中国博士后科学基金(20060400476)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
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- 人干扰素INF-ω在植物乳杆菌中的表达与鉴定
- 2009年
- 目的以植物乳杆菌为载体,将干扰素IFN-ω基因导入植物乳杆菌内,作为先期探索和尝试,构建重组阴道微生态菌株。方法采用抗菌肽诱导双组分调节表达系统,以细菌素Sakacin A为诱导物、sapK和sapR为双组分调节基因的穿梭质粒pSIP300,将干扰素ω基因置于pSIP300上,构成重组质粒pSIP300-ω,在大肠埃希菌DH5α中进行扩增,分别电转化3株植物乳杆菌:Lacbacillus plantarum1.3,Lacbacillus plantarum1.11,Lacbacillusplantarum14917。结果与结论经SDS-PAGE与ELISA检测证实,成功构建了能够表达IFN-ω重组植物乳杆菌Lacbacillus plantarum1.11/pSIP300-ω。
- 曹晓梅张虎成刘树玲侯利华付玲陈薇
- 关键词：植物乳杆菌
- 鼠疫抗原LcrV在乳酸乳球菌中的表达与鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的以乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)为载体,将鼠疫抗原LcrV基因导入乳酸乳球菌内,构建重组肠道微生态菌株,作为黏膜免疫疫苗的先期探索和尝试。方法采用酸诱导P170启动子,乳酸乳球菌本身的SP310mut2信号肽,将鼠疫杆菌LcrV抗原结构基因克隆到质粒pAM J397上,电转化感受态Lactococcus lactis PSM565。结果经重组子PCR鉴定,SDS-PAGE检测,W estern-b lot鉴定,在Lactococcus lactisPSM565/pAM J397-V培养基上清中获得了38 kD的鼠疫抗原LcrV蛋白。结论在乳酸乳球菌中成功表达了鼠疫V抗原,为下一步鼠疫黏膜疫苗的研制打下基础。
- 曹晓梅张虎成李曼刘树玲侯利华付玲陈薇
- 关键词：乳酸乳球菌黏膜免疫
- 乳杆菌电转化的研究进展被引量：13
- 2008年
- 乳杆菌在食品、工业、微生物学等领域发挥着重要作用,作为益生菌,既可向体外生物反应器方向开发,又可作为潜在疫苗的抗原递送载体。由于乳杆菌属革兰阳性菌,细胞壁厚,重组质粒电转化效率低,甚至不能实现转化,影响了它作为基因工程受体菌的应用。笔者研究了近年来有关乳杆菌的电转化方案,总结了影响电转化效率的因素。如细胞壁预处理、电转缓冲液、电击参数、培养基、孵育时间以及菌体密度、质粒用量、热击条件等,并根据自己的试验结果提出优化方案,为乳杆菌在疫苗及生物反应器等领域的遗传开发研究提供较全面的借鉴。
- 曹晓梅张虎成李曼陈薇
- 关键词：乳杆菌属电转化
