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天津市自然科学基金(06YFJRIC06900)
作品数:
1
被引量:11
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相关作者:
韩玉植
于丹妮
韩福胜
陈杰
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2008
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LuxS基因缺失的变形链球菌突变株的构建及鉴定
被引量:11
2008年
目的通过同源重组法构建LuxS基因缺失的变形链球菌(Streptococcus mutans)突变株。方法运用基因同源重组方法将红霉素抗性基因(Eym‘)连接到PCR扩增LuxS基因两端区域产生的2个基因片段之间,并共同插入到pUC19载体的多克隆位点中,构建出带红霉素抗性标志的缺失突变载体pUCluxKO。将突变载体转化到含完整LuxS基因的突变受体变形链球菌标准株中,红霉素筛选出LuxS基因缺失的变形链球菌突变株,并经PCR、生物荧光检测及DNA测序鉴定。结果构建的突变载体经限制性内切核酸酶酶切分析显示,产生的条带与设计结果完全一致。PCR方法扩增突变株LuxS和Eym'基因显示,LuxS基因已被完整敲除掉,经生物荧光检测,突变株不能诱导哈氏弧菌(Vibrio hazy/)BB170的生物发光,说明不能产生信号分子AI-2(autoinducer-2)。DNA测序证实筛选得到了LaxS基因缺失的变形链球菌突变株。连续传代培养后证实,变形链球菌LaxS基因突变株具有良好的稳定性。结论成功构建出LaxS基因缺失的变形链球菌突变株,为研究LaxS基因对变形链球菌致龋毒力的影响奠定了基础。
于丹妮
韩福胜
韩玉植
陈杰
关键词:
变形链球菌
LUXS基因
突变株
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