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氧化应激心肌细胞prohibitin表达与分布变化及其生物学意义被引量：7: 2007年; 目的：探讨prohibitin在氧化应激心肌细胞中的表达与分布变化的特点及其在心肌细胞损伤中的意义。方法：H2O2干预体外培养乳鼠心肌细胞，建立氧化应激心肌细胞损伤模型；采用生物化学法检测细胞培养液中LDH活性及MTT实验观察心肌细胞损伤程度；以Western印迹法检测氧化应激时prohibitin蛋白表达变化与分布变化；线粒体H^＋-ATPase合成活力实验检测线粒体氧化磷酸化功能；流式细胞术检测线粒体跨膜电位。结果：氧化应激组LDH活性显著高于对照组，而细胞存活率低于对照组34．51％～65．5％；线粒体H^＋-ATPase合成活力降低60％；氧化应激组线粒体跨膜电位显著低于对照组；心肌细胞prohibitin表达水平在H2O2，处理3h出现升高然后回落到正常水平，线粒体prohibitin表达水平高于对照组。结论：氧化应激心肌细胞prohibitin表达水平代偿性增加并有向线粒体移位的趋势，氧化应激导致心肌细胞线粒体功能障碍。; 任哲钱令嘉杨志华; 关键词：PROHIBITIN 氧化应激线粒体心肌损伤

人热休克因子1对抗增殖蛋白基因启动子转录调控的研究被引量：2: 2009年; 目的:研究人热休克因子1(hHSF1)对抗增殖蛋白(prohibitin)启动子转录活性的影响。方法:采用PCR方法扩增hHSF1全长编码序列,构建pcDNA3.1(+)-hHSF1真核表达载体,将pcDNA3.1(+)-hHSF1和人prohibitin基因启动子表达载体pGL3-prohibitin共同转染HEK293细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统,检测双荧光素酶活性,分析hHSF1对抗增殖蛋白基因启动子的转录调控作用。结果:成功构建pcDNA3.1(+)-hHSF1真核表达载体,荧光素酶活性测定发现hHSF1明显上调pGL3-prohibitin转录。结论:hHSF1对prohibitin具有转录调控作用。; 刘晓华郭东升王新兴张志清战锐王晓明钱令嘉; 关键词：PROHIBITIN 转录调控

Prohibitin特异性MiRRNAi表达载体构建及其干扰效果测定被引量：1: 2009年; 目的:构建携带prohibitin(PHB-1)基因的MiR RNAi真核表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR,并观察其转染HEK293细胞株前后PHB-1的表达变化。方法:根据GenBank中prohibitin的序列,设计特异的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,克隆至pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFP-MiR质粒缺口末端,连接在质粒上生成含MiR RNAi pcDNA^(TM) 6.2-GW/EmGFP-MiR-PHB载体,测序鉴定后,用脂质体将重组子转染至HEK293细胞中,用Western blotting检测干扰后HEK293细胞内PHB-1表达的变化。结果:将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功。Western blotting检测结果证实构建的PHB-1 MiR RNA表达重组体可显著抑制HEK293细胞内PHB-1的表达。结论:成功构建了携带PHB-1基因的MiR RNAi真核表达载体。; 郭东升王新兴刘晓华战锐袁聚祥钱令嘉; 关键词：PROHIBITIN HEK293细胞 RNA干扰

Prohibitin——肿瘤与代谢性疾病治疗的新靶标被引量：5: 2007年; Prohibitin(PHB)是一种高度保守、分布广泛的蛋白质。PHB不仅是一类新型的分子伴侣蛋白,而且参与调节细胞周期、维持线粒体结构和功能,具有抗细胞凋亡、衰老和增殖的作用。PHB的多种功能和不同定位,以及在多种疾病中存在表达差异的现象提示,PHB可能参与疾病的发生与发展过程。因此,PHB在多种疾病如:肿瘤、糖尿病和肥胖等的治疗方面将会成为有用的药物靶标。; 郭东升钱令嘉袁聚祥; 关键词：PROHIBITIN 肿瘤代谢性疾病

贴壁细胞在载玻片爬片的新方法被引量：16: 2009年; 目的:对传统细胞爬片方法进行改良。方法:利用1ml蓝枪头和载玻片制作,在载玻片上种植细胞制成细胞爬片,进行后续染色。结果:细胞直接爬于载玻片上,未发现细胞污染和增殖受限。与传统爬片相比细胞脱落少。结论:与传统爬片染色方法相比具有用材简单、价格低廉、爬片效果好、操作方便等优点。; 徐洪宋旭东李莹代健; 关键词：细胞培养

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