海南省自然科学基金(310094)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：唐朝荣蓝基贤戚继艳方永军龙翔宇更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 一种启动子克隆的改良Adaptor-PCR方法及在橡胶树上的应用实例被引量：4
- 2012年
- 真核生物通过顺式作用元件和反式作用因子相互作用实现基因的转录调控,而启动子区域含有多种顺式元件,作为基因表达调控网络的枢纽控制着基因转录的起始与效率,一直是基因表达调控研究的重点[1]。本文提供了一种改良的基于Adaptor-PCR启动子克隆方法,改进了接头序列,设计了适合两步法PCR的接头引物。选取了25种限制性内切酶对橡胶树基因组DNA进行酶切,在所有酶切产物都平端化后,与改进的接头连接,成功构建了以Adaptor-PCR为基础的橡胶树基因启动子克隆文库,并利用此文库成功克隆了橡胶树6个蔗糖转运蛋白基因、1个转化酶基因和1个海藻糖合酶基因的启动子。本文研究结果为橡胶树基因启动子克隆提供了一个高效平台,也为其他生物基因启动子克隆提供了有益的参考。
- 辛鲁生阳江华唐朝荣
- 关键词：橡胶树启动子克隆
- 高等植物中转化酶生理生化特性的研究进展被引量：7
- 2012年
- 在高等植物中,转化酶是决定植物体内碳水化合物库组织分配的关键基因家族,在作物经济产量形成与果实品质改良中发挥重要作用。笔者综述了高等植物转化酶的种类、结构特征、代谢途径、生化特性、生理功能的研究现状,着重讨论不同类型转化酶生理生化特性与生理功能的差别。同时,简要介绍了笔者实验室在橡胶树胶乳转化酶基因克隆、表达调控、分离纯化和酶学特性研究上的最新进展。
- 蓝基贤唐朝荣
- 关键词：高等植物转化酶生化特性生理功能橡胶树胶乳
- 橡胶树叶片转化酶提取方法的比较被引量：1
- 2012年
- 比较液氮研磨样品与蛋白抽提液研磨样品对6种提取橡胶树叶片转化酶方法的效果。结果表明:液氮研磨法对转化酶活性影响很大,特别是中性/碱性转化酶和细胞壁结合的酸性转化酶已基本失活,而可溶性酸性转化酶活性丧失也比较严重。利用蛋白抽提液研磨样品,用Hepes-NaOH法提取的可溶性转化酶的酶活性最高,达472.44μmol(glucose)/[g(FW).h];虽然磷酸-柠檬酸法获得的粗酶液的蛋白含量较低,但其酶活性高达441.61μmol(glucose)/[g(FW).h];Tris-HCl法提取的细胞壁结合酸性转化酶的酶活性最高,达35.83μmol(glucose)/[g(FW).h]。从转化酶的比活力看,磷酸-柠檬酸法最佳,所提取的可溶性转化酶比活力约为Hepes-NaOH法的4倍。本研究结果为进一步完善橡胶树叶片转化酶的提取方法提供重要的指导意义。
- 蓝基贤何慧戚继艳唐朝荣
- 关键词：转化酶
- 巴西橡胶树中碱性转化酶HbNINa基因的克隆和表达模式分析被引量：4
- 2013年
- 检索橡胶树EST和基因组数据库,发现了1个在叶片中高丰度表达的中碱性转化酶基因。采用RT-PCR和RACE技术获得了该基因的cDNA和基因组序列,命名为HbNINa。序列分析结果显示,HbNINa基因cDNA序列的编码区(CDS)序列长度为1 719 bp,对应的基因组序列为3 696 bp。序列分析表明,该基因编码571个氨基酸多肽,推测其分子量大小为65.7 ku,等电点为6.36。HbNINa蛋白包含植物中碱性转化酶的全部保守结构域。基因组结构分析显示HbNINa基因包含4个外显子和3个内含子。QPCR分析结果表明,HbNINa基因在在胶乳中表达水平极低,而在其他组织如树皮、树叶和雌花中的表达丰度相对较高。在叶片发育过程中,HbNINa在叶片发育的初期高丰度表达,推测HbNINa可能参与叶片蔗糖利用,进而在橡胶树叶片发育过程中起重要作用。
- 肖小虎戚继艳方永军曹冰龙翔宇唐朝荣
- 关键词：巴西橡胶树基因结构叶片发育
