国家自然科学基金(30570728)
- 作品数：11 被引量：27H指数：3
- 相关作者：刘正湘郑振中汪道文文莎左后娟更多>>
- 相关机构：华中科技大学南昌大学第一附属医院田纳西大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅科研基金江西省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 经口气管插管、复合麻醉下结扎冠状动脉建立小型猪心肌梗死模型被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨制作小型猪心肌梗死模型安全、稳定的方法。方法:小型猪20头,在经口气管插管、复合麻醉下结扎左冠状动脉前降支建立小型猪急性心肌梗死模型。术中心电监护,术后3d行冠状动脉造影检查,8周取心肌组织病理检查。结果:心电监护示结扎瞬间心电图即表现ST段弓背向上抬高,冠状动脉造影见左冠状动脉前降支远端完全闭塞,病理切片见梗死心肌为大量结构紊乱的纤维组织所取代。结论:经口气管插管、复合麻醉下结扎冠状动脉可成功建立小型猪心肌梗死模型,动物死亡率低。
- 文莎左后娟刘涛刘正湘刘少文林敬阳汪道文
- 关键词：插管法气管内复合麻醉结扎冠状动脉
- 重组腺相关病毒介导CD151转染心肌梗死小型猪促进心肌功能性血管形成被引量：1
- 2009年
- 目的观察重组腺相关病毒（rAAV）介导的CD151基因转染促小型猪心肌梗死后心肌血管形成的有效性。方法结扎小型猪冠状动脉左前降支建立心肌梗死模型，梗死区及梗死周围心肌分别注射rAAV—CD151、rAAV—anti-CD151和rAAV-绿色荧光蛋白（rAAV-GFP）。8周后用Western blot分析心肌组织CD151蛋白表达，免疫组化检测心肌微血管密度和小动脉密度，用13^N-NH3电子发射计算机断层心脏显影（PET）评价心肌血流灌注。结果CD151基因转染促进心肌组织局部CD151高表达。rAAV—CD151组心肌微血管密度为（83．8±6．7）个／mm^2，明显高于正常对照组的（33．2±4．5）个／mm^2和rAAV—GFP组的（41．6±5．6）个／mm^2，均P〈0．05；rAAV—CD151组小动脉密度为（16．4±2．5）个／mm^2，也明显高于正常对照组的（6．6±2．3）个／mm^2和rAAV—GFP组（8．4±1．6）个／mm^2，均P〈0．05。rAAV—anti—CD151组心肌微血管密度和小动脉密度明显低于其他各组。13^N-NH3PET心肌血流灌注显像示rAAV—CD151组缺血区心肌血流灌注明显增加，rAAV-anti-CD151组血流灌注减少。结论CD151基因转染能增加小型猪局部心肌组织的CD151表达，明显增加缺血心肌微血管和小动脉的生成，并显著增加心肌血流灌注。
- 左后娟刘正湘刘晓春曾和松文莎刘涛汪道文张欣
- 关键词：心肌梗死腺相关病毒
- ^13N—NH3 PET及冠状动脉造影评价CD151基因转染对小型猪心肌梗死后血流灌注的影响被引量：1
- 2009年
- 目的用^13N—NH，PET及冠状动脉造影共同评价CD151基因转染促小型猪心肌梗死后血运重建。方法结扎20头小型猪冠状动脉左前降支（LAD），建立心肌梗死模型。对梗死区及梗死周围心肌直接注射CD151及绿色荧光蛋白（GFP）重组腺相关病毒（rAAV）进行基因转染。8周后用免疫组织化学方法分析心肌组织CD151蛋白的表达和心肌组织微血管密度，用^13N—NH，PET显像评价心肌血流灌注，用LAD造影评价侧枝循环的建立。采用SPSS11．0软件行配对t检验或方差分析（ANOVA）。结果CD151基因转染促进局部心肌组织CD151高表达并增加缺血区心肌组织微血管密度。rAAV—CD151组心肌血流灌注明显增加，心肌缺血总分值为10．82±2．36，明显小于rAAV—GFP组（19．33±1．67，t=5．86，P=0．002）。冠状动脉造影显示rAAV—CD151组缺血心肌的侧枝循环建立明显较rAAV—GFP组增加。结论CD151基因转染可以明显促进心肌梗死后血运重建、增加血流灌注。^13N—NH，PET及冠状动脉造影能直观地评价心肌血运重建。
- 左后娟刘正湘刘晓春曾和松刘涛文莎陈璟汪道文
- 关键词：冠状血管造影术NH3
- 慢病毒介导shRNA沉默人纤维介素基因对心肌微血管内皮细胞增殖、迁移的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人纤维介素(fgl2)对心肌微血管内皮细胞(MMVECs)增殖、迁移的影响。方法制作并包装fgl2的RNA干扰慢病毒,转染MMVECs。实验分为单纯MMVECs(对照组)、空载质粒慢病毒(GFP组)、fgl2短发夹RNA(shRNA)慢病毒(fgl2-RNAi-LV组)。稳定转染4 d后,实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测各组fgl2 mRNA表达,MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移能力。结果 qRT-PCR结果显示,与对照组与GFP组比较,fgl2-RNAi-LV组的fgl2表达明显下调,MMVECs的增殖能力与迁移能力增强(P<0.05),而对照组与GFP组无明显差异。结论转染fgl2shRNA慢病毒载体后MMVECs的fgl2表达水平明显下调,fgl2shRNA慢病毒转染MMVECs,MMVECs的增殖能力与迁移能力增强。
- 王亮吴友平郑振中殷然王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋
- 关键词：短发夹RNA迁移
- CD151基因转移对大鼠心肌梗死缺血心肌eNOS表达影响的实验研究
- 2008年
- 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151对缺血心肌eNOS表达的影响。方法制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌。4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151mRNA的表达,Western blot检测CD151的表达,检测eNOS的表达情况,了解高表达CD151对eNOS表达的影响。结果术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(P<0·05);CD151组eNOS与磷酸化eNOS比值明显增加,与对照组、GFP组比较明显增加(P<0·05)。结论rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,激活eNOS,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能。
