国家自然科学基金(30740092)
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 相关作者：江晓菁王俊科艾春雨马虹阎雪晶更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学呼和浩特市第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- GSK-3β磷酸化与高糖因素取消七氟烷后处理心肌细胞保护作用的关系被引量：1
- 2021年
- 目的评价糖原合酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化与高糖因素取消七氟烷后处理心肌细胞保护作用的关系。方法取H9c2大鼠心肌细胞分别培养于正常浓度葡萄糖(5.56 mmol/L)或高浓度葡萄糖(33 mmol/L)的DMEM培养基中。采用随机数字表法分为8组(n=24):正常对照组(NC组)、正常糖浓度缺氧复氧组(NH/R组)、正常糖浓度七氟烷后处理组(NS组)、正常糖浓度GSK-3β抑制剂SB216763组(NSB组)、高糖培养组(HC组)、高糖缺氧复氧组(HH/R组)、高糖七氟烷后处理组(HS组)和高糖GSK-3β抑制剂SB216763组(HSB组)。采用缺氧3 h复氧的方法制备心肌细胞缺氧复氧模型。NS组和HS组复氧即刻将心肌细胞暴露于2.4%七氟烷30 min,NSB组和HSB组复氧开始前加入GSK-3β抑制剂SB216763,终浓度10μmol/L。于复氧3 h时采用Anexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测GSK-3β和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,比色法测定LDH活性和MDA含量。结果与NC组比较,NH/R组和HC组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量升高,SOD活性降低,NH/R组GSK-3β表达上调,p-GSK-3β表达下调,NS组p-GSK-3β表达上调,HC组p-GSK-3β表达下调(P<0.05);与NH/R组比较,NS组和NSB组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量降低,SOD活性升高,NS组GSK-3β表达下调,p-GSK-3β表达上调(P<0.05);与HC组比较,HH/R组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量升高,SOD活性降低,GSK-3β表达上调,p-GSK-3β表达下调(P<0.05);与HH/R组比较,HSB组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量降低,SOD活性升高(P<0.05)。结论高糖因素取消七氟烷后处理心肌细胞保护作用的机制与抑制GSK-3β磷酸化有关。
- 白艳艳杨泽群张立娜江晓菁
- 关键词：糖原合成酶激酶3Β缺血后处理
- 控制性低压灌注对兔脊髓缺血再灌注时磷酸化Akt和磷酸化ERK表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨控制性低压灌注对兔脊髓缺血再灌注时磷酸化蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶（p-Akt）和磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（p-ERK1／2）表达的影响。方法雄性日本大耳白兔36只，3月龄，体重2．0—2．5奴，采用随机数字表法，将其随机分为3组（n=12）：假手术组（s组）、脊髓缺血再灌注组（I／R组）和控制性低压灌注组（LP组）。I／R组和LP组采用在肾动脉下水平阻断腹主动脉25min行再灌注的方法制备脊髓缺血再灌注损伤模型。LP组再灌注10min期间维持腹主动脉远端血压45～55mmHg。分别于再灌注1、3、7、28d时进行后肢运动功能功能。每组于再灌注1d时处死动物，取脊髓组织，测定p-Akt、p-ERK1／2表达及神经元凋亡情况，计算凋亡指数，电镜下观察病理学结果。结果与S组比较，I／R组后肢运动功能评分降低，p-Akt和p-ERK1／2表达上调，凋亡指数升高（P〈0．05）；与I／R组比较，LP组后肢运动功能评分升高，p-Akt和p-ERK1／2表达上调，凋亡指数降低（P〈0．05）。LP组脊髓组织病理学损伤程度轻于I／R组。结论控制性低压灌注减轻兔脊髓缺血再灌注损伤的机制与激活Akt及ERK1／2，抑制神经元凋亡有关。
- 艾春雨江晓菁马虹王俊科
- 关键词：蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶丝裂原激活蛋白激酶类脊髓
- 控制性低压后处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响及其机制探讨被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨控制性低压后处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响及机制。方法32只雄性日本大耳白兔随机分为4组，每组8只，分别为假手术对照组（S组）、缺血再灌注损伤组（I/R组）、控制性低压后处理组（P组）、控制性低压后处理＋ERK1/2抑制剂PD98059组（ PD组）。于再灌注后24 h处死动物，取L3～5段脊髓组织标本。TUNEL法检测细胞凋亡；免疫细胞化学SP法检测脊髓组织p-ERK1/2、Caspase-3；羟胺法测定脊髓组织超氧化物歧化酶（SOD），硫代巴比妥酸法测定脊髓组织丙二醛（MDA）。结果与I/R组比较，P组凋亡指数降低，脊髓组织MDA降低、SOD增加、Caspase-3减少、p-ERK1/2增加，P均＜0．05；与P组比较，PD组凋亡指数升高，脊髓组织MDA增加、SOD减少、Caspase-3增加、p-ERK1/2减少，P均＜0．05。结论控制性低压后处理对脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与活化ERK1/2、抑制Caspase-3有关。
