广东省自然科学基金(04105743)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李鹏纪术峰杨华锋焦得闯韩明阳更多>>
- 相关机构：南方医科大学宁波大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Trastuzmab F(ab′)_2修饰紫杉醇免疫脂质体对人大肠癌HT-29细胞的杀伤作用被引量：2
- 2010年
- 目的构建Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体并测定其对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的杀伤作用。方法采用逆相蒸发法合成紫杉醇脂质体,使用胃蛋白酶在Tastuzumab抗体J链Fc段侧切断抗体以获得抗体F(ab′)2段,抗体交联法制备Trastuzmab F(ab′)2段修饰的紫杉醇免疫脂质体;透射电子显微镜观察免疫脂质体的形态及粒径分布;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)及荧光标记法测定免疫脂质体包封率和活性;MTT检测细胞的杀伤率。结果成功构建了Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体;所得免疫脂质体平均粒径为210nm,粒径小于200nm者占91.37%;且其具有较高的包封率和稳定性;相同时间内,HT-29细胞对紫杉醇免疫脂质体的摄取要明显高于对照组;Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体对HT-29细胞的杀伤作用强于对照组(P<0.01),且该作用具有时间依赖性(P<0.01)。结论成功构建Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体,其对体外生长的大肠癌细胞具有较强的杀伤作用。
- 吴爱国焦得闯李鹏邵国利纪术峰韩明阳
- 关键词：免疫脂质体紫杉醇大肠癌
- PGRMC1参与调控乳腺癌细胞增殖及化疗敏感度的实验被引量：2
- 2012年
- 目的探讨孕激素膜受体1(progesterone receptor membrane component-1,PGRMC1)是否参与乳腺癌细胞增殖及化疗药物敏感度的调控,为乳腺癌的化疗提供参考依据。方法设计合成以PGRMC1为靶标的siRNA1、2,用lipofectin2000转染人乳腺癌高转移细胞株MDA-MB-231(ER-,PR-)和低转移细胞株MCF-7(ER+,PR+),QRT-PCR检测转染siRNAs后PGRMC1基因mRNA水平变化,Western blot法检测蛋白表达变化,以siRNA-GFP为阳性对照,未处理组为空白对照。CCK8法检测转染前后DTX敏感度。应用1/2的IC50DTX作用转染组与对照组,流式细胞仪检测各组细胞周期变化,Annexin V/PI阳性细胞百分比,对比各组细胞凋亡率、死亡率,双氢二氯荧光黄染色阳性率判定各组细胞内ROS水平。JC-1染色后,免疫荧光显微镜下观察各组细胞线粒体膜电位变化。结果以PGRMC1为靶标设计的siRNA1、2对该基因mRNA及蛋白表达显著抑制在70%以上,细胞增殖受抑,对化疗药物敏感度增高,与非转染组相比G2期细胞比例明显增加,凋亡细胞比率明显增加,细胞内ROS水平也随之升高,线粒体膜电位下调。结论 PGRMC1参与了乳腺癌细胞增殖及化疗敏感度的调控。
- 纪术峰杨华锋吴爱国
- 关键词：乳腺癌SIRNA
- 裸小鼠人侵袭性结肠癌模型的建立被引量：5
- 2007年
- 目的:建立裸小鼠人结肠癌高侵袭模型,为侵袭性结肠癌的治疗研究提供可靠的模型动物。方法:将人类结肠癌细胞株HT29的细胞悬液接种于BALB/c小鼠脾包膜下和BALB/c nu/nu小鼠皮下,以前者肝转移肿瘤组织和后者皮下肿瘤组织作为移植瘤材,通过外科原位移植技术分别种植于实验组和对照组BALB/c nu/nu小鼠盲肠浆膜下层,比较两组小鼠在原位成瘤率、肝转移率、淋巴转移率、腹腔种植率及脾、肺转移率等方面是否存在显著性差异。结果:术后第14日,实验组原位成瘤率和肝脏转移率(100%、65%)高于对照组(75%、30.8%)(P<0.05);术后第21日,实验组原位成瘤率、肺脏转移率及脾脏转移率(100%、5%、15%)与对照组(85%、0、0)相比无显著性差异(P>0.05),但其肝脏转移率、淋巴转移率以及腹腔种植率(90%、65%、60%)均高于对照组(41.2%、23.5%、23.5%)(P<0.05)。结论:将免疫功能正常小鼠筛选出的结肠癌肝转移组织用于建立裸小鼠的原位移植癌模型,能够模拟高侵袭性结肠癌的生物学特性,并为其相关研究提供可靠的模型动物。
- 李鹏吴爱国
- 关键词：动物模型结肠癌侵袭性
