国家自然科学基金(30970408)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院安徽农业大学中国科学院研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白基因PGRP-LC1的克隆及功能分析被引量：1
- 2010年
- 天生免疫系统是昆虫抵御外界病原入侵的主要方式。目前研究发现,Imd信号通路与按蚊感染柏氏疟原虫Plasmodium berghei的强度密切相关,而PGRP-LC1是Imd信号通路最上游的受体之一。为了研究斯氏按蚊Anopheles stephensi肽聚糖识别蛋白PGRP-LC1,采用RT-PCR并结合RACE技术克隆斯氏按蚊PGRP-LC1基因,通过序列比较分析,得到两条cDNA序列,其开放阅读框分别为1365bp和1290bp,3′非编码区为320bp,5′非编码区为240bp。将两条cDNA分别命名为AsPGRP-LC1a(GenBank注册号GU214232)和AsPGRP-LC1b(GenBank注册号GU214233)。AsPGRP-LC1a编码454个氨基酸,分子量约为49.07kDa;AsPGRP-LC1b编码429个氨基酸,分子量约为46.3kDa。AsPGRP-LC1b比AsPGRP-LC1a少一个长度为75bp的外显子,该外显子在冈比亚按蚊Anopheles gambiae PGRP-LC1基因的某些可变剪切形式中也有发现。分别将两个斯氏按蚊PGRP-LC1基因在冈比亚按蚊细胞系L3-5和斯氏按蚊细胞系MSQ43中过量表达,通过双荧光素酶检测系统检测抗菌肽的表达情况,结果显示克隆得到的PGRP-LC1基因在两种细胞系中均能够启动Imd信号通路,为进一步研究斯氏按蚊的Imd信号通路提供了依据。
- 陈杨凌尔军
- 关键词：按蚊斯氏按蚊疟疾肽聚糖识别蛋白克隆
- 利用不同染料复合染色判定家蚕血细胞的存活状况被引量：1
- 2011年
- 家蚕有5种血细胞,可以通过吖啶橙(acridine orange,AO)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色来区分。溴化噻唑蓝四氮唑[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]是一种广泛应用于细胞增殖和活细胞鉴定的染色剂。通过对家蚕血细胞进行复染,即先用MTT染色,再用AO和PI染色,发现以下2种情况:很多颗粒细胞、浆细胞和所有的原血球细胞不能被MTT染色,但AO染色显示为活的细胞;被MTT染色的细胞表面有紫色纤维状物伸出,除了一部分具有伪足的颗粒细胞外,所有被MTT染色的血细胞也被PI染色,细胞核是红色。因此,利用这3种染料对家蚕血细胞复合染色来判断细胞的存活与死亡,需要仔细分析并分别对待。
- 李旭全杨兵路岸瑞刘朝良凌尔军
- 关键词：家蚕血细胞染色剂吖啶橙碘化丙啶
