云南省应用基础研究基金(2008CD009)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：何永文高倩阮永华金克炜边莉更多>>
- 相关机构：昆明医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化过程中FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达及意义被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化过程中脆性组胺酸三联体（FHIT）蛋白和Ki-67抗原的表达及意义.方法 选用100 μg/ml的云锡矿粉染毒永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B（B）及人胚肺成纤维细胞WI-38（W）,每次染毒72 h,隔代染毒直至第9代.自第11代起将上述细胞分组共培养.B100表示100μg/ml矿粉诱导的B细胞,W100表示100 μg/ml矿粉诱导的W细胞.分组如下：B组;B（W）组：与W共培养的B细胞;B（W100）组：与W100共培养的B细胞;B100组：100 μg/ml矿粉诱导的B细胞;B100（W）组：与W共培养的B100细胞;B100（W100）组：与W100共培养的B100细胞.应用免疫细胞化学法检测第16、26及36代各组上皮细胞中FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达,以Ki-67蛋白阳性细胞数计算细胞增殖指数（PI）.结果 BEAS-2B上皮细胞中存在FHIT蛋白表达,各代B组、B（W）及B（W100）组细胞FHIT蛋白表达水平无明显差异.第16代,B100组细胞FHIT蛋白表达水平低于B组细胞,B100（W）组及B100（W100）组FHIT蛋白表达水平较B100组进一步降低.第26代,B100、B100（W）及B100（W100）组细胞FHIT蛋白表达水平进一步降低,而至第36代,经矿粉诱导转化的上皮细胞重现FHIT蛋白的表达,且B100组、B100（W）组、B100（W100）组表达强度呈递增趋势.第16、26及36代未经矿粉诱导的各组肺上皮细胞Ki-67阳性细胞数PI均＜3%.第16代,B100组、B100（W）组及B100（W100）组细胞Ki-67阳性细胞PI分别为4.40%、4.97%和7.87%,第26代时分别增加为7.33%、7.87%和12.66%,第36代时分别进一步提高为12.60%、19.73%和24.80%.与B100、B100（W）组比较,第16、26、36代B100（W100）组阳性细胞PI明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 FHIT可能是云锡矿粉诱导BEAS-2B上皮细胞转化的一个作用靶点,云锡矿粉诱导可导致BEAS-2B上皮细胞Ki-67阳性细胞数增加,增殖活性增强.
- 边莉何永文付红梅阮永华高倩王春艳金克炜
- 关键词：抗原
- 云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化和成纤维细胞活化过程中的相互作用被引量：4
- 2009年
- 目的探讨云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化及成纤维细胞活化过程中的相互作用。方法常规培养永生化人支气管上皮细胞（BEAS-2B）及人胚肺成纤维细胞（WI-38），每6天传代1次；100μg／ml的云锡矿粉隔代诱导BEAS-2B及WI-38至第9代，共诱导5次，自第11代分组共培养至第40代。刀豆凝集素A及锚着独立性生长实验检测细胞恶性转化，流式细胞术检测细胞周期变化，免疫细胞化学法检测成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达。结果（1）与正常BEAS-2B细胞相比，矿粉诱导的BEAS-2B细胞单独培养至第28代细胞形态开始出现改变；与WI-38细胞共培养后，细胞形态改变提早至第20代；与矿粉诱导的WI-38细胞共培养后，细胞形态改变进一步提早至第16代。矿粉诱导的BEAS-2B细胞培养至第26代时凝集实验出现阳性；与WI-38细胞及矿粉诱导的WI-38细胞共培养后，细胞凝集时间缩短。与WI-38细胞共培养的矿粉诱导BEAS-2B及与矿粉诱导WI-38细胞共培养的矿粉诱导的BEAS-2B细胞分别在第26及第36代锚着独立性生长实验出现阳性，第36代的克隆形成率分别为6．00‰±1．00‰和15．33‰±2．52‰，且差异有统计学意义（P〈0．05）。矿粉诱导的各组上皮细胞S期细胞所占比例随培养代数增加逐渐升高，细胞发生恶性转化。（2）100μg/ml矿粉诱导的成纤维细胞培养至第26代出现α—SMA表达；与上皮细胞共培养后，成纤维细胞α-SMA表达增强，且随培养代数的增加，阳性表达细胞数明显增多，着色程度增强。结论个旧矿粉能诱导支气管上皮细胞恶性转化及成纤维细胞活化；肺上皮细胞是矿粉诱癌的主要靶细胞；肺上皮细胞的转化和成纤维细胞的活化相互影响，相互促进。
- 边莉何永文阮永华唐莹高倩王春艳金克炜
- 关键词：上皮细胞成纤维细胞
