国家自然科学基金(30570705)
- 作品数：9 被引量：54H指数：4
- 相关作者：陆树良田鸣杨国志宋振强谢挺更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院广西医科大学第一附属医院天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糖尿病对大鼠皮肤角质形成细胞功能损害的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨糖尿病对大鼠皮肤角质形成细胞生物学行为的影响.方法 将SD大鼠随机分为糖尿病组和对照组,诱导糖尿病大鼠模型,并制作深Ⅱ度烫伤大鼠模型,测定伤后3、7、14 d和21 d的创面愈合率;观察两组表皮组织的组织学特征及厚度,测定两组角质形成细胞贴壁率、细胞周期、早期凋亡率、迁移能力,观察晚期糖基化终末产物（AGEs）蓄积情况.结果 糖尿病组与对照组比较,在伤后7、14 d和21 d创面愈合面积百分比显著减少（P〈0.05）.糖尿病组皮肤表皮细胞层次欠清晰,部分表皮细胞缺乏复层排列,细胞数量明显减少;糖尿病组角质形成细胞12、24 h贴壁率显著下降（P〈0.05）,进入G2/M期的细胞显著减少（P〈0.05）,早期凋亡细胞的比例显著增高（P〈0.05）,细胞迁移能力明显低于对照组.糖尿病大鼠表皮层中有大量的AGES蓄积.结论 糖尿病大鼠创面愈合过程中存在再上皮化受阻,这一现象与表皮角质形成细胞的生物学功能受抑有关.表皮层大量AGEs蓄积可能与糖尿病环境下角质形成细胞生物学功能受抑有关.
- 宋振强王润秀于德民王鹏华陆树良田鸣谢挺黄飞杨国志
- 关键词：表皮
- 糖基化基质对人皮肤成纤维细胞增殖凋亡平衡的研究
- 2009年
- 目的探讨糖尿病皮肤细胞外基质(ECM)糖基化改变与细胞增殖凋亡平衡的相关性。方法 DM或非DM患者的皮肤组织和溃疡创面标本组织学观察,同时免疫组化法检测皮肤组织增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡细胞、糖基化终末产物(AGE)和糖基化终末产物受体(RAGE)表达;体外建立糖基化基质,RAGE抗体干预后,检测细胞存活率、细胞周期和凋亡。结果与对照组相比,DM皮肤胶原萎缩,凋亡细胞比例增高;创面肉芽形成不良,细胞增殖能力减弱,凋亡细胞增加,AGE和RAGE表达增多;体外糖基化基质上接种成纤维细胞存活率明显减少,细胞周期运行障碍,凋亡增加,阻断AGE-RAGE间相互作用可基本缓解糖基化基质对细胞增殖凋亡过程的影响。结论 DM皮肤组织中糖基化ECM蓄积是细胞功能改变的重要环境介质,经RAGE介导影响细胞增殖凋亡平衡,致糖尿病皮肤创伤起点异常,创面难愈。
- 牛轶雯谢挺缪明远葛奎陆树良
- 关键词：创面愈合细胞凋亡细胞增殖糖基化
- 晚期糖基化终末产物修饰人血清白蛋白对离体角质形成细胞迁移功能的影响被引量：9
- 2008年
- 目的探讨晚期糖基化终末产物（AGE）对大鼠离体表皮角质形成细胞迁移功能的影响及其可能机制。方法制备AGE修饰人血清白蛋白（AGE—HSA），加入分离自正常SD大鼠背部表皮组织的角质形成细胞培养体系（终浓度60μg／ml，AGE—HSA组），并设空白对照组。以噻唑盐（MTT）比色法测定2组角质形成细胞培养12、24h贴壁率（以吸光度值表示）；划痕实验和Transwell实验观察细胞迁移数；流式细胞仪观察细胞整合素α3的表达；扫描电镜观察细胞伪足形成情况；免疫荧光染色法观察细胞微丝形态变化。结果AGE-HSA组和空白对照组培养12h的贴壁率分别为0．112±0．022、0．122±0．004（P〈0．05），培养24h的贴壁率分别为0．173±0．012、0．267±0．024（P〈0．05）；划痕实验迁移细胞数分别为（7±4）和（61±11）个／HP（P〈0．05），Transwell实验迁移细胞数分别为（72±18）和（288±52）个（P〈0．05）；角质形成细胞整合素α3表达量分别为（3．2±1．2）％和（36．6±11．2）％（P〈0．05）。AGE-HSA组细胞的伸展、伪足形成及微丝形成均受到抑制。结论高糖环境下AGE的大量蓄积对角质形成细胞的迁移有明显抑制作用，其作用机制可能与AGE及其受体途径以及整合素细胞内转导途径异常有关。
