因展开了体内表达研究。【结果】首先利用pET载体建立了med-ORF12的原核表达系统,在优化诱导表达条件的基础上获得了可溶性目的蛋白,制备了相应的多抗血清;然后利用多抗血清对美达霉素产生菌中的基因med-ORF12的表达情况进行了检测,表明在美达霉素产生菌中参与次生代谢的med-ORF12在稳定期大量表达,同时伴随美达霉素的大量积累。【结论】这些结果表明在美达霉素产生菌中,基因med-ORF12参与次生代谢,其表达与美达霉素生物合成有一定相关性。; 孙锐刘明宫彩霞王蔚曾爱兵李爱英; 关键词：链霉菌次生代谢

美国红鱼免疫球蛋白的分离纯化被引量：4: 2010年; 对灿烂弧菌灭活疫苗接种后的美国红鱼提取血清,采用硫酸铵沉淀和SephadexG-200凝胶层析结合的方法分离纯化出美国红鱼血清免疫球蛋白,并且通过SDS-PAGE对纯化蛋白的部分特性进行分析。结果表明,通过硫酸铵沉淀法可以沉淀血清中大部分的蛋白,电泳条带比较丰富,但仍然含有较多的杂蛋白,经过SephadexG-200凝胶柱层析方法分离,获得纯度较高的免疫球蛋白,经β—巯基乙醇处理后解离形成重链和轻链两个亚单位,分子量分别为69.2 kDa,29.5 kDa,表明美国红鱼血清IgM的分子量与硬骨鱼IgM的分子量范围（H链60~81kDa,L链20-30kDa）是一致。; 罗轻蕾闫茂仓陈少波谢起浪单乐州朱进艾为明; 关键词：美国红鱼免疫球蛋白硫酸铵沉淀

大学生网络行为与抑郁焦虑的关系被引量：21: 2010年; 目的:探究抑郁和焦虑情绪对网络行为的影响,为管理大学生的网络行为提供参考策略。方法:随机抽取温州医学院324名学生作为调查对象,采用自评抑郁量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)和Young的网络成瘾量表进行调查。结果:回收有效问卷312份,网络成瘾检出率为35.3%,焦虑检出率为16.3%,抑郁检出率为14.1%。抑郁、焦虑和网络行为在不同性别方面没有显著差异。网络行为与抑郁、焦虑存在线性关系,并且网络行为的得分与抑郁、焦虑的得分存在高度的正相关,即抑郁、焦虑的得分高的学生网络行为的得分也高。结论:抑郁和焦虑情绪对网络行为会产生影响,缓解学生过度使用网络可以从调节抑郁焦虑情绪入手。; 胡存明李长瑾; 关键词：抑郁焦虑网络行为大学生

4种海藻抑制海洋病原菌活性成分的筛选被引量：1: 2011年; 弧菌病是由弧菌属（Vibrio）细菌引起的一类细菌性疾病,弧菌引起的疾病具有面积广、发病率高的特点,不仅给鱼类还给对虾、贝类等海水养殖生物造成巨大的影响。弧菌病的防治是海水养殖动物病害研究的主要领域之一。目前对海水养殖动物弧菌病的控制手段主要是用抗菌药物和消毒剂进行治疗，但这类化学药物的长期过量使用导致细菌抗药性的日益严重嘲，增加了病害的防治难度，同时抗生素在水产品体内的残留问题，也带来了公众对食品安全的担忧。海藻中存在着多种结构新颖、活性独特的化合物，已鉴定出脂类、酚类、萜类、多糖类、卤化物、含硫化合物等不同类型的抗菌活性成分。海藻成为发现抗菌活性成分的一个重要来源。; 陈少波南海函余海滨; 关键词：海藻弧菌活性

Solexa测序法在肺炎克雷伯菌质粒基因组测序中的应用: 2010年; Solexa测序方法以单分子阵列技术为基础，具有所需样品量少、高通量、高精确性、拥有简单易操作的自动化平台和功能强大等特点。可以同时检测上亿个核苷酸片段，在同一个芯片或几个芯片上花费很少的成本（只需常规方法的1％）就可测试全基因组。与传统的Sanger测序技术相比，无需建库与克隆挑取的工作，且每次反应只要7．5h，即可得到1亿个核苷酸序列，测序速度是传统Sanger方式的100倍。Solexa测序技术为目前遗传分析和功能基因组等研究领域提供了全新的应用方案。; 李劲松钱菊娣周铁丽包其郁; 关键词：基因组测序肺炎克雷伯菌测序法质粒测序技术功能基因组

CEQ^(TM)8800型遗传分析系统检测DNA序列的影响因素研究被引量：1: 2006年; 目的:研究DNA循环测序过程中一些影响因素及其序列图谱。方法:对测序中模板、引物、测序反应条件和体系及其产物的纯化等因素进行比较研究。结果:模板因素是测序成败的主要原因,模板的质量直接影响着测序图谱;引物失效,与模板匹配不完全,Tm值过低等因素也能引起测序失败;利用乙醇沉淀纯化测序反应产物、效果好且简单、经济。结论:模板的纯度和浓度对测序成功与否起决定作用。最佳反应条件可降低成本,提高测序成功率。仪器操作熟练、正确与否也会影响测序结果。; 季敬璋张洁吕建新; 关键词：DNA 测序影响因素

