上海市农科院青年科技发展基金(2011-07)
- 作品数：9 被引量：37H指数：3
- 相关作者：吴彩凤戴建军张树山张廷宇张德福更多>>
- 相关机构：上海市农业科学院上海市农业遗传育种重点实验室动物遗传工程研究室上海农业遗传育种重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市农科院青年科技发展基金国家科技重大专项上海市农业科技成果转化资金项目更多>>
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- 玻璃化快速冷冻仪（Vit-Master）在猪MⅡ期卵母细胞玻璃化冷冻中的应用研究
- 为了提高猪成熟卵母细胞玻璃化冷冻效果,本试验应用玻璃化快速冷冻仪（Vit-Master）装置进行猪成熟卵母细胞的冷冻,以观察其冷冻效果。结果显示:浆状液氮降温速率（21345±1768℃/min）远远高于普通液氮降温速率...
- 徐利戴建军张廷宇吴彩凤李维杰张树山顾晓龙李翔韩晓李芳芳
- 关键词：卵母细胞
- 文献传递
- 纳米化红景天多糖对猪精液冷冻效果的影响被引量：8
- 2013年
- 在冷冻稀释液中分别添加分数为1%、5%、10%、15%、20%的纳米化红景天多糖(Nonomaterials rhodiola sachalin ensis polysaccaride,NRSP)溶液,以添加6mg/L红景天多糖(Rhodiola sachalin ensis polysaccaride,RSP)为对照组,不添加RSP为空白组,检测其对猪冷冻精子活力、顶体完整率、质膜完整率等生理结构指标,以及精子抗氧化能力的影响。结果表明,添加体积分数为15%NRSP组的精子活力(0.69)、顶体完整率(51.42%)、质膜完整率(25.95%)均高于其他组,并显著高于空白组(P<0.05)。此外添加15%NRSP组的解冻后直线运动精子百分比(46.33%)要显著高于其他各组(P<0.05);添加6mg/L RSP组丙二醛(MDA)浓度最低(10.83±0.39)μmol/L,并且显著低于空白组(31.85±1.36)μmol/L,(P<0.05),但与15%的NRSP组(11.60±0.42)μmol/L无显著差异(P>0.05)。添加20%的RNSP组超氧化物歧化酶(SOD)活力最高(343.05±19.64)μ/mgprot,显著高于其他添加组(P<0.05)。精子活力、顶体完整率、质膜完整率之间存在显著的正相关关系(P<0.05),而精子活力和顶体完整性与MDA浓度呈显著负相关(P<0.05),与SOD活力呈显著正相关(P<0.05),质膜完整率与两者含量相关性不显著(P>0.05)。
- 韩晓戴建军张树山张廷宇吴彩凤顾晓龙李翔徐利李芳芳张德福
- 关键词：红景天多糖纳米化猪精液冷冻保存
- 3种冷冻方法对猪MII期卵母细胞线粒体分布和损伤的影响被引量：8
- 2012年
- 本研究旨在探讨3种冷冻方法对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响。通过透射电镜、Rhodamine-123(R-123)荧光染色和体外发育观察,结果显示,(1)无论是FDA-DAPI复染存活率,还是孤雌激活卵裂率,CLV(Cryoloop vitrification)法(72.00%,7.22%)效果最好,OPS(Open Pulled Straw)法(60.00%,4.85%)次之,straw法(42.22%,0%)最低;(2)CLV法经R-123染色后,卵母细胞线粒体的正常分布率(52.24%)要比其它2组要高(OPS,48.65%;straw,37.68%),但三者之间没有显著差异(P>0.05);(3)透射电镜超微结构表明,冻后卵母细胞线粒体变得粗糙和模糊,有的线粒体嵴减少甚至消失。结果表明,冷冻过程中卵母细胞线粒体的分布和形态损伤严重,CLV法可提高冷冻速率,增强冻后卵母细胞的发育能力,降低冷冻造成的卵母细胞线粒体异常分布比例。
- 戴建军吴彩凤张廷宇张树山徐利张德福
- 关键词：玻璃化线粒体
- 三种冷冻方法对猪MⅡ期卵母细胞线粒体分布和损伤的影响
- (目的)本研究的目的旨在探讨三种冷冻方法对猪MII期卵母细胞玻璃化冷冻后线粒体的分布和超微结构变化的影响。（方法）通过透射电镜、Rhodamine-123（R-123）荧光染色和体外发育观察,（结果）结果显示,（1）无论...
