辽宁省自然科学基金(20042069)
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 相关作者：姚长义王广斌傅永慧付勤李振更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院沈阳市第五人民医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 几丁质支架对体外间质干细胞成软骨分化的影响
- 2007年
- 目的鉴定间充质干细胞诱导分化为软骨细胞后,其在单层培养和几丁质支架上培养的差别。方法密度梯度离心兔股骨骨髓,分离BMSCs,用TGF-β1诱导第3代的BMSCs向软骨方向分化,2周后检测Ⅱ型胶原表达情况。将分化后的软骨样细胞传代,用无TGF-β1的培养基分别进行单层培养和接种在几丁质支架上培养2周,再用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况。结果BMSCs经TGF-β1诱导后向软骨细胞方向分化,诱导后的细胞在无TGF-β1的培养中,采用单层培养方式的软骨细胞很快出现去分化表型,而接种在几丁质支架上的细胞仍能较好表达Ⅱ型胶原。结论几丁质支架在延缓软骨细胞去分化和老化方面有积极作用。
- 付勤王广斌邴佩旭李斌傅永慧
- 关键词：间充质干细胞软骨细胞几丁质
- 脑室内低温对家兔急性大脑中动脉缺血模型HSP70表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察脑室内低温对家兔急性大脑中动脉缺血模型热休克蛋白70((Heat shock protein70,HSP70)表达的影响。方法家兔16只,随机分为2组:对照组(常温生理盐水)、低温组(22℃低温生理盐水)各8只,应用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,进行脑室内穿刺低温液体灌注亚低温干预,24h后采用SABC方法检测各组脑组织HSP70表达,TUNEL方法检测凋亡细胞。结果低温组的TUNEL染色阳性细胞数和HSP70染色阳性细胞数明显低于及多于常温组,有显著性差异(P<0.05)。结论通过脑室内低温治疗,可以减少缺血区域凋亡细胞,并增加HSP70细胞的表达。同时改善了动物的神经系统症状。
- 姚冰姚长义
- 关键词：脑室亚低温HSP70
- 脑室内低温对兔脑缺血后神经细胞凋亡及P53蛋白表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨脑室内低温对新西兰白兔局部脑缺血损伤后神经细胞凋亡及P53蛋白表达的影响。方法采用线栓法制作新西兰白兔大脑中动脉闭塞(MCAO)局部脑缺血模型,缺血时间24h。雄性新西兰白兔24只,随机分成常温组和亚低温组,2组再随机分成2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)组和凋亡组。观察动物行为、TTC染色检测脑梗死体积、TUNEL染色观察细胞凋亡、免疫组化染色观察P53蛋白的表达水平。结果与常温组比较,亚低温组动物肢体偏瘫程度轻、脑梗死体积小、缺血周围神经细胞凋亡少,P53蛋白表达降低。结论亚低温神经保护机制涉及P53蛋白的表达,脑室内低温是治疗急性脑缺血的一个新方法。
- 杨明飞姚长义李振
- 关键词：脑室内低温细胞凋亡新西兰白兔
- 脑室内低温对兔急性脑缺血后Bcl-2表达及神经细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨脑室内低温法对家兔急性脑缺血后抗凋亡蛋白Bcl-2表达及神经细胞凋亡的影响。方法 4～6个月龄雄性家兔24只,体重2.8～3.0 kg,随机分为两组:常温组(灌注38℃等渗盐水)和亚低温组(灌注20℃等渗盐水),每组各12只。采用线栓法建立急性大脑中动脉闭塞脑缺血模型,脑室内灌注低温等渗盐水行亚低温干预。Western印迹和免疫组织化学染色法检测脑缺血区域周围Bcl-2的蛋白表达水平变化;TUNEL染色检测神经细胞凋亡水平。结果与常温组相比,亚低温组脑缺血区域周围Bcl-2的表达水平显著增高(P<0.01);神经细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。结论脑室内低温能通过上调Bcl-2蛋白表达来降低急性脑缺血后神经细胞凋亡。
- 李振姚长义杨明飞
- 关键词：脑室内低温急性脑缺血神经细胞凋亡
- 间充质干细胞在构建组织工程软骨中的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探索利用几丁质支架和间充质干细胞(MSC)构建组织工程软骨。方法抽取兔股骨骨髓,密度梯度离心分离骨髓MSC,用转化生长因子β(1TGF-β1)诱导第3代的骨髓MSC向软骨方向分化,2周后用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况。将分化后的软骨样细胞传代,接种在几丁质支架上,用含TGF-β1的培养基继续培养2周,再用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况,并在电镜下观察软骨细胞的生长情况。结果骨髓MSC经TGF-β1诱导后,具有软骨细胞特点,接种在几丁质支架上继续培养2周,这些细胞在支架上生长良好,并仍能很好表达Ⅱ型胶原。结论MSC经TGF-β1诱导,分化成的软骨样细胞在几丁质支架上表型稳定,生长良好。
- 王广斌傅永慧杨礼庆贺明付勤
- 关键词：间充质干细胞软骨细胞几丁质
- 几丁质支架对间充质干细胞成软骨分化中Ⅱ型胶原表达的影响
- 2007年
- 目的将间充质干细胞诱导分化为软骨细胞,观察分化后的细胞在单层培养和几丁质支架上培养的差别。方法抽取兔股骨骨髓,密度梯度离心分离BMSCs,用TGF-β1诱导第3代的BMSCs向软骨方向分化,2周后用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况。将分化后的软骨样细胞传代,用无TGF-β1的培养基分别进行单层培养和接种在几丁质支架上培养2周,再用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况。结果BMSCs经TGF-β1诱导后,具有软骨细胞特点,然而进行无TGF-β1的继续培养后,单层培养的类软骨细胞很快呈去分化表型,而接种在支架上的细胞仍能较好表达Ⅱ型胶原。结论几丁质支架具有延缓软骨样细胞去分化和老化的作用。
- 付勤王广斌邴佩旭李斌傅永慧
- 关键词：间充质干细胞软骨细胞几丁质