2株SARS相关冠状病毒主要结构蛋白基因的多态性分析: 2006年; 目的:分析2株SARS相关冠状病毒(Severeacuterespiratorysyndrome-associatedcoronavirus,SARS-CoV)HK21378和BJ104的主要结构蛋白基因序列的多态性以及蛋白质结构变化与功能的关系。方法:提取组织培养物中的SARS-CoV基因组RNA,对RT-PCR产物进行测序;以GZ02为参照序列,对蛋白质编码序列进行基因多态性分析和蛋白质结构与功能关系分析。结果:①与SARS-CoVGZ02株相比较,HK21378和BJ104主要结构蛋白编码序列共有14个变异位点,其中9个变异位点为两者共有3,个变异位点见于HK21378,2个变异位点见于BJ104;与GenBank数据库已发表的103株SARS-CoV基因组数据比较,变异位点22901(T→G)为BJ104特有,未见于已发表的其他SARS-CoV基因组中;在14个多态位点中,有5个多态位点为同义突变,其余9个为非同义突变。②14个变异位点中有11个变异发生在S蛋白编码区,其碱基变异频率为3.7/kb;2个见于M蛋白编码区,其碱基变异频率为3.0/kb;1个见于N蛋白编码区,碱基变异频率为0.8/kb;而E蛋白编码区未见变异位点。结论:SARS-CoV的主要结构蛋白编码区容易发生变异,尤其是膜表面S蛋白和M蛋白编码区。; 齐艳包其郁田薇徐建成; 关键词：SARS相关冠状病毒结构蛋白基因多态性

温州地区汉族人群血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性分析被引量：1: 2005年; 目的研究温州地区汉族人群血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失多态性分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)分别检测204例温州地区汉族正常人群样本的ACE I/D基因型,分类计数进行统计学分析。结果温州地区汉族正常人的ACE基因三种基因型频率分别为:DD型13.73%,D I型41.18%,II型45.09%。D和I等位基因频率分别为34.5%和65.5%。结论ACE基因多态性的分布与性别无关,温州地区汉族人群ACE基因频率分布与日本人相近,但DD型及D等位基因频率低于欧美人群。; 陈柏坤; 关键词：血管紧张素转换酶多态性 ACE基因

基因枪接种乙型肝炎表面抗原促进DNA疫苗诱生的免疫应答转换被引量：1: 2006年; 目的为了克服基因枪接种乙型肝炎表面抗原(HBsAg)DNA疫苗诱生的免疫应答以Th2为主的缺点,在基因枪接种质粒HBsAg DNA疫苗的同时共导入或共表达乙型肝炎病毒壳(HBV core)基因作为佐剂,以促进其所诱生的HBsAg特异性的Th2型免疫应答向Tn1型转换。方法构建可单独或共同表达HBsAg或核心抗原(HBcAg)的DNA免疫用载体pIRKS／core、pIRES／C149、pIRES／S、pIRES／S／Core和pIRES／S／C149,并在真核细胞进行表达验证。对BALB／c雌鼠进行免疫并检测小鼠免疫后的特异性体液免疫和细胞免疫指标。结果共导入或共表达HBV core基因能增强基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th1型免疫应答水平,包括HBsAg特异的IgG2a应答、CTL活性、IFN-γ产生能力等。结论以HBV core基因为佐剂能促进基因枪接种HBsAg DNA疫苗诱生的Th2型免疫应答向Th1型免疫应答转换。; 周晓辉刘玲刘华项黎袁正宏; 关键词：基因枪核酸疫苗

PGE_2对肝病大鼠创伤弧菌攻击后血清TNF-α、IL-10水平的影响及其肾组织的保护作用: 2006年; 目的探讨前列腺素E2(prostagland in E2,PGE2)免疫干预对肝病大鼠创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)攻击后TNF-α、IL-10的影响以及与肾组织超微结构改变的相关性。方法正常大鼠9只和肝病大鼠36只,分别为正常大鼠Vv攻击组、肝病大鼠Vv攻击组、肝病Vv攻击后氧氟沙星药物治疗组、肝病Vv攻击PGE2氧氟沙星联合保护组和肝病大鼠NS组(每组n=9)。ELISA法测定血清TNF-α和IL-10含量。取各组大鼠肾标本电镜下观察超微结构病理改变。结果肝病大鼠较正常大鼠Vv攻击后IL-10低而TNF-α高(P<0.05);PGE2免疫干预组肾组织超微结构明显改善。结论PGE2免疫干预能上调肝病大鼠血清IL-10,抑制TNF-α的分泌,对肝病大鼠Vv攻击后肾组织具有免疫保护作用。; 郑巧敏朱涛方周溪余平安周丽萍; 关键词：前列腺素E2 创伤弧菌 IL-10

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