- 艾春雨江晓菁马虹王俊科
- 关键词：缺血再灌注损伤脊髓
- 改良脊髓缺血后处理对兔缺血／再灌注损伤脊髓的保护作用被引量：4
- 2011年
- 目的建立兔改良脊髓缺血后处理模型,研究缺血后处理对脊髓缺血/再灌注(I/R)损伤的作用。方法选取48只雄性日本大耳白兔随机分为4组,每组12只,假手术对照组(S组),缺血/再灌注损伤组(C组),经典缺血后处理组(PA组),改良缺血后处理组(PB组)。分别监测缺血前、再灌注时及再灌注10 min后的平均动脉压(MBP)、心率(HR)及动脉血气pH值、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、乳酸(Lac值);采用Tarlov法分别于术后1,3,7,28 d对兔后肢运动功能进行评分;计数脊髓前角正常神经元数;羟胺法测定脊髓组织超氧化物歧化酶(SOD)含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量。结果各组间各个时点MAP、HR、PaO2、PaCO2、Lac变化及术中体温差异均无统计学意义(P>0.05);缺血再灌注后1,3,7,28 d,PA、PB组Tarlov评分明显高于C组(P<0.05);PA、PB组正常神经元计数明显高于C组(P<0.05);C组脊髓MDA含量明显增加,SOD含量明显降低(P<0.05)。结论改良缺血后处理模型建立成功,两种缺血后处理法均可以显著减轻缺血再灌注后脊髓的神经功能损害。
- 艾春雨阎雪晶江晓菁马虹王俊科
- 关键词：脊髓
- 缺血后低压灌注处理对兔脊髓缺血/再灌注损伤的保护及ERK传导通路在其中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的评价细胞外信号调节激酶(ERK)传导通路对低压灌注缺血后处理兔缺血/再灌注损伤脊髓的保护作用及机制。方法 84只日本大耳白兔随机分为7组,分别为C组(对照组,不给予缺血后处理)、PB组(缺血后处理组)、D、PD1、PD3、PD9组分别于腹主动脉开放前1min鞘内注射DMSO 20μl、PD98059 1μg(20μl)、PD98059 3μg(20μl)、PD98059 9μg(20μl)之后进行缺血后处理及PD组(腹主动脉开放前1min鞘内注射PD98059 3μg(20μl),之后不行缺血后处理)。分别于再灌注1、3、7、28d时采用Tarlov评分评价后肢运动功能。每组于再灌注1d时处死6只动物,取L3～5节段脊髓组织,采用West-ern blot技术测定p-ERK1/2及Bcl-2,Bax蛋白表达。结果 1、3、7、28d,PB组Tarlov评分明显高于其它各组(P<0.05),缺血后处理可以明显上调p-ERK1/2及凋亡抑制基因Bcl-2的表达,下调凋亡促进基因Bax的表达(P<0.05),而这些调节作用可以被ERK1/2阻断剂PD98059抑制。结论 p-ERK1/2在低压灌注缺血后处理对缺血再灌注损伤脊髓的保护中起重要作用。
- 艾春雨江晓菁马虹王俊科
- 关键词：缺血后处理缺血再灌注损伤ERK
- Akt抑制剂LY294002对兔缺血再灌注损伤脊髓Caspase-3表达的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察PI3K/Akt通路对兔缺血再灌注损伤脊髓Caspase-3表达的影响,以探讨PI3K/Akt在脊髓缺血再灌注损伤中的作用机制。方法选取32只雄性日本大耳白兔随机分为4组（S、I/R、P、LY组）,每组8只,除S组行假手术外,其余各组分别于肾动脉下水平阻断腹主动脉25 min。P组：再灌注开始10 min采用控制性低灌注压后处理法球囊部分排空,将腹主动脉远端血压控制在45～55 mm Hg,10 min后球囊完全开放。LY组同P组,并于腹主动脉开放前1 min鞘内注射PI3K/Akt抑制剂LY294002（10μg,20μL）。于再灌注后24 h后处死动物,取L3～5组织标本,原位细胞凋亡法测定细胞凋亡,免疫细胞化学SP法检测脊髓组织p-Akt、Caspase-3表达。羟胺法测定脊髓组织超氧化物歧化酶（SOD）含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量。结果缺血再灌注后24 h,与I/R组比较,免疫组化染色显示P组损伤较轻,正常神经元计数明显增多（P〈0.05）;凋亡细胞明显减少（P〈0.05）;脊髓MDA含量明显降低,SOD含量明显增加（P〈0.05）;p-Akt蛋白表达增加,Caspase-3蛋白表达明显减少,而PI3K/Akt抑制剂LY294002减弱了P组的保护作用。结论控制性低压后处理抑制缺血再灌注后Caspase-3表达,减少了细胞凋亡,PI3K/Akt抑制剂LY294002降低这种保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt通路有关。
- 艾春雨江晓菁马虹王俊科
- 关键词：PI3K/AKT脊髓CASPASE-3
- 瑞芬太尼后处理对兔缺血再灌注损伤脊髓的影响
