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拟南芥AtPI基因植物表达载体的构建及其在烟草中的遗传转化被引量：5: 2016年; 花是被子植物主要的繁殖器官,在繁育后代的过程中,发挥着极其重要的作用,PISTILLATA（PI）基因作为控制花器官发育的B类功能基因中的一员,在花器官发育中起到重要的作用。为探究PI基因在花瓣和雄蕊发育中的功能,本文以拟南芥（Arabidopsis thaliana）中的PI基因作为研究对象,利用PCR技术从拟南芥花序c DNA扩增出At PI基因,构建植物表达载体（p ROKⅡ-At PI）并进行烟草（Nicotiana tobacum）转化。转基因植株的PCR检测结果表明,At PI基因已经整合到了烟草基因组中。在T2代植株中,通过实时定量荧光PCR检测显示,At PI在m RNA水平也均有表达。过量表达PI的转基因烟草在花器官中存在明显表型,与野生型相比主要表现为转基因植株花冠变小,雄蕊缩短,果实畸形且子房基部比野生型长5～10 mm,上述结果表明At PI基因是特异性参与雄蕊和花瓣的发育并起着至关重要的作用。; 刘彩霞郑唐春代丽娟刘轶曲冠证; 关键词：拟南芥烟草雄蕊子房

柽柳ThDUF106基因的植物表达载体构建及其功能验证被引量：2: 2018年; 柽柳中的ThDUF106基因在盐碱胁迫处理下表达量显著上调,表明ThDUF106基因可能参与了柽柳的抗逆境胁迫。为探究柽柳ThDUF106基因的功能,我们对三月龄柽柳进行盐碱、干旱及重金属等非生物胁迫下的叶、根进行荧光定量PCR检测,分析ThDUF106基因的时空表达情况,并通过生物信息学分析ThDUF106基因所编码的蛋白质,同时我们将这个基因进行植物表达载体构建并进行烟草的遗传转化。研究结果表明:转基因烟草株系及野生型的一月龄苗在非生物胁迫处理下,进行生理生化指标比较分析,结果显示,转基因烟草与非转基因烟草在各胁迫下的抗氧化状态基本相同,表明这个基因在烟草中过表达并没有改善烟草的抗氧化性。; 葛晓兰刘彩霞张鑫鑫李莹曲冠证; 关键词：柽柳烟草非生物胁迫

拟南芥AtPAP1基因植物表达载体构建及在烟草中遗传转化分析被引量：11: 2017年; 为探究花青素调控基因AtPAP1的生物学功能,采用PCR方法从拟南芥花序中克隆出拟南芥MYB家族AtPAP1基因。构建植物表达载体pROKⅡ-AtPAP1,并通过农杆菌介导的叶盘法将外源基因转入野生型烟草。检测结果表明,AtPAP1已成功整合入烟草基因组中,并在mRNA水平表达。形态观察显示AtPAP1基因异源过量表达能显著增强转基因烟草植株花青素的积累,致使转基因烟草的叶片、茎段和花器官等颜色发生变化,呈现出不同程度的紫红色。; 刘轶郑唐春代丽娟刘彩霞王庆娜曲冠证; 关键词：拟南芥花青素烟草

Transformation of Tobacco with Two AP1 Genes Isolated from Poplar( Populus simonii × Populus nigra): 2014年; [ Objective ] This study aimed to analyze the functions of AP1 gene from Populus simonii × Populus nigra and to lay the theoretical foundation for shortening the breeding cycle of forest trees and investigating the flowering mechanism in poplar. [ Method] Plant expression vectors of AP1 genes were constructed and transformed into tobacco leaf disks with Agrobacterium-mediated method. Transgenic tobacco plants were identified by PCR. [ Result] AP1 genes were integrated into the genome of tobacco. Transgenic tobacco plants all presented an early flowering phenotype compared with wild-type tobacco. [ Conclusion] AP1 genes could promote early flowering in transgenic tobacco plants, which provided theoretical basis for molecular regulation of flowering in poplar.; Shuang LITangchun ZHENGLina ZANGGuanzheng QU; 关键词：TOBACCO

毛果杨Eukaryotic translation initiation factor 5A(eIF5A)同源基因的生物信息学分析被引量：4: 2014年; 为研究毛果杨eIF5A基因间的同源性及其进化关系,以毛果杨的eIF5A基因为研究对象,利用生物信息学软件及网站对其进行碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区以及二级结构和三级结构的预测与分析,并与其他物种的eIF5A氨基酸序列进行多重比对与进化分析。结果表明,4个毛果杨eIF5A基因定位于不同染色体上,且都只含有5个外显子;研究还发现不同成员间氨基酸数目、氨基酸序列间的疏水性存在一定的差异;亚细胞定位分析表明,4个eIF5A蛋白均定位于细胞质上;二级结构预测结果显示,4个eIF5A氨基酸序列以无规则卷曲、扩展链和α-螺旋为主要组成部分,且4条氨基酸序列三维结构十分相似。上述结果均为毛果杨eIF5A基因家族的进一步功能分析提供了一定基础。; 邵龙婷郑唐春臧丽娜李爽曲冠证; 关键词：EIF5A 生物信息学

