国家自然科学基金(30400183)
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海第二医科大学附属仁济医院更多>>
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- 药物因素对CYP3A基因的调控被引量：3
- 2008年
- 近年来对药物代谢酶CYP3A基因的遗传多态性的研究较多,作为参与药物氧化代谢的重要酶系,临床上约60%的药物由CYP3A代谢,许多经CYP3A代谢的底物同时又是它的诱导剂或抑制剂,因此阐明药物因素对CYP3A基因的调控对临床安全用药有非常重要的意义。
- 钟济华欧阳仁荣
- 关键词：CYP3A药物代谢酶药物
- 耐药调节剂对急性髓系白血病细胞株CYP3A5基因转录及蛋白表达影响
- 2007年
- 目的:探讨耐药调节剂对急性髓系白血病细胞株(急髓细胞株)细胞色素P450 3A亚家族多肽5(CYP3A5)转录及蛋白表达的影响及其与白血病耐药的关系。方法:采用RT-PCR和Western印迹法检测药物代谢酶CYP3A5转录和蛋白表达水平。结果:K562、U937细胞经环孢素作用24h后CYP3A5转录增强,维拉帕米则出现微弱的转录,作用48h后两者转录均减弱,与未加药细胞组相比差异有统计学意义(P<0.01);K562细胞经环孢素、维拉帕米作用24～48h后,蛋白表达均增加,与未加药细胞组相比差异有统计学意义(P<0.01);U937细胞蛋白表达与基因转录基本一致。结论:耐药调节剂可诱导急髓细胞株CYP3A5基因的转录和蛋白的表达。
- 钟济华陈芳源王海嵘王婷沈莉菁欧阳仁荣
- 关键词：CYP3A5基因药物代谢酶
- 伊马替尼对K562和K562/AO2细胞细胞色素P4503A亚家族多肽5基因转录、蛋白表达及活性的调控
- 2010年
- 目的:探讨伊马替尼(商品名:格列卫)对K562及其耐药细胞株K562/AO2细胞色素P4503A亚家族多肽5(CYP3A5)基因转录、蛋白表达及活性的调控。方法:采用实时聚合酶链反应(real-timePCR)、蛋白印迹(Westernblot)和高效液相色谱(HPLC)法检测CYP3A5基因转录、蛋白表达和活性水平。同时将CYP3A5重组质粒稳定转染有CYP3A5基础转录的K562细胞,噻唑蓝(MTT)法测定伊马替尼的半数抑制浓度(IC50)值,观察CYP3A5基因的过表达是否介导白血病细胞对伊马替尼敏感性的改变。结果:K562细胞经伊马替尼作用24h后CYP3A5mRNA转录增强,蛋白表达和活性均增加,与未加药细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01);K562/AO2细胞经伊马替尼作用24h后,CYP3A5基因转录、蛋白表达和活性未见改变,经伊马替尼作用36h后,CYP3A5基因转录增强、蛋白表达和活性均增加,与未加药细胞相比,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.01、P<0.05)。K562细胞稳定转染CYP3A5重组质粒后对伊马替尼表现出明显耐受(耐药倍数为1.318倍)。结论:伊马替尼可诱导K562及其耐药细胞株K562/AO2CYP3A5基因转录、蛋白表达和活性的增高。
- 钟济华陈芳源王海嵘王婷沈莉菁蒋爽欧阳仁荣
- 关键词：伊马替尼CYP3A5基因药物代谢酶
- CYP3A5基因反义寡核苷酸转染K562/A02细胞逆转耐药的研究
- 2004年
- 目的:探讨针对细胞色素P4503A亚家族多肽5(CYP3A5)耐药机制进行反义寡核苷酸逆转耐药。方法:CYP3A5基因反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后,RT鄄PCR方法检测反义寡核苷酸对CYP3A5基因转录的特异性阻断,MTT法测定不同处理组柔红霉素IC50值。结果:针对CYP3A5基因的反义寡核苷酸转染K562/A02细胞48h后明显抑制CYP3A5基因的转录,而正义、错义寡核苷酸处理组则无明显改变。转染针对CYP3A5基因的反义寡核苷酸,可使柔红霉素对K562/A02细胞的IC50值由(7.728±3.625)mg/L降至(2.494±1.674)mg/L,增敏3.10倍,差异有显著性(P<0.05),而正义、错义寡核苷酸处理组IC50值与对照组相比则无明显差异。结论:针对CYP3A5基因的反义寡核苷酸可显著逆转K562/A02细胞的耐药性。
- 王婷陈芳源钟华黄洪辉钟济华欧阳仁荣
- 关键词：CYP3A5基因反义寡核苷酸K562/A02细胞耐药机制
- HPLC检测白血病细胞系CYP3A5活性方法的建立与应用被引量：1
- 2005年
- 目的建立白血病(AL)细胞系CYP3A5活性检测方法,研究化疗药对其活性的调控。方法HPLC法检测药物干预后AL细胞系CYP3A5活性。结果以1×106细胞、氢化考的松终浓度100μmol/L、孵育24h为AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性检测的孵育条件。K562细胞CYP3A5活性显著高于HL-60、NB4和Jurkat细胞。柔红霉素作用24h后K562细胞CYP3A5活性增高,48h后活性显著增高;而NB4与Jurkat细胞在其作用后活性无改变。地塞米松作用24h后Jurkat细胞CYP3A5活性显著增高,48h后活性又显著增高。全反式维甲酸作用24h后NB4细胞CYP3A5活性显著增高,72h后活性又显著增高。结论HPLC检测AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性方法的建立可用于研究AL细胞CYP3A5活性。柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些AL细胞株CYP3A5活性。