- 戴建军吴彩凤张廷宇张树山徐利张德福
- 关键词：玻璃化线粒体
- 文献传递
- 精子载体法获得植酸酶转基因猪被引量：1
- 2013年
- 将带有植酸酶基因的重构质粒酶切纯化后,与去除精浆的猪新鲜精液按比例混合,17℃孵育处理使重构质粒结合到精子头部,通过人工授精对6头受体母猪进行配种,4头受孕,产仔38头。经PcR对特异性片段扩增,结果表明:有6头PcR结果为阳性,阳性率为15.8%。扩增片段经克隆、测序、比对,与阳性对照组序列相似率均在99%以上,说明目的基因已转入阳性个体体内。
- 吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福
- 关键词：精子载体法植酸酶基因转基因猪
- 红景天多糖对猪卵母细胞体外成熟及其发育潜力的影响被引量：3
- 2013年
- 旨在探讨红景天多糖(Rhodiola sachalinensis polysaccaride,RSP)对猪卵母细胞体外成熟及发育潜力的影响。在猪卵母细胞成熟液中添加不同浓度的RSP,以排出第一极体作为核成熟的标志,观察卵母细胞核成熟情况,统计孤雌激活(PA)及体外受精(IVF)后胚胎的卵裂率和囊胚率,并检测卵母细胞内谷胱甘肽(GSH)的浓度及活性氧(ROS)水平。结果表明:与对照组(83.50%±1.00%)相比,添加0.6、6.0和60.0mg.L-1的RSP均能提高其核成熟率,但差异不显著(P>0.05);6.0和60.0mg.L-1的RSP组能显著提高卵母细胞内GSH含量(P<0.05),随着RSP浓度的增加可以降低ROS水平,但是各组之间差异不显著(P>0.05);孤雌激活中,60.0mg.L-1 RSP组的卵裂率(88.44%±5.06%)和6.0 mg.L-1 RSP的囊胚率(40.94%±8.23%)最高,且显著高于对照组(72.16%±7.38%和24.06%±5.16%,P<0.05);与对照组(33.52%±4.05%)相比,0.6、6.0和60.0mg.L-1RSP组体外受精卵裂率均显著提高(P<0.05),60.0mg.L-1 RSP组的囊胚率达(19.20%±3.13%),显著高于对照组的(9.60%±0.65%,P<0.05)。由此可见,在猪卵母细胞成熟过程中添加适当浓度的RSP,能提高其核成熟率,促进胞质成熟,从而提高其孤雌激活和体外受精后的胚胎发育能力。
- 徐利戴建军张廷宇吴彩凤张树山张德福顾晓龙李翔韩晓李芳芳
- 关键词：红景天多糖卵母细胞孤雌激活体外受精
- 纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物对猪精子介导基因转移效率的影响被引量：3
- 2013年
- 为优化猪精子介导的基因转移(SMGT)技术,提高转基因效率,本试验利用纳米化聚酰胺-胺型树枝状聚合物(PAMAM-D)为载体介导猪精子转染外源DNA,经原位杂交检测其阳性率,体外受精(IVF)分析外源基因的表达。结果显示,0.5μg线状质粒DNA中加入PAMAM-D(质量比20∶1)阳性率最高(P<0.05);孵育时间为90、120min时,阳性率显著高于30、60min组(19.94%、18.57%与8.50%、13.87%;P<0.05);以此条件处理精子,阳性率显著高于无载体和脂质体处理组(23.93%与7.25%、13.25%;P<0.05)。各处理精子经IVF后,PAMAM-D组EGFP表达率显著高于其他2组(9.19%与4.81%、3.43%;P<0.05),各组绿色荧光胚胎经基因组PCR分析均能检测到EGFP基因。结果表明,PAMAM-D可有效介导猪精子转染外源DNA,并通过体外受精将外源基因导入胚胎中。
- 吴斌戴建军张廷宇张树山吴彩凤顾晓龙陈会兰张德福马恒东
- 关键词：精子
- 成年克隆巴马小型猪心脏差异蛋白的鉴定与生物信息学分析被引量：1
- 2013年
- 本研究旨在探索体细胞核移植(克隆)操作对克隆巴马小型猪心脏发育的影响。分别提取3头成年克隆猪和3头繁殖猪的心脏蛋白,利用双向电泳-质谱体系的比较蛋白质组学技术进行分离和鉴定,并结合生物信息学手段对部分差异蛋白进行功能分析。结果表明,与对照猪相比,克隆巴马小型猪的心脏蛋白共有11个差异蛋白,其中5个为上调蛋白,6个为下调蛋白。本试验在蛋白质水平上证实:3头克隆巴马小型猪的心脏均存在一定程度的功能失调。
- 张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福
- 关键词：巴马小型猪体细胞核移植比较蛋白质组学
- 梅山猪耳成纤维细胞体外培养及其克隆被引量：11
- 2014年
- 为获得适合于克隆梅山猪的供体细胞,本试验对梅山猪耳皮肤成纤维细胞的分离、培养、纯化、生长特征和核型分析等进行了研究。通过组织块培养法获得梅山猪皮肤成纤维细胞,用胰酶轻度消化后传代3~4次可得到较纯的皮肤成纤维细胞,并以此作为供体细胞,获得1头健康梅山克隆猪。
- 张德福吴彩凤戴建军张树山张廷宇王勃顾晓龙李翔徐利李芳芳韩晓
- 关键词：梅山猪体外培养克隆
- 冷冻干燥处理对猪精子结构的影响
- 本研究旨在探索冷冻干燥对猪精子结构的影响作用。（方法）本试验分别通过顶体染色、扫描电镜和透射电镜等方法观察冷冻干燥精子结构。结果表明,1.冷冻干燥前利用液氮进行预处理,对冷冻干燥精子形态没有显著影响（P＞0.05）;2....
- 孟祥黔张树山戴建军吴彩凤张廷宇张德福
- 关键词：猪精子冷冻干燥精子结构
- 文献传递