- 宋振强王润秀于德民王鹏华陆树良田鸣谢挺黄飞杨国志
- 关键词：糖基化终产物角蛋白细胞细胞运动
- 烧伤创面愈合的理论探索与临床实践被引量：27
- 2008年
- 促进烧伤创面愈合是烧伤治疗的基本任务，而建立正确的创面治疗方法则依赖于对创面愈合机制的深入了解。50年来，我国烧伤医务工作者在创面愈合的临床实践和理论探索上作出了积极努力。
- 陆树良
- 关键词：烧伤伤口愈合皮肤移植
- 糖基化终末产物对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响被引量：7
- 2009年
- 目的了解糖基化终末产物（AGE）蓄积对糖尿病大鼠烧伤创面愈合的影响。方法将75只SD大鼠按完全随机化方法分为对照组、糖尿病组及氨基胍干预组，每组25只。将大鼠造成深Ⅱ度烫伤（以下称烧伤）后，后2组制作成糖尿病模型，氨基胍干预组给予管饲氨基胍100mg·kg^-1·d^-1。于伤后0（伤后当天）、3、7、14、21d处死大鼠，描取创面形状，并取全层皮肤组织待测。同时取大鼠背部表皮行KC培养及鉴定。观察各组创面愈合率及皮肤组织糖含量，创面组织形态学变化，皮肤组织中AGE分布。观察不同浓度AGE对KC增殖、凋亡的影响，以仅加表皮细胞培养液的KC为对照组。结果伤后7、14、21d糖尿病组创面愈合率显著低于对照组（P〈0.01），而氨基胍干预组却明显高于前2组（P〈0.01）。糖尿病组皮肤组织含糖量为（2.62±0.19）mmol／g，氨基胍干预组为（2.58±0.07）mmol／g，均高于对照组（1.04±0.09）mmol／g（P〈0.01）。对照组大鼠创面炎性细胞浸润强烈而局限，坏死组织形成、脱落及时，创面愈合无明显延迟；糖尿病组大鼠炎性细胞浸润缓慢、弥散而持久，坏死组织形成、脱落较迟，创面愈合明显延迟；氨基胍干预组大鼠炎性细胞浸润及时、强烈，坏死组织形成、脱落以及创面愈合时间较糖尿病组早。对照组中有少量散在的AGE沉积，糖尿病组AGE蓄积显著增加，而氨基胍干预组AGE含量显著降低。AGE作用48h后，KC的增殖显著降低，呈现浓度依赖性，各剂量AGE干预组的吸光度值均低于对照组（P〈0.01）。100μg／mL AGE干预组KC早期凋亡连接素V阳性细胞比例为（15.1±2.3）％，明显高于对照组[（11.2±1.2）％，P〈0.05]；终末期凋亡双阳性细胞比例为（14.3±3.5）％，与对照组（15.2±2.4）％比较，差异无统计学意义（P〉0.05）。结论高血糖可能是通过AGE蓄积，抑制KC等修复�
- 葛奎牛轶雯谢挺林炜栋田鸣徐兵崔世涛陆树良
- 关键词：烧伤糖尿病创面愈合糖基化终末产物
- 晚期糖基化终末产物对中性粒细胞生物学行为的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察晚期糖基化终末产物（AGE）对中性粒细胞生物学行为的影响，了解皮肤组织中AGE蓄积与糖尿病愈合中异常炎性反应的关系。方法体外分离培养SD大鼠中性粒细胞。在细胞悬液中加入不同的刺激物，根据所加物质分为：对照组，加入RPMI1640培养液；A组，加入0．315mg／mLAGE＋RPMI1640；B组，加入0．625mg／mLAGE＋RPMI1640；C组，加入1．250mg／mLAGE＋RPMI1640。噻唑蓝法检测中性粒细胞活力；反转录-PCR法检测L-选择素mRNA表达；酶联免疫吸附测定法检测中性粒细胞弹性蛋白酶释放量；二氢二氯荧光黄二醋酸盐法检测中性粒细胞内活性氧水平。结果A、B、c组中性粒细胞活力（0．320±0．030、0．380±0．020、0．290±0．010）均高于对照组（0．170±0．040，P〈0．05）。各实验组L-选择素mRNA表达水平（A组0．95±0．08、B组1．36±0．27、C组0．50±0．26）、弹性蛋白酶释放量（A组1．98±0．43、B组2．50±0．43、C组2．01±0．18）、活性氧水平（A组1．64±0．20、B组2．16±0．26、C组3．26±0．75）也均高于对照组（此3项指标分别为0．36±0．26、0．91±0．21、0．72±0．15，P〈0．05）。结论AGE能增强中性粒细胞活力，使细胞的多种生物学行为发生改变，这可能是糖尿病异常炎性反应的主要原因之一。