- 王婷陈芳源韩洁英钟济华滕晔欧阳仁荣
- 关键词：CYP3A5HPLC检测白血病细胞系体外培养条件NB4细胞活性增高
- CYP3A5基因转染HL-60细胞介导耐药表型的研究被引量：4
- 2005年
- 目的探讨CYP3A5基因与白血病细胞多药耐药的关系。方法克隆CYP3A5基因全长cDNA,构建CYP3A5基因真核表达重组质粒,稳定转染HL60白血病细胞。采用四氮唑蓝法(MTT)测定化疗药的半数抑制量IC50值,采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期及凋亡细胞百分比。结果空载质粒pcDNA3、重组质粒pcDNA3CYP3A5稳定转染HL60细胞。柔红霉素诱导后,HL60和HL60/pc细胞出现明显的凋亡峰,凋亡细胞比例分别为7.3%和6.3%;而HL60/CYP3A5细胞则无明显凋亡峰,凋亡细胞比例为1.2%。HL60/CYP3A5细胞与HL60、HL60/pc细胞相比,显著耐受柔红霉素、阿克拉霉素、长春新碱和三尖杉酯碱,耐药倍数分别为2.89,2.01,4.05和2.79倍(P<0.05);而对鬼臼噻吩甙则无明显耐受,耐药倍数为1.04倍。结论CYP3A5基因的转录直接导致白血病细胞对蒽环类抗生素及生物碱类药物耐药,而对表鬼臼毒素仍然敏感。
- 王婷陈芳源顾春红钟华滕晔欧阳仁荣
- 关键词：多药耐药基因转染HL-60白血病细胞CYP3A5耐药表型细胞介导白血病细胞多药耐药
- 遗传因素对白血病CYP3A5耐药机制的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:研究急性白血病(acute leukemia,AL)患者中,细胞色素P4503A亚家族多肽5(cytochrome P450,subfamilyⅢA,polypeptide 5,CYP3A5)多态性、酶活性对患者发病、疗效和预后的影响。方法:采用PCR-限制性片段长度多态性(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析法,检测AL患者骨髓原代细胞CYP3A5*3突变频率,并应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测AL患者骨髓原代细胞CYP3A5酶的活性。结果:88例样本中野生型纯合子(CYP3A5*1/*1)23例(26%),杂合子(CYP3A5*1/*3)44例(50%),突变型纯合子(CYP3A5*3/*3)21例(24%)。CYP3A5*3等位基因频率为74%,符合中国健康人群分布。按基因型分组后,3组的临床资料差异无统计学意义;3组的CYP3A5酶活性[以6β-羟基氢化可的松(6β-hydroxycortisol,6β-OHC)/氢化可的松(hydrocortisone,HC)值表示]检测结果分别为1.344±0.027、0.120±0.067和0.014±0.001;总生存率分别为(11.6±2.1)个月、(30.5±12.2)个月和(52.3±8.5)个月;无病生存期分别为(7.5±1.8)个月、(27.0±15.8)个月和(52.3±8.1)个月;差异均有统计学意义。结论:CYP3A5*3突变与AL发病无关,但可使CYP3A5酶活性显著降低或消失。含CYP3A5*1等位基因与耐药显著相关,从而影响患者的化疗疗效和预后。对初治AL患者进行CYP3A5基因分型和酶活性检测可以作为预测AL患者个体化治疗和预后的重要指标。
- 沈莉菁陈芳源钟济华王婷王海嵘徐岚韩洁英钟华欧阳仁荣
- 关键词：白血病
- 糖皮质激素受体在白血病CYP3A5耐药中的信号转导作用
- 2008年
- 目的探讨糖皮质激素受体在白血病CYP3A5耐药中的信号转导作用。方法采用DNA重组技术构建ptracer-hGR重组质粒,并用报告基因检测方法研究糖皮质激素受体对CYP3A5药物代谢酶转录、表达调控中的信号转导作用。结果菌落PCR及测序证实成功构建ptracer-hGR重组质粒。经阿糖胞苷、甲氨蝶呤和长春新碱三种化疗药物加药后共转染ptracer-hGR质粒的实验组荧光素酶相对活性显著高于单纯转染CYP3A5报告基因质粒的对照组,差异具有统计学意义(P=0.0362、0.0034和0.0164);而卡铂和米托蒽醌加药后,荧光素酶相对活性无明显增高趋势。结论阿糖胞苷、甲氨蝶呤和长春新碱三种化疗药物可能通过激活糖皮质激素受体这一信号途径而上调CYP3A5 mRNA的转录。
- 丁昭珩王婷王海嵘钟济华沈莉菁赵劲秋陈芳源
- 关键词：CYP3A5基因糖皮质激素受体耐药质粒转染
- 细胞色素P450酶系3A亚家族中CYP3A5的研究进展被引量：9
- 2007年
- 细胞色素P450酶系（cytochrome P450 enzyme system,CYPs）是参与外源化合物解毒和内源化合物代谢的重要酶系,主要有CYP1、CYP2、CYP3三大家族。CYP3A5是CYP3A亚家族最主要的肝外分布形式,其在药物的相互作用中发挥至关重要的作用,并与肿瘤化疗耐药密切相关。对CYP3A5与耐药关系的研究,将为实施肿瘤个体化治疗提供理论基础,可能具一定的临床应用价值。本文从遗传、环境等多方面对目前的CYP3A5研究作一综述。
- 丁昭珩赵劲秋陈芳源
- 关键词：CYP3A5基因药物代谢酶耐药
