国家自然科学基金(30570778)
- 作品数：6 被引量：22H指数：4
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- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院同济大学附属同济医院更多>>
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- 维甲酸诱导基因G抑制肿瘤细胞增殖的分子机制研究被引量：7
- 2008年
- 目的探讨维甲酸诱导基因G（RIG—G）抑制肿瘤细胞增殖的分子机制。方法应用转染实验、Western印迹法、免疫共沉淀和免疫荧光共定位等技术验证RIG—G蛋白与JAB1蛋白之间的相互作用，并研究RIG—G蛋白对JAB1蛋白功能的影响。结果RIG—G蛋白可以与JAB1蛋白发生相互作用，并影响JAB1蛋白在细胞内的定位和分布。实验发现，在NIH3T3细胞中单独转染JAB1时，JAB1蛋白在细胞核和细胞质内呈弥散分布，而当与RIG—G共同转染后，JAB1蛋白在细胞核内的含量明显减少，而改变为主要在胞质内分布，并与RIG—G蛋白发生部分共定位。此外，RIG—G蛋白还具有抑制JAB1对细胞周期抑制因子p27的辅助降解功能。结论RIG—G可以通过和JAB1的相互作用，使后者部分滞留在细胞质内，从而影响JAB1发挥正常功能，干扰其对p27的辅助降解，维持细胞内p27的稳定性，促进细胞退出增殖周期，抑制细胞增殖。
- 李冬楼叶江肖澍潘晓蓉贾培敏童建华
- 关键词：维甲酸JAB1
- PML-RARα对环腺苷酸诱导急性髓系白血病细胞分化的影响被引量：1
- 2008年
- 为了进一步探讨环腺苷酸cAMP协同低剂量氧化砷诱导急性早幼粒白血病细胞分化的分子机制,以稳定转染了PML-RARα融合基因的PR9细胞为实验对象,通过观察细胞的生长,并利用形态学实验、流式细胞技术和荧光素酶报告基因转染实验等检测cAMP和/或氧化砷处理前后细胞相关指标的变化,研究PML-RARα在cAMP诱导AML细胞分化过程中的作用。结果显示,虽然cAMP单独能使表达PML-RARα的PR9细胞表面分化抗原CD11b的阳性率有所升高;但细胞形态学分析表明,cAMP单用无法诱导表达PML-RARα融合蛋白的PR9细胞分化,只有联合氧化砷才能使细胞表现出完全分化的特征,并伴有CD11b表达的显著升高。此外,PML-RARα还可以明显抑制含有cAMP反应元件的报告基因的转录。结论:PML-RARα融合蛋白对cAMP诱导AML细胞分化的信号转导途径具有显著的抑制作用。
- 贾培敏窦爱霞张长林楼叶江潘晓蓉童建华
- 关键词：环腺苷酸急性髓系白血病细胞分化
- 干扰素诱导RIG-G基因表达调控机制研究被引量：5
- 2007年
- 目的探讨α干扰素（interferon α,IFNα）调控维甲酸诱导基因（retinoic acid-inducedgene G,RIG-G）表达的分子机制。方法应用http：//www.gene-regulation.com网站提供的AliBaba2.1软件对RIG-G基因的启动子区域进行分析,并采用荧光素酶报告基因转染实验和凝胶电泳迁移实验检测RIG-G基因启动子的功能活性及其对IFNα的反应性。结果发现在RIG-G基因的启动子序列中包含2个保守的干扰素刺激反应元件（IFN-stimulated response elements,ISREs）。转录因子STAT1蛋白（signal transducer and activator of tran-scription1）能够与这两个反应元件ISREⅠ和ISREⅡ相互结合。此外,在HT1080细胞中,与空载pXP2报告基因相比,含有ISREⅠ和ISREⅡ的pXP2-A报告基因表现出很强的基础活性（1741.2±517.5）,且这种活性还可被IFNα增强3～4倍（5338.7±1226.9,P〈0.05）。而在STAT1缺陷的U3A细胞中,pXP2-A报告基因的活性则被明显消弱（从1741.2±517.5降到406.1±103.2,P〈0.05）,加入IFNα也不能使其加强,表明STAT1蛋白是ISREⅠ和ISREⅡ发挥活性所必需的。结论RIG-G基因启动子所包含的ISREs是IFNα诱导RIG-G基因表达的分子基础,RIG-G是一个受STAT1蛋白直接调控的靶基因,在IFNα的信号转导途径中发挥着重要的作用。
