南京市医学科技发展项目(ZKM05043)
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
- 相关作者：陈军浩吴超刘勇顾光煜张葵更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院镇江市疾病预防控制中心江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CpG-ODN2216刺激健康人外周血淋巴细胞T_H1/T_H2细胞因子的表达被引量：4
- 2007年
- 目的观察CpG-ODN2216对健康人外周血单个核细胞(PBMC)中TH1/TH2淋巴细胞的极化作用,以及培养上清液中TH1/TH2型细胞因子的水平。方法取健康献血员外周血用淋巴细胞分离液分离PBMC,与CpG-ODN2216共培养24h,流式细胞仪检测PBMC中TH1/TH2淋巴细胞的改变,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的释放水平。结果CpG-ODN2216能刺激淋巴细胞向TH1、Tc1转化,对TH2无明显的刺激作用。培养上清液中IFN-γ的表达水平显著增高(P<0.01),IL-2、IL-4和IL-10无明显改变(P>0.05)。结论CpG-ODN2216可以促进外周血淋巴细胞向TH1、Tc1极化,并诱导PBMC产生高水平的TH1型细胞因子IFN-γ,介导TH1型免疫应答。
- 陈军浩吴超欧阳建刘勇顾光煜
- 关键词：CPG-ODNTH1/TH2
- 流式细胞术检测慢性乙型肝炎患者外周血Th17和T_C17细胞被引量：4
- 2009年
- 目的建立流式细胞术检测外周血中Th17、TC17细胞的方法,并探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血Th17细胞、TC17细胞变化的的意义。方法用三色流式细胞术检测了24例CHB患者和15例健康对照者外周血中Th17细胞和TC17细胞。结果用流式细胞仪结合不同荧光素标记的CD3、CD8和IL-17A单克隆抗体可准确检测外周血中Th17、TC17细胞的数量。对照组中Th17、TC17的检测结果分别为(2.13±0.50)%(1.6%～3.3%)和(0.27±0.13)%(0.2%～0.6%);CHB患者组中分别为(5.58±4.52)%(1.6%～19.0%)和(1.05±0.93)%(0.2%～3.1%)。CHB患者外周血中Th17、TC17细胞显著高于对照组(P=0.007、P=0.004)。结论流式细胞术检测外周血Th17、TC17细胞方法可靠;CHB患者外周血中Th17细胞、TC17细胞与对照组比较显著增高。
- 陈军浩赵轶伦顾光煜张葵吴超
- 关键词：慢性乙型肝炎TH17细胞流式细胞术
- 系统性红斑狼疮患者外周血天然调节性T细胞检测及临床意义被引量：3
- 2008年
- 目的探讨流式细胞术检测CD4+CD25+叉头状转录因子(Foxp3)+天然调节性T细胞的方法及其在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中改变的意义。方法建立三色流式细胞术检测天然调节性T细胞的方法,并检测了15例SLE患者和15名健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例以及CD4+细胞中CD25的表达水平。结果SLE患者外周血中天然调节性T细胞为(1.03±0.42)%,显著低于健康对照组的(5.88±1.40)%(P<0.01);CD4+淋巴细胞中CD25+细胞的表达水平[(5.92±3.80)%]也显著低于健康对照组[(32.01±5.70)%,P<0.01]。结论三色流式细胞术适合检测外周血中天然调节性T细胞,SLE患者存在天然调节性T细胞免疫缺陷。
- 尤海燕陈军浩巢秀琴
- 关键词：调节性T细胞流式细胞术系统性红斑狼疮
- 活化B淋巴细胞诱导健康人外周血HBcAg短肽特异性细胞毒性T淋巴细胞
- 2009年
- 目的探讨负载乙型肝炎病毒核心抗原18-27(HBcAg 18-27)序列肽的活化B淋巴细胞诱导自体外周血单个核细胞(PBMC)产生HBcAg 18-27特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的能力。方法免疫磁珠法分选B淋巴细胞,与CpG寡核苷酸(CpG-ODN)(2μg/mL)和白细胞介素-4(IL-4)(2 ng/mL)共培养48 h,再加入人工合成的HBcAg 18-27肽(50μg/mL),继续温育12 h。将负载抗原肽的活化B淋巴细胞与自体PBMC进行混合淋巴细胞培养5 d,采用Pro5TMMHC Pentam ers技术检测HBcAg 18-27特异性CTL。结果免疫磁珠法分选B淋巴细胞纯度为89.60%。荧光显微镜观察到HBcAg 18-27抗原肽进入活化B细胞,流式细胞仪定量检测抗原负载率为41.3%。以此作为HBcAg 18-27特异性抗原递呈细胞(APC)能够从自体PBMC中诱导出HBcAg 18-27特异性CTL。对照组(不加APC)HBcAg 18-27特异性CTL为(0.20±0.10)%,实验组(加APC)为(0.50±0.19)%,2组差异有统计学意义(P<0.01)。结论负载了HBcAg 18-27肽的活化B淋巴细胞能够诱导自体PBMC产生HBcAg 18-27特异性CTL。
- 陈军浩吴超刘勇张葵
- 关键词：CPG寡核苷酸B淋巴细胞乙型肝炎病毒核心抗原
- 重组人IL-21对人外周血淋巴细胞的活化作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察重组人白细胞介素21(IL-21)对健康人外周血淋巴细胞的活化作用,检测IL-21对外周血B细胞表面抗原提呈相关分子的表达及对淋巴细胞亚群的影响。方法重组人IL-21与健康人外周血单个核细胞(PBMC)共培养48h,用流式细胞技术检测T、B淋巴细胞表面CD69的表达,并与未加IL-21组进行比较;同时用流式细胞术检测B细胞表面主要组织相容性复合体Ⅰ及Ⅱ类分子(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)、CD80及CD86的表达量。细胞培养96h后检测淋巴细胞亚群的变化。结果重组人IL-21能显著提高T、B淋巴细胞表面CD69的表达量,与未加IL-21组相比差异有统计学意义(P<0.05),但却不能提高B细胞表面MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD80及CD86的表达量。经IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及自然杀伤T细胞(NKT)细胞比例明显增加。结论重组人IL-21可以活化人的T、B淋巴细胞,同时IL-21刺激后人淋巴细胞亚群中自然杀伤细胞(NK)细胞及NKT细胞比例明显增加。
- 刘勇陈军浩吴超
- 关键词：淋巴细胞
