国家自然科学基金(30400139)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
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- DMT1在C6胶质瘤细胞二价铁摄取中的作用
- <正>目的:二价金属离子转运体(DMT1)是新近发现的一种铁转运蛋白,包括+IRE型和-IRE型两种形式。目前已经证实DMT1是小肠上皮细胞摄铁的主要机制,其表达受肠腔中铁水平的调节。但DMT1在神经系统细胞中是否有相似...
- 宋宁王俊姜宏谢俊霞
- 关键词:DMT1铁C6胶质瘤细胞枸橼酸铁铵
- 文献传递
- DMT1第四功能区腺病毒表达载体的构建及其功能的初步研究
- 2007年
- 目的:构建携带DMT1第四功能区基因的重组腺病毒表达载体,并对其功能进行初步探讨。方法:采用AdEasy系统构建携带DMT1第四功能区基因的重组腺病毒载体pAd-DMT1-4,脂质体法转染人胚肾293细胞,包装产生重组腺病毒vAd-DMT1-4。vAd-DMT1-4感染C6胶质瘤细胞后,采用RT-PCR检测目的基因表达,用铁孵育感染重组腺病毒的靶细胞后,测定C6胶质瘤细胞内OH.和MDA含量。结果:PCR、序列测定以及限制性酶切证实vAd-DMT1-4基因正确插入穿梭质粒,并与病毒骨架质粒pAdEasy-1重组,重组腺病毒表达载体构建成功。经293细胞包装获得具有稳定感染性的重组腺病毒vAd-DMT1-4,感染重组腺病毒的C6胶质瘤细胞DMT1-4表达增加。用铁孵育感染重组腺病毒的靶细胞后,C6胶质瘤细胞内OH.和MDA含量有增高的趋势。结论:重组腺病毒vAd-DMT1-4可有效感染C6胶质瘤细胞。
- 王蕾姜宏徐华敏罗兵谢俊霞
- 关键词:DMT1腺病毒载体
- 帕金森动物模型黑质内DMT1的表达增加可能是铁聚积的原因
- <正>目的:黑质(SN)铁聚积被认为参与了帕金森病(PD)的发病,铁通过增强细胞内的氧化应激反应而在PD的发病中起着重要作用。然而脑铁转运的机制尚不清楚,铁如何在SN选择性聚积的原因不明。二价金属离子转运蛋白1(DMT1...
- 姜宏王俊谢俊霞
- 关键词:DMT1铁6-羟基多巴胺MPTP
- 文献传递
- 细菌内同源重组构建携带人DMT1基因的重组腺病毒被引量:2
- 2008年
- 目的利用细菌内同源重组法构建携带二价金属离子转运蛋白1(DMT1)编码基因的重组腺病毒。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人胚近段小肠中获取人的全长DMT1-IRE的cDNA,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-DMT1-IRE,在感受态大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy1同源重组,利用卡那霉素抗性平板初步筛选重组质粒阳性克隆,经PacⅠ酶切鉴定和PCR鉴定获得到重组腺病毒载体pAdEasy1-DMT1-IRE。线性化的重组质粒转染HEK293细胞,获得高滴度的重组腺病毒。结果RT-PCR反应扩增出1841 bp的片段,重组质粒阳性克隆pAdEasy1-DMT1-IRE经PacⅠ酶切后获得一大于20 kb的大片段和4.5 kb的特征性片段,PCR鉴定扩增出DMT1的片段,证明重组腺病毒质粒中已成功插入目的基因DMT1-IRE。转染293细胞后细胞表达GFP荧光,显示293细胞稳定表达外源性的DMT1-IRE基因。结论携带DMT1-IRE基因的重组腺病毒质粒构建成功,获得高滴度的重组腺病毒,为DMT1基因进一步功能的研究提供基础。
- 徐华敏姜宏谢俊霞
- 关键词:腺病毒科
- The role of over-expressed DMT1 in iron induced cell damage in MES23.5 cells
- <正>Elevated iron accumulation has been reported in brain regions in some neurodegenerative disorders.However, ...
- XU Hua-Min
- 关键词:DMT1IRON
- 文献传递
- Divalent metal transporter 1 was involved in the 6-hydroxydopamine induced iron accumulation in MES23.5 cells
- <正>Increasing evidences elucidated the role of iron in the pathology of Parkinson’s disease(PD);however, the m...
- ZHANG Shu-Zhen
- 关键词:IRON
- 文献传递
- 细菌内同源重组构建pAdEasy1-DMT1腺病毒质粒
- <正>利用细菌内同源重组法构建携带二价金属离子转运蛋白1(DMT1)编码基因的重组腺病毒载体。首先,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人胚近段小肠中获取人的全长DMT1cDNA,包括+IRE型和-IRE型,PCR产...
- 徐华敏姜宏王蕾罗兵谢俊霞
- 关键词:DMT1重组腺病毒
- 文献传递