解放军军需大学军事兽医研究所
- 作品数：501 被引量：1,995H指数：21
- 相关作者：王宏伟王祥生金洪涛袁慧君龚伟更多>>
- 相关机构：中国农业大学生物学院吉林农业大学动物科学技术学院东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 兽用孕马血清促性腺激素冻干针剂制备及其应用效果观察
- 孕马血清促性腺激素(PMSG)是由妊娠母马子宫内膜杯状细胞分泌的一种糖蛋白激素，分子量52KD，由于其具有FSH和LH的双重活性，且在体内的半衰期长，故而能强烈刺激母畜同期发情和超数排卵。本文论述了PMSG冻干针剂的制备...
- 谭建华安铁洙万忠海魏海军
- 关键词：孕马血清促性腺激素冻干针剂糖蛋白激素
- 文献传递
- 基因序列分析鉴定犬冠状病毒分离株被引量：4
- 2003年
- 采用双脱氧末端终止法测定了克隆于重组质粒YS1pUC、CI1pUC上的2株国分离病毒CCV YS1、CI1部分纤突蛋白基因序列,以计算机软件推导氨基酸序列,进行核苷酸和氨基酸序列的多重比校,绘制系统进化树,分析重要抗原位点氨基酸残基的变化情况,预测蛋白质疏水性和二级结构。结果表明:重组质粒中含有571bp的外源基因,核苷酸和氨基酸序列与国外发表的K378等5株CCV相应序列的同源性分别为91.7％～99.4％和92.0％～99.4％,而与猪传染性胃肠炎病毒PUR46株和猫传染性腹膜炎病毒1146株的同源性为90.2％和88.0％～90.0％。A抗原的Ab亚位点上的氨基酸残基与各株CCV相同,不同于其他冠状病毒。由此进一步证明,2株国内分离病毒CCV YS1、CI1为犬冠状病毒。
- 胡桂学柏亚铎高风山赵立峰夏咸柱
- 关键词：基因序列分析犬冠状病毒分离株
- 原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化被引量：21
- 2003年
- 对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- PAGE分析结果表明 ,其纯度达 97%。酶联免疫试验测定的结果显示 ,与复性前变性蛋白相比 ,纯化蛋白与 CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了 2～ 16倍。
- 刘伯华余兴龙张茂林肖昌徐兴然吴健敏李作生涂长春
- 关键词：原核表达猪瘟病毒包涵体复性纯化
- 腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2融合基因表达载体的构建及表达被引量：1
- 2002年
- 根据腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因 (Pili基因 )序列 ,在 Pili基因 6 19bp Ehe 酶切位点上插入绵羊白细胞介素 - 2基因 (Ovi IL- 2基因 ) ,构建了 Pili基因与 Ovi IL- 2基因的融合基因表达载体。先用 Eco R 、Bam H 双酶切p Bluescript- Ovi IL - 2重组质粒 ,获得两端具有 Eco R 、Bam H 位点的 Ovi IL - 2基因片段 ,用 Klenow补平后 ,与经Ehe 酶切后的重组质粒 PME2 90 - Pili进行平端连接 ;转化 JM10 5感受态细胞 ,筛选阳性克隆 ,分别用 Bam H 、Eco R 、Xba 、Bgl 、Pvu 等进行酶切鉴定。然后将阳性重组质粒转染 BL - 2 1表达宿主感受态细胞 ,用 0 .1m ol/ L Mg Cl2沉淀法和超声波裂解法提取 BL- 2 1表达 Pili基因与 Ovi IL- 2基因融合基因表达蛋白。对流免疫电泳对重组融合蛋白的特异性分析证明 ,融合蛋白主要在宿主菌体中表达 ;SDS- PAGE电泳结果表明 ,重组融合蛋白分子大小约为 330 0 0 ,表达产物的量约占菌体的 5 .49%。
- 王克坚Om Dhungyel余兴龙冯书章赵宝华JR Egerton朱平殷震
- 关键词：腐蹄病节瘤拟杆菌基因工程疫苗免疫
- 曲细精管注射法建立人白细胞抗原B27(HLA-B27)转基因大鼠
- 为探索曲细精管注射法建立转基因的大鼠可行性,试验以6.5kb的人白细胞抗原B27(HLA-B27)基因为目的基因,以脂质体为转染剂,采用曲细精管注射法建立了HLA-B27转基因大鼠.
