国家自然科学基金(30400169)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
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- Kruppel样因子4对内毒素所致IL-6基因表达的调控及机制研究被引量：10
- 2009年
- 探讨Kruppel样因子4(KLF4)对内毒素所致白介素(IL-6)的基因表达以及释放的影响,并对其调控机制做了初步研究.使用RT-PCR和Westernblot检测KLF4mRNA和蛋白质的表达.采用KLF4过表达的RAW264.7巨噬细胞株或反义寡核苷酸技术抑制内源性KLF4的表达,用RT-PCR和ELISA检测内毒素(LPS)刺激后IL-6mRNA和蛋白质的表达.采用荧光素酶报告基因检测RAW264.7细胞中KLF4过表达对IL-6基因启动子报告基因转录活性的影响.使用EMSA法检测细胞中KLF4与IL-6基因启动子区KLF4元件的结合.结果表明:LPS可以诱导RAW264.7巨噬细胞KLF4的表达以及IL-6蛋白表达.KLF4过表达明显抑制IL-6的mRNA和蛋白质的表达,而KLF4缺失使这种作用消失.荧光素酶报告基因的结果显示,KLF4可以抑制LPS所致的IL-6基因启动子的转录活性.EMSA显示KLF4不能与IL-6启动子区的KLF4结合元件直接结合.结果表明,LPS可以促进RAW264.7小鼠巨噬细胞KLF4的表达和IL-6的释放.KLF4能抑制LPS诱导的IL-6表达和释放,其机制是抑制IL-6启动子的转录活性,但KLF4的抑制作用不是通过直接与IL-6基因的启动子区相结合而实现的.
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- 氧化应激对C_2C_(12)肌原细胞中KLF4表达的影响
- 2009年
- 目的:观察心肌细胞氧化应激反应对KLF4表达的影响。方法:采用过氧化氢处理的小鼠C2C12肌原细胞模拟相应的氧化应激细胞模型;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测C2C12肌原细胞中KLF4 mRNA的表达情况;采用蛋白免疫印迹技术(Western blot)检测KLF4蛋白的表达情况。结果:不同浓度H2O2处理C2C12肌原细胞12 h后,KLF4 mRNA和蛋白的表达水平均明显增多,呈剂量依赖性;1mMH2O2处理肌原细胞不同时间后KLF4 mRNA和蛋白的表达水平均明显增加,具有时间依赖性。结论:细胞氧化应激反应能显著诱导C2C12肌原细胞中KLF4的高表达。
- 张丽丽刘瑛
- 关键词：氧化应激KLF4