- 郑振中刘正湘王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋
- 关键词：CD151心肌梗死一氧化氮合酶
- CD151基因转移对大鼠缺血心肌VEGF表达影响的实验研究
- 2008年
- 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151对缺血心肌VEGF表达的影响。方法制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌。4w后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达、Western印迹法检测CD151及VEGF的表达情况,了解高表达CD151对VEGF表达的影响。结果术后4w,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、对照组、GFP组(均P<0.05);CD151组VEGF表达无明显增加,与对照组、GFP组比较无明显增加(均P>0.05)。结论rAAV-CD151可以有效转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成,改善左室功能,但对VEGF表达没有影响。
- 郑振中梁静王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋刘正湘
- 关键词：CD151心肌梗死血管内皮细胞生长因子
- CD151对脐静脉内皮细胞Akt-Ser^(473)位点磷酸化和细胞增殖的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:研究CD151对脐静脉内皮细胞(HUVEC)丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt-Ser473(p-Akt-Ser473)表达和细胞增殖的影响。方法:通过构建pAAV-CD151质粒并转染HUVEC,HUVEC分为正常对照组、绿色荧光蛋白(GFP)组和CD151组。Western Blot检测CD151及Akt、p-Akt-Ser473表达,MTT法测定脐静脉内皮细胞的增殖能力。结果:①CD151组CD151及p-Akt-Ser473表达明显增加,CD151组与正常对照组和GFP组比较有显著性差异(P<0.05),而总Akt三组间无明显差异(P>0.05)。②MTT法检测正常对照组、pAAV-GFP转染组、pAAV-CD151转染组的A值分别为0.1663±0.0095、0.169±0.0085和0.2457±0.0044,pAAV-CD151转染组较pAAV-GFP转染组和正常对照组细胞增殖能力增强,且有显著性差异(P<0.05)。结论:CD151具有促进内皮细胞增殖的作用。CD151可能是通过激活p-Akt-Ser473,增加Akt活力,达到促进细胞增殖的作用。
- 郑振中刘正湘
- 关键词：CD151磷酸化脐静脉内皮细胞细胞增殖
- CD151转染心肌梗死小型猪减少心肌缺血面积并激活FAK／MAPK信号通路被引量：2
- 2009年
- 目的研究重组腺相关病毒介导CD151转染心肌梗死小型猪模型对心肌血运重建的影响及机制。方法结扎小型猪左冠状动脉前降支建立心肌梗死动物模型，分别注射CD151、antiCD151和GFP重组腺相关病毒至缺血心肌内，同时设置正常对照组。8周后13N—NH3 PET评价心肌血流灌注，Western blot检测CD151及相关信号通路分子蛋白的表达。结果术后8周，rAAV—CD151组心肌组织CD151蛋白表达明显高于正常对照组、rAAV—GFP组和rAAV—antiCD151组（P〈0．05）。rAAV—CD151组心肌缺血面积则明显低于rAAV—GFP组和rAAV—antiCD151组（P〈0．05）。CD151表达增高促进了FAK397、FAK925、ERK1／2和JNK的磷酸化激活。结论重组腺相关病毒携带CD151基因能有效转染心肌组织，明显减少心肌缺血面积，并激活FAK／MAPK通路。
- 左后娟刘涛刘正湘刘毓文莎刘晓春汪道文
- 关键词：CD151心肌梗死黏着斑激酶
- CD151对心肌梗死血流动力学的影响及其信号机制
- 2008年
- 目的探讨CD151对大鼠心肌梗死模型血流动力学的影响及其分子学机制。方法制作大鼠心肌梗死模型，将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒（rAAV）载体注入缺血心肌。4周后，心导管测定心脏功能，用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测外源性CD151mRNA的表达，Western blot检测CD151、P13K、Akt的表达。结果心肌梗死后左室功能明显下降，CD151高表达能够明显改善左室功能，并可上调磷脂酰肌醇3-激酶和磷酸化的蛋白激酶B的表达。结论CD151基因的导入能够改善心室功能，其分子机制与P13K／Akt信号通路的激活有关。
- 郑振中刘正湘王梦洪郑泽琪彭景添魏云锋
- 关键词：CD151血流动力学磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B
- 重组腺相关病毒介导的CD151基因转移对大鼠缺血心肌血管密度的影响被引量：4
- 2007年
- 目的通过将携带人CD151基因的重组腺病毒相关病毒(rAAV)载体注入缺血心肌,观察CD151基因对缺血心肌血管密度的影响。方法结扎冠状动脉前降支制作大鼠急性心肌梗死模型,将rAAV-CD151注入缺血心肌处。4周后取注射部位心肌,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外源性CD151 mRNA的表达、Western blot检测CD151的表达、Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色并计数注射部位心肌毛细血管数目,评价外源CD151对毛细血管密度的影响。结果术后4周,CD151组心肌组织检测到外源性CD151 mRNA的表达,假手术组、缺血对照组、GFP组未检测到外源性CD151 mRNA的表达,且CD151组心肌组织CD151蛋白表达水平高于假手术组、缺血对照组、GFP组(P<0.01);CD151组血管密度与缺血对照组、GFP组比较显著增加(P<0.01)。结论rAAV-CD151可以有效地转染大鼠心肌组织,促进缺血心肌的血管生成。
- 郑振中刘正湘
- 关键词：CD151心肌梗塞毛细血管密度