- 李冬肖澍潘晓蓉楼叶江贾培敏童建华
- 关键词：维甲酸诱导基因Α干扰素
- 尿多酸肽联合环腺苷酸诱导维甲酸耐药急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的实验研究被引量：6
- 2008年
- 目的探讨尿多酸肽（CDA-Ⅱ）单独和联合环腺苷酸（cAMP）对维甲酸耐药的急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞的作用。方法以维甲酸耐药的APL细胞株NIM—R2为体外模型，观察使用CDA—Ⅱ单独和联合cAMP处理前后细胞生长和形态的改变；同时利用流式细胞术检测细胞的凋亡特征，包括细胞内DNA含量的分布、亚二倍体（sub—G1）细胞群所占比例、凋亡相关蛋白Bcl-2的表达水平等；并通过电泳鉴定因基因组DNA非随机性降解导致的梯状DNA。结果CDA-Ⅱ可以通过降低细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的水平，诱导NB4-R2细胞发生凋亡；cAMP则能显著加强CDA—Ⅱ的这一促凋亡作用1g／LCDA-Ⅱ联合100μmol／LcAMP共同处理NB4-R2细胞48h和72h时Bcl-2阳性细胞比例分别下降至（15．1±4．8）％和（7．3±2．9）％。100μmol／L cAMP单独作用可使MB4-R2细胞的Bcl-2阳性率由（92．0±0．6）％下降至（75．3±2．0）％。结论尿多酸肽CDA—Ⅱ联合cAMP对于维甲酸耐药的APL细胞株具有强烈的诱导凋亡效应。
- 贾培敏潘晓蓉肖澍李冬王振义童建华
- 关键词：尿多酸肽环腺苷酸维甲酸耐药细胞凋亡
- 全反式维甲酸诱导Rig-g基因表达的调控机制研究被引量：5
- 2010年
- 为了揭示全反式维甲酸(ATRA)诱导急性早幼粒白血病(APL)细胞株NB4细胞分化过程中rig-g基因表达的分子机制,进一步阐明ATRA在APL细胞分化中的信号转导网络,采用荧光素酶报告基因试验、蛋白质免疫共沉淀试验以及染色质免疫共沉淀试验等对直接启动rig-g基因表达的转录因子及其作用机制进行研究。结果显示:在NB4细胞中,STAT2、IRF-9和IRF-1均能够被ATRA诱导表达,但表达时相有所不同。STAT2和IRF-9可以发生相互作用,形成复合物,并与rig-g基因启动子上的序列结合,激活rig-g基因的表达。IRF-1单独也能激活含rig-g基因启动子的报告基因,但是C/EBPα能强烈抑制IRF-1的这种转录激活作用。结论:在维甲酸诱导APL细胞分化过程中,ATRA首先诱导IRF-1的表达;随着C/EBPα的逐渐下调,IRF1-继而又进一步使细胞内的IRF-9和STAT2的蛋白水平上升。IRF-9和STAT2相互作用形成的复合物是直接诱导rig-g基因表达最基本的转录因子。本研究对于深入理解ATRA诱导APL细胞分化的信号转导网络具有一定的意义。
- 潘晓蓉楼叶江张长林许桂平贾培敏童建华
- 关键词：全反式维甲酸
- 干扰素α调控维甲酸诱导基因G表达分子机制的新发现被引量：1
- 2010年
- 目的探讨干扰素α（IFN-α）调控维甲酸诱导基因G（RIG-G）表达调控的分子机制。方法采用Westernblot方法检测急性早幼粒白血病细胞系NB4经IFN-α处理后信号传导和转录活化因子1（STAT1）、p-STATI和RIG—G蛋白的表达变化。采用细胞转染、报告基因实验、免疫共沉淀实验和染色质免疫沉淀实验等技术，研究STAT1缺失的U3A细胞中，STAT1、STAT2和IFN调节因子9（IRF-9）在IFN-α调控RIG—G基因表达中的作用及其机制。结果在U3A细胞中，只有当STAT2和IRF-9共同转染时，RIG—G启动子荧光素酶报告基因的表达活性才明显升高，约为空载对照组的8倍。在无IFN-α作用时，野生型或突变型STAT2与IRF-9共同转染U3A细胞可产生相似的效应；但IFN-α能进一步增强野生型STAT2与IRF-9的转录激活作用，约为未加IFN-α时的6倍，而对突变型STAT2无效。STAT2能与IRF-9相互作用，并能与RIG-G基因的启动子结合。结论STAT2和IRF-9能以不依赖于STATl的形式发生相互作用，所形成的复合物是介导IFN-α调控RIG—G基因表达的关键性转录因子，这是一种有别于经典JAK—STAT途径的新的干扰素信号转导方式。
- 楼叶江潘晓蓉贾培敏李冬张长林许桂平童建华
- 关键词：干扰素Α信号转导
