山东省自然科学基金(Y2004C25)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
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- 相关机构：山东中医药大学山东大学中日友好医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 转染Noggin基因的骨髓基质细胞在体外分化为神经元样细胞的初步研究
- 2007年
- 目的构建Noggin基因的表达载体,初步探讨转染Noggin基因的骨髓基质细胞(BMSCs)在体外分化为神经细胞的情况。方法应用RT-PCR技术,从正常人胎脑组织中扩增出Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2+Tα1-Noggin。用Percoll分离液分离出大鼠BMSCs,借助脂质体将Noggin基因转入BMSCs。观察细胞形态的改变,并利用免疫组化鉴定分化细胞是否表达神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结果成功构建Noggin基因的真核表达载体pCS2+Tα1-Noggin。Percoll分离液分离出BMSCs,转染Noggin基因表达载体后,形似神经细胞;免疫组化检测到NSE、MAP-2表达,未检测到GFAP表达。结论转染Noggin基因的BMSCs在体外可以分化为神经元样细胞。
- 张明丽周盛年魏先森刘黎青韩永涛
- 关键词：骨髓基质细胞基因转染NOGGIN神经细胞
- 中药制剂诱导骨髓间充质干细胞多向分化的研究进展被引量：7
- 2007年
- 骨髓间充质干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能,随着中药提纯技术的发展,以中药制剂作为诱导剂来防治疾病的研究在逐步展开。国内许多抗氧化、抗衰老等中药的研究,已成功诱导出心肌细胞、神经细胞、成骨细胞、软骨细胞等,并取得初步成果。对其研究进行概述,引用文献26篇。
- 刘黎青高艳霞周盛年王媛
- 关键词：骨髓间充质干细胞中药多向分化
- 刺五加注射液体外诱导骨髓间充质分化机制的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨刺五加注射液对体外培养的骨髓间充质干细胞诱导为神经元样细胞的作用机制。方法:体外分离培养骨髓间充质干细胞,以刺五加注射液对其进行体外诱导,免疫组化鉴定NSE、MAP-2等神经标志物及尼氏体染色。结果:刺五加注射液可体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞,NSE、MAP-2反应及尼氏体染色均阳性。结论:刺五加注射液的诱导机制可能与其具有补肾益精及抗氧化性有关。
- 高艳霞刘黎青
- 关键词：骨髓间充质干细胞刺五加注射液补肾益精抗氧化性
- 大鼠骨髓基质细胞的分离培养
- 2005年
- 目的:建立一种体外分离、培养扩增大鼠骨髓基质细胞的方法。方法:用密度梯度离心法(Percoll法)分离出大鼠骨髓基质细胞,并用含20%(体积分数)胎牛血清的DMEM培养液培养,胰酶消化传代,倒置显微镜下观察。结果:Percoll淋巴细胞分离液分离出的大鼠单核细胞活力达99%,将细胞接种到培养瓶10～14d后,细胞长满瓶底,第1次传代,以后每5～7d传代,传3～4代,细胞形态较典型。结论:Percoll法分离出离体培养的大鼠骨髓基质细胞。
- 周盛年魏先森刘黎青
- 关键词：干细胞骨髓细胞培养
- 刺五加注射液体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经样细胞的最佳浓度探索被引量：4
- 2008年
- 目的探讨刺五加注射液体外诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经样细胞的最佳浓度。方法体外密度梯度法分离培养骨髓基质细胞,以不同浓度刺五加注射液对其进行体外诱导,用MTT法检测各组细胞生长情况,用免疫细胞化学方法计算各组神经样细胞阳性数加以比较。结果用不同浓度刺五加注射液诱导后均可表现为典型的神经样细胞形态,其中0.3mg/ml组和0.4mg/ml组细胞生长情况与免疫组化结果均与其余各组差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论刺五加注射液体外诱导成年大鼠骨髓基质细胞分化为神经样细胞以0.3～0.4mg/ml浓度最佳。
- 刘黎青高艳霞周盛年王媛
- 关键词：骨髓基质细胞刺五加注射液神经元样细胞
- 转染Noggin基因的骨髓基质干细胞体外分化为神经元样细胞的研究被引量：4
- 2009年
- 目的构建Noggin基因的表达载体,分离骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨转染Noggin基因的BMSCs在体外分化为神经元样细胞的情况。方法应用RT-PCR技术扩增Noggin基因,利用基因工程技术构建载体pCS2+〔Tα1〕-Noggin,分离、培养大鼠BMSCs,借助脂质体将Noggin基因转入BMSCs。观察诱导后细胞形态变化,利用免疫细胞化学方法鉴定分化细胞是否表达神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。利用RT-PCR方法检测神经细胞标记物mRNA的表达。结果成功构建Noggin基因的真核表达载体并分离培养BMSCs。转染Noggin基因表达载体后,分化的BMSCs形态似神经细胞;免疫化学检测到NSE、MAP-2特异性标志物表达,未检测到GFAP表达;RT-PCR测得神经细胞标记物GAP43、NCAM、SYN1表达。结论从形态、蛋白、基因水平证实转染Noggin基因的BMSCs在体外可以分化为具有部分功能的神经细胞。
- 孙弦周盛年张明丽魏先森刘黎青
- 关键词：骨髓基质干细胞基因转染NOGGIN分化神经细胞