- 董炜谢挺董叫云金曙雯花兰女宋菲青春陆树良
- 关键词：中性白细胞糖基化终产物
- 基质糖基化对角质形成细胞迁移功能损害的机制被引量：2
- 2008年
- 目的探讨糖尿病条件下大鼠创面愈合过程中角质形成细胞迁移功能受损的可能机制。方法选用SD大鼠6只，取背部表皮进行角质形成细胞培养；制作并鉴定糖基化基质模型；评价糖基化基质对正常大鼠角质形成细胞迁移功能的影响；测定糖基化基质对正常大鼠角质形成细胞粘附功能、培养12，24h黏附形态、伪足形成、微丝表达、整合素表达的影响。结果糖基化层黏连蛋白对细胞迁移较对照组有明显抑制（P〈0．05）；对细胞贴壁率无明显影响（P〉0．05），但抑制了细胞的伸展及伪足的伸出，干扰了微丝的聚集，降低了整合素的表达（P〈0．05）。结论正常大鼠皮肤角质形成细胞在糖基化基质上出现迁移功能受阻，这可能是与整合素信号传导出现障碍，引起整合素、肌动蛋白表达减少和微丝形成，从而引起丝状伪足和板状伪足形成减少有关。
- 宋振强王润秀王鹏华靳建鸣陆树良田鸣谢挺黄飞杨国志
- 关键词：细胞外基质角质形成细胞
- 糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面新生血管形成障碍的研究被引量：5
- 2008年
- 目的了解有糖尿病基础的机体烫伤后，创面新生血管化程度与创面难以愈合的关系。方法将sD大鼠分成对照组和以链脲佐菌素诱导的糖尿病组，每组50只。2组大鼠均造成20％TBSA的深Ⅱ度烫伤，于伤后即刻及1、3、7、14和21d取创面组织，行组织学观察评分，并计算创面愈合率；同时采用免疫荧光双标记法检测创面组织的新生血管化程度及血管内皮细胞数量。结果糖尿病组大鼠创面组织评分及创面愈合率均低于对照组；糖尿病组大鼠各时相点新生血管化程度较对照组明显降低（伤后7d，糖尿病组为12．00±1．40、对照组为60．00±3．00，P〈0．01）。2组大鼠各时相点创面血管内皮细胞数量差异不明显，但糖尿病组大部分血管内皮细胞未形成功能性微血管。结论糖尿病深Ⅱ度烫伤难愈创面虽血管内皮细胞增殖活跃但仍血供不良，其机制与功能性微血管形成障碍有关。
- 乔亮王志勇韦俊原博金曙雯花兰女廖镇江史济湘陆树良
- 关键词：糖尿病新生血管化病理性难愈创面
- 晚期糖基化终末产物对表皮角质形成细胞细胞周期的调控及信号通路的影响
- 2008年
- 目的了解晚期糖基化终末产物（AGE）对表皮角质形成细胞细胞周期的影响及其可能的信号通路。方法体外制备AGE修饰的蛋白质（AGE—HSA，150m-g／L）作为干预手段。将原代培养的表皮角质形成细胞分为：正常组，采用无血清DK—SFM培养液培养；AGE干预组，采用含150mg／LAGE—HSA的DK—SFM培养液培养；对照组以10μmol／LU0126处理后同正常组条件培养；干预对照组以上述U0126处理后同AGE干预组条件培养。采用流式细胞仪检测细胞周期，蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白D1、B1以及细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）和p44／42丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）的表达。结果与正常组比较，AGE干预组s期和G2／M期细胞百分比均显著降低（P〈0．05）；对照组、干预对照组G2／M期细胞百分比亦显著降低，分别为（9．7±1．1）％、（9．8±0．7）％（P〈0．05）。与正常组比较，其余3组细胞周期蛋白D1表达下降，其中干预对照组该蛋白仅有微弱表达：正常组、AGE干预组CDK4、细胞周期蛋白B1、p44／42MAPK蛋白表达相似，对照组、干预对照组的3种蛋白表达显著低于前2组。结论AGE通过下调细胞周期蛋白D1的表达阻碍表皮角质形成细胞的细胞周期进程。
- 谢挺牛轶雯葛奎陆树良
- 关键词：糖基化终产物细胞外信号调节MAP激酶类细胞周期角质形成细胞
