国家自然科学基金(31172338)
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- M蛋白G275A和P276A突变抑制新城疫病毒的出芽和毒力
- 前言新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)是一类重要的禽病病原,能够在全世界范围内引起养禽业的损失。M蛋白是六种编码蛋白中分子量最小但含量最丰富的蛋白。其分子量约为40kDa,编码364个氨...
- 许海旭段志强刘佳佳程欣朱杰刘晶晶胡顺林王晓泉刘秀梵
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- 华东地区2013-2015年H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传进化分析
- 前言1966年H9N2亚型禽流感病毒最早从火鸡体内被分离到,之后该亚型病毒广泛传播,1994年在我国鸡群中被首次发现并报道。H9N2亚型禽流感病毒具低致病性,易引起宿主的继发感染,降低鸡群产蛋量,严重威胁养禽业的健康发展...
- 刘东李娟顾敏刘秀梵
- 文献传递
- 新城疫病毒基因Ⅲ型强毒JS/7/05/Ch的拯救
- 2013年
- 新城疫病毒Ⅰ系苗Mukteswar株为中等毒力,野外分离株JS/7/05/Ch的基因组核苷酸与其具有高于99%的相似性,但其毒力却明显强于前者。为了给基因Ⅲ型NDV的遗传进化机制研究提供基础,本研究成功构建了JS/7/05/Ch株的反向遗传平台。首先根据GenBank上公布的基因Ⅲ型新城疫病毒JS/7/05/Ch株基因组全序列设计并合成8对引物,RT-PCR扩增目的片段后,分别依次亚克隆至pCR2.1载体中构建含有JS/7/05/Ch全长基因组cDNA的克隆质粒pJS/7/05/Ch,然后再通过特异性酶切位点将JS/7/05株全长基因组cDNA转移到TVT7R(0.0)转录载体中,成功构建出含JS/7/05/Ch株基因组全长cDNA的转录质粒pTVT/JS705。然后将该质粒与3个辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,转染60h后将该细胞及其上清接种鸡胚;血凝(HA)试验和RT-PCR结果表明JS/7/05/Ch株新城疫病毒被成功拯救。
- 宋庆庆朱杰丁平云段志强屠颉刘晓文刘秀梵
- 关键词:新城疫病毒反向遗传技术拯救