- 乔贵林赵君周轶琳赖良学张守峰宇丽王凤阳扈荣良殷震
- 关键词：曲细精管注射法白细胞抗原转基因
- 文献传递
- 犬2型腺病毒E1转化细胞系的特性研究被引量：1
- 2003年
- 对筛选到的一株CAV-2 E1转化细胞(DK/E1)进行了初步的特性研究。以DK细胞为对照,观察到转化细胞的形态与DK细胞有明显区别,细胞变长,易聚集生长。通过测定DK及DK/E1细胞分别在2％、5％和10％牛血清培养基中的生长曲线,结果发现DK/E1细胞的生长速度比DK细胞快。用蚀斑和TCID50测定了病毒在DK和DK/E1细胞上的病毒滴度,结果表明DK/E1细胞产生的病毒蚀斑比DK细胞的大,TCID50测得的病毒滴度比DK细胞产生的病毒滴度高。CAV-2全基因组DNA对DK/E1细胞和DK细胞的转染试验结果表明,5μg和10μg的CAV-2DNA转染的DK/E1细胞,分别在转染后第14天和第11天均出现了典型的腺病毒细胞病变,而相同量CAV-2 DNA转染的DK细胞未出现病变,说明DK/E1细胞有助于CAV-2 DNA的复制和病毒粒子的包装。在DK/E1细胞内的重组试验表明,DK/E1细胞也有利于重组病毒的产生。以上转化特性在DK/E1细胞传至80代时仍保持不变,说明本试验获得了一株CAV-2 E1基因的转化细胞系。
- 邱薇夏咸柱范泉水扈荣良王雷高玉伟孙阳尹惠琼李刚山
- 关键词：犬2型腺病毒病毒载体转染
- 猪瘟病毒E2蛋白4重复抗原表位的构建及抗原活性研究被引量：2
- 2003年
- 利用PCR方法获得 4次重复的猪瘟病毒E2蛋白中和性抗原表位基因 ,将其克隆到 pGEM 5ZF(+)载体 ,测序正确后亚克隆到pGEX 3X载体构建得到重组质粒pGEX 3X 4P。重组质粒在大肠杆菌中诱导表达了含 4重复抗原表位的融合蛋白。该蛋白经纯化后 ,利用间接ELISA检测其与血清的反应性 ,结果表明 ,纯化的融合蛋白与兔抗CSFVE2血清有很强的反应性 ,与兔抗BVDVE2血清不反应 。
- 张青婵刘思国徐兴然余兴龙涂长春
- 关键词：猪瘟病毒CSFV基因克隆技术疾病防治
- 犬瘟热病毒的静水压灭活被引量：9
- 2001年
- 以 2 50 MPa的静水压力对犬瘟热病毒 ( CDV)处理 30 min之后 ,CDV被灭活 ,由其制成的灭活疫苗诱导犬产生中和抗体的能力明显优于传统的福尔马林灭活疫苗 ,免疫保护率达 90 %。电镜观察显示 ,经不同程度静水压力处理后的 CDV粒子均发生变形 ,表面呈现凸起 ,但 CDV H基因部分片段的 RT-PCR扩增结果揭示 ,高达 51 0 MPa的静水压力作用 30
- 池元斌夏咸柱王雪梅余春王琰第何洪彬范泉水黄耕王允海刘海涛张春红
- 关键词：犬瘟热病毒静水压力灭活免疫原性
- 反转录病毒体内转染精原干细胞介导的转基因方法
- 本发明涉及一种转基因方法，尤其是涉及以重组反转录病毒为介导体内转染精原干细胞的转基因方法。将目的基因克隆到反转录病毒载体，转化PA317细胞，收集并浓缩由阳性细胞克隆产生的重组病毒，将重组病毒注射到幼龄小鼠的曲细精管内，...
- 扈荣良张守峰王凤阳
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型内蒙株基因的克隆及序列测定
- 猪圆环病毒是迄今发现的一种最小的动物病毒,它的基因组是单股环状DNA。最早发现的猪圆环病毒不引起猪发病,为区别起见将其称为PCR—1。而PCV—2能引起猪发病,表现为发热、进行性体重减轻以及呼吸困难和消化紊乱、腹泻、黄疸...
- 秦晓冰金宁一
- 文献传递