小黑杨PsnAP1基因转化烟草的研究被引量：4: 2014年; [目的]研究杨树APETALA1基因的功能,为缩短林木育种周期及杨树成花机理的研究提供参考。[方法]以杨树为研究对象,构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草叶盘,并对转基因烟草进行分子水平鉴定。[结果]杨树APETALA1基因已经整合入烟草基因组中,且转基因烟草比野生型提早开花。[结论]杨树APETALA1基因能促进转基因植株开花,为研究杨树成花机理奠定了基础。; 李爽郑唐春臧丽娜曲冠证; 关键词：杨树烟草早花

一种简易高效提取多种植物纯净DNA的方法被引量：11: 2015年; 植物组织中次生代谢产物较多,要从中快速提取高质量的DNA比较困难。本文利用一种改良的CTAB法,通过在裂解后直接添加RNase A去除RNA污染,然后再经过一系列的抽提、沉淀、洗涤,获得纯净的DNA。经用琼脂糖凝胶电泳及核酸检测仪检测总DNA的纯度、浓度及质量。以提取的DNA为模版,PCR能够获得清晰的目的条带。结果表明通过该法可以简易、快速、高通量的提取多种植物的纯净DNA,为后续的分子生物学分析奠定了技术基础。; 丁浩郑唐春梁德洋曲冠证; 关键词：植物 DNA提取 PCR

小黑杨快繁与再生体系的优化被引量：14: 2015年; 利用已获得小黑杨无菌苗叶片,研究不同培养基和植物激素对不定芽诱导、丛生苗抽茎及幼苗生根的影响。结果表明:培养基和激素对小黑杨叶片不定芽的诱导及幼苗生根有一定影响。小黑杨叶片不定芽诱导的最佳培养基:MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,诱导率为100%。丛生苗诱导的最佳培养基:MS+6-BA0.2 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1。幼苗生根的最佳培养基有两种:MS+NAA 0.25 mg·L-1或MH+IBA 0.2mg·L-1,生根率大于99%。; 杜兆伟郑唐春李爽臧丽娜曲冠证由香玲; 关键词：杨树不定芽诱导

拟南芥CYCD3;1基因植物表达载体的构建及在烟草中的遗传转化分析被引量：3: 2016年; 为了分析植物D型细胞周期蛋白在细胞周期中的作用,采用PCR方法从拟南芥花序中克隆出At CYCD3;1基因的全长c DNA序列。该基因的开放读码框为1131 bp,预测编码376个氨基酸,蛋白质的分子量为42701.6 Da,蛋白质的等电点为4.89。构建植物表达载体p ROKII-At CYCD3;1,并利用农杆菌介导的叶盘法将外源基因导入野生型烟草中。通过PCR及q RT-PCR检测显示,At CYCD3;1成功插入烟草基因组并在转录水平表达。表型观察显示转基因株系与野生型株系相比主要表现为花冠宽度变大,花瓣和萼片长度变长,果实变大,茎干弯曲,叶片卷曲,根尖细胞变小。综上,拟南芥At CYCD3;1基因的过量表达影响了植物的生长发育。; 代丽娟郑唐春刘彩霞刘轶由香玲曲冠证; 关键词：周期蛋白烟草

烟草化学诱导表达系统的建立被引量：4: 2016年; 化学诱导表达系统对植物功能基因的研究及植物基因工程应用有重要意义。XVE是以雌激素为基础的用于诱导转基因植物中目的基因表达的一种系统,能够在可调控方式下诱导基因的表达。目前,以烟草为遗传转化材料进行XVE系统研究的详细报道还未见发表。本文以烟草作为研究对象,利用PCR技术从本实验保存的质粒pROKII-GFP中扩增出GFP基因。构建雌激素诱导型植物表达载体(p ER8-GFP)并利用农杆菌介导的叶盘法将外源基因导入野生型烟草中;经潮霉素抗性筛选出转化植株后,用PCR鉴定出阳性转化植株,将阳性转化植株利用不同浓度和不同时间的雌激素进行处理,并结合定量PCR和Night SHADE植物活体成像系统对转基因植株的表达水平进行检测。结果表明诱导p ER8-GFP载体在烟草中表达的最适雌激素浓度为25μmol·L^(-1),最适时间为48 h;同时在烟草胚轴与根尖细胞中检测到荧光信号,表明XVE化学诱导系统在烟草中也可以高效、严格的依赖雌激素的诱导来控制目的基因表达。本研究将为烟草相关的化学诱导表达研究提供技术支持与解决方案。; 代丽娟郑唐春刘彩霞刘轶由香玲曲冠证; 关键词：雌激素诱导基因表达烟草

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