- 2013年
- 目的：探讨瑞芬太尼后处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用。方法选取36只雄性日本大耳白兔随机分为3组，每组12只，分别为假手术对照组（S组）、缺血/再灌注损伤组（C组）、瑞芬太尼后处理组（R组）。再灌注24 h后处死动物，取L3～5组织标本，原位细胞凋亡法测定细胞凋亡的情况，电镜下观察病理学结果，羟胺法测定脊髓组织超氧化物歧化酶（SOD）含量，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量。结果缺血再灌注后24 h，与S组比较，C组凋亡细胞明显增多（P＜0.05），脊髓组织病理学损伤程度明显加重，脊髓MDA含量明显增加，SOD含量明显降低（P＜0.05）；与C组比较，R组脊髓组织病理学损伤程度明显减轻，凋亡细胞明显减少（P＜0.05），脊髓MDA含量明显降低，SOD含量明显增加（P＜0.05）。结论瑞芬太尼能减轻兔脊髓缺血再灌注损伤，抑制神经细胞凋亡坏死，具有脊髓保护作用。
- 艾春雨江晓菁方波马虹王俊科
- 关键词：瑞芬太尼脊髓缺血再灌注损伤
- JAK2-STAT3通路对七氟烷后处理在体大鼠缺血/再灌注心肌的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨Janu激酶/信号转导子和转录激活子(Ja-nus kinase/signal transducer and activator of transcriptio,JAK2/STAT3)通路对吸入七氟烷后处理的在体大鼠缺血/再灌注心肌的保护作用和影响。方法 75只成年健康♂SD大鼠,体质量250～300 g,随机分为5组(n=15):假手术组(S)、缺血/再灌注组(CON)、AG-490组(AG)、七氟烷后处理组(Sev-p)、七氟烷后处理+AG490组(AG+Sev-p)。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法制备心肌缺血/再灌注模型。假手术组左冠状动脉前降支穿线并不阻断冠状动脉,AG-490组在再灌前10 min静注JAK2抑制剂AG-490(3mg·kg-1),七氟烷后处理组在再灌注前2 min开始吸入2.8%七氟烷,持续5 min,七氟烷后处理+AG490组于再灌前10 min静注JAK-STAT通道阻断剂AG-490(3 mg·kg-1),再行七氟烷后处理。各组均以5 ml·kg-1.h-1的速率静脉输注生理盐水维持至术毕。记录心率(HR)、平均动脉压(MAP),计算心率和收缩压乘积(RPP)。各组随机取10只于再灌120 min后处死大鼠,TTC法测定心肌梗死面积(IS/AAR)。各组另5只大鼠,于再灌注开始后的10 min处死,取出左心室心肌组织,提取总蛋白,用Western blot法分析心肌JAK2和磷酸化JAK2及心肌STAT3和磷酸化STAT3的蛋白表达变化。结果与其它组比较,Sev-p组和Sev-p+AG490组在后处理5 min时,MAP、HR和RPP均明显下降(P<0.05),但经历10 min洗脱期后,各指标变化趋向一致,组间比较差异无统计学意义。与CON组和AG+Sev-p组比较,Sev-p组的梗死面积明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。AG-490组与CON组比较心梗面积差异无显著性(P>0.05)。Western blot检测发现,Sev-p组再灌注后10 minJAK2、STAT3的磷酸化水平明显升高,与其它组相比差异有统计学意义,AG+Sev-p组与Sev-p组相比,其JAK2、STAT3的磷酸化水平较低,差异有统计学意义。结论七氟烷后处理对缺血/再灌注损伤的大鼠心肌有较好的保护作用,该作用与JAK2-STAT3通�
- 颜丽晖江晓菁
- 关键词：七氟烷梗死面积
- ERK1/2和Akt通路对控制性低压后处理兔缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究PI3K/Akt和ERK1/2通路对控制性低压后处理兔缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能的影响。方法30只日本大耳白兔随机分为5组(n=6):假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R),控制性低压后处理组(Post),控制性低压后处理+PD98059组(Post+PD)、控制性低压后处理+LY294002组(Post+LY)组。除Sham组外,其余各组分别于肾动脉下水平阻断腹主动脉25 min。Post组:再灌注开始10 min采用控制性低灌注压后处理法球囊部分排空,将腹主动脉远端血压控制在5.99～7.32 kPa,10min后球囊完全开放。Post+PD组、Post+LY组:同Post组,并分别于腹主动脉开放前1 min鞘内注射ERK抑制剂PD98059(3μg,20μl)、PI3K/AKT抑制剂LY294002(10μg,20μl)。再灌注24 h后将实验动物处死,取脊髓组织用Western blot技术测定Caspase-3、胞质Cytochrome C蛋白表达;电镜观察线粒体结构。结果与I/R组比较,Post组Caspase-3和胞质Cytochrome C蛋白表达明显减少,线粒体结构破坏减轻。ERK抑制剂PD98059和PI3K/Akt抑制剂LY294002减弱了Post的作用。结论控制性低压后处理对缺血/再灌注损伤脊髓线粒体功能有保护作用,其机制可能与激活PI3K/Akt和ERK1/2通路有关。
- 艾春雨江晓菁马虹王俊科
- 关键词：缺血后处理脊髓线粒体
