国家自然科学基金(31172364)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 相关作者：于录袁鹏史祺云邢明勋宋晓平更多>>
- 相关机构：吉林大学西北农林科技大学吉林农业科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金病毒基因工程国家重点实验室开放课题基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌isdA基因对宿主上皮细胞免疫指标的影响被引量：1
- 2014年
- 目的对金黄色葡萄球菌IsdA的编码基因缺失前后与宿主上皮细胞共孵育后的免疫学进行研究,为进一步研究金葡菌感染机制及抗金葡菌制剂的研究提供依据。方法金黄葡萄球菌野生株Newman和IsdA缺失株NewmanΔIsdA分别作用于上皮细胞Hacat,运用实时荧光定量PCR、ELISA及Western Blot方法检测细胞促炎性细胞因子和趋化因子的分泌情况。结果 PCR结果表明,金黄色葡萄球菌IsdA+/-均能提高上皮细胞分泌促炎性细胞因子(IL-8、TNF-α和IL-6),趋化因子MCP-1,表面受体TLR2和TLR4,C型植物血凝素-1(dectin-1)及抗菌肽LL-37的表达,而IsdA-/-诱导上皮细胞释放细胞因子的能力要低于IsdA+/+,但IsdA-/-组上皮细胞因子水平高于正常对照组;通过ELISA、Western Blot检测与PCR结果一致。结论研究表明,受金黄色葡萄球菌缺失株NewmanΔIsdA作用的上皮细胞促炎症因子分泌减少,细胞表面受体蛋白的表达和转录水平也相应降低,暗示了该缺失株的侵袭力降低,为进一步研究金葡菌感染机制及抗金葡菌制剂提供依据。
- 丛立新李蕾于录
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因敲除
- 桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用被引量：7
- 2012年
- 为研究桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用,用微量肉汤稀释法测定桃柁酚对10株金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,并利用激光共聚焦显微镜观察桃柁酚抑制生物膜的情况;通过实时荧光定量RT-PCR技术检测桃柁酚对细菌生物膜形成过程中相关基因的水平变化;采用斑点免疫印迹法检测细胞间多糖黏附素在生物膜形成过程中的作用。结果显示,桃柁酚对金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度值范围分别为1～2μg/mL和4～16μg/mL;能杀灭和清除已形成的生物膜;桃柁酚可通过影响agr和sar调控系统,抑制细胞间多糖黏附素合成基因icaA的表达进而抑制细胞间多糖黏附素的合成。表明桃柁酚能有效抑制金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜,是一种抑制金黄色葡萄球菌生物膜的有效药物。
- 王晓红于录刘丽慧申凤鸽邢明勋袁鹏宋晓平
- 关键词：金黄色葡萄球菌生物膜
- 阿奇霉素对金黄色葡萄球菌生物被膜的抑制作用被引量：10
- 2012年
- 金黄色葡萄球菌(S.aureus)是感染性疾病常见病原体之一,具有较高的发病率和病死率。采用微量稀释法测定阿奇霉素对S.aureus悬浮菌和生物被膜的抗菌活性,并通过生物被膜形成实验、溶血素检测、Western blot分析和荧光定量PCR实验考察了阿奇霉素对S.aureus生物被膜形成和主要毒力因子分泌的影响。结果表明:阿奇霉素对S.aureus悬浮菌和生物被膜具有较好的抗菌活性,并可有效地抑制生物被膜的形成;亚抑菌浓度的阿奇霉素呈剂量依赖式抑制S.aureusα-溶血素和肠毒素A的分泌,1/2MIC时其分泌几乎完全受到抑制,这将有助于治疗由S.aureus导致的感染。
- 邢明勋贾生美袁鹏史祺云程威金琨琪于录
- 关键词：金黄色葡萄球菌阿奇霉素生物被膜毒力因子
- 桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜形成及cidA表达的影响被引量：3
- 2013年
- 为研究桃柁酚对金黄色葡萄球菌(S.aureus)生物膜形成的影响及其机制,本研究通过结晶紫半定量法和激光共聚焦显微镜检测桃柁酚对S.aureus生物膜形成的影响,利用实时定量RT-PCR分析桃柁酚对cidA及其调控基因的作用,并测定了桃柁酚对胞外DNA(eDNA)释放的作用及对HaCaT细胞的细胞毒性。结果表明,桃柁酚可以有效减少eDNA的释放并抑制S.aureus生物膜的形成,并且抑制趋势呈剂量依赖关系。此外,在1/8×MIC药物浓度时,桃柁酚可以诱导eDNA的释放并诱导生物膜形成。桃柁酚可以通过影响agr和sar调控系统,作用于cidA基因进而影响eDNA释放及生物被膜的形成。而且,4×MIC浓度的桃柁酚对人体无毒害作用。本研究为治疗S.aureus感染提供新的方法,并为进一步研究桃柁酚的作用机制奠定了基础。
- 王晓红于录周泐熊凌锌史祺云宋晓平
- 关键词：金黄色葡萄球菌生物膜EDNA
- 金黄色葡萄球菌毒力因子PSM-α的4个基因串联融合表达及其对人中性粒细胞的生物学作用
- 2013年
- 酚可溶性调控蛋白(PSM)是一种新发现的金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞外分泌蛋白,为研究其对人中性粒细胞的生物学作用,本研究通过设计linker将其中编码PSM-α蛋白的PSM-α1、PSM-α2、PSM-α3、PSM-α4基因串联,并克隆于pGEX-4T-1中。重组菌经IPTG诱导,重组蛋白以可溶形式高效表达。通过Glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化并用凝血酶切除其GST标签,得到的蛋白作用于正常人的中性粒细胞,通过ELISA检测细胞因子IL-1β及IL-8的含量。结果显示,纯化后蛋白刺激中性粒细胞后,IL-8含量显著升高。结果证明,串联表达后的PSM-α蛋白可以刺激中性粒细胞释放炎性因子,诱导炎症的发生,产生致病作用。
- 刘丽慧温峻袁鹏史祺云金琨琪程威于录冯海华
- 关键词：可溶性蛋白人中性粒细胞
