国家自然科学基金(31000075)
- 作品数：4 被引量：9H指数：3
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- 酪酸梭菌通过调节长链非编码RNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480的凋亡被引量：3
- 2015年
- 目的人结肠癌细胞SW480与酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)共培养后,检测SW480细胞lncRNAs和mRNAs的应答变化及诱导凋亡的机制。方法 1.5×107CFU/m L酪酸梭菌处理结肠癌细胞48 h后,提取总RNA,对其逆转录RNA并作荧光标记,与安捷伦人lncRNAs/mRNAs芯片杂交。生物信息学预测表达差异的lncRNAs靶基因,并利用DAVID6.7对其进行信号通路富集度分析。双苯并咪唑Hoechst 33258(bisbenzimlde)和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。结果与SW480对照组相比,共培养酪酸梭菌的结肠癌细胞SW480中的lncRNAs有50个表达上调和152个表达下调的基因,mRNAs中有738个表达上调和1 088个表达下调的基因。对差异表达的基因进行信号通路富集度分析,显示参与肿瘤相关的信号传导途径有MAPK信号通路、细胞因子-细胞因子、JAK-STAT信号、NF-κB的激活、VEGF信号通路和p53信号通路。酪酸梭菌能显著促进结肠癌细胞凋亡。结论酪酸梭菌通过调节lncRNAs的表达变化促进结肠癌细胞SW480凋亡。
- 杨晓容张德纯杨金梅李世超刘胜男郭亚楠
- 关键词：酪酸梭菌结肠癌SW480细胞长链非编码RNA
- 多药耐药纹带棒杆菌的重复序列PCR分型与耐药机制的研究被引量：3
- 2015年
- 目的对引起医院感染暴发的多药耐药纹带棒杆菌(MDRCs)进行重复序列PCR研究,为MDRCs的亲缘性分析提供可靠的方法,并对MDRCs的耐药机制进行初步研究。方法用基因外重复回文序列-PCR(REPPCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)技术对临床分离的32株MDRCs进行分型研究,根据细菌的耐药表型选择对应的耐药基因进行检测。结果 REP-PCR和改良ERIC-PCR分型技术分别将32株MDRCs分为6型和8型,两种方法的分辨指数分别为0.585和0.696;所有菌株中与大环内酯类抗菌药物相关的核糖体甲基化酶基因(ermX)检出率为90.6%,与四环素耐药相关的核糖体保护蛋白基因(tetW)的检出率为100.0%,菌株耐药基因的检出与耐药表型完全相符。结论重复序列PCR(rep-PCR)分型方法可用于纹带棒杆菌的分型研究及医院感染MDRCs的亲缘性分析,ERIC-PCR的分辨能力优于REP-PCR;中国重庆地区的MDRCs分别介导ermX和tet(W)基因对大环内酯类和四环素类抗菌药物高水平耐药。
- 李科张德纯张名均杨金梅杨小容刘胜男李世超
- 关键词：多药耐药
- 钙化胎盘及脐带血中纳米细菌的形态学观察被引量：3
- 2013年
- 目的研究纳米细菌(nanobacteria,NB)的分布,寻求检测胎盘钙化NB感染的更好组织来源。方法收集孕妇胎盘钙化组织和脐带血20例,并以20例正常胎盘组织作对照,分离培养NB;用革兰染色和茜素红染色法、扫描电镜和透射电镜进行形态学鉴定。结果培养沉淀物符合NB的特性。脐带血NB分离率为80%(16/20),钙化胎盘组织为65%(13/20),均明显高于正常胎盘组织的10%(2/20),χ2分别为12.07、9.09,P均<0.01;脐带血与钙化胎盘组织比较,差异无统计学意义(χ2=1.33,P>0.05)。油镜下脐带血和钙化胎盘组织分离的NB为球状或球杆状,形态相似;茜素红染色脐带血中NB较多且聚集成簇;透射电镜和扫描电镜下NB呈球形,大小为80～500 nm,并可见毛刺结构。结论胎盘钙化与NB感染有关,脐带血适用于检测钙化胎盘的NB感染。
- 刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容杨顺杰
- 关键词：纳米细菌胎盘钙化脐带血
- 纳米细菌促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡
- 2013年
- 目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24、48、72 h,通过CCK-8检测其对细胞的毒性作用;培养12、24、48、72 h,取上清,经全自动生化分析仪测定LDH活性;作用72 h,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定其凋亡率,透射电镜观察其超微结构的变化情况。结果 CCK-8显示,NB组24、48、72 h对细胞的抑制作用均强于nHAP组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NB组LDH含量在24、48、72 h时均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);24、48、72 h均高于nHA组,但仅24、48 h有统计学差异(P<0.05)。nHAP组LDH活性仅在72 h与正常对照组比较有统计学差异(P<0.01);72 h后NB组细胞凋亡率高于nHAP组,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜下观察,NB组可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,nHAP组未见明显异常。结论 NB可以抑制乳腺癌细胞的生长,促进其发生凋亡,其导致细胞凋亡的成分不仅仅是NB羟基磷灰石的外壳,也可能与NB的其他组分或代谢产物有关。
- 刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容许舸
- 关键词：纳米细菌纳米羟基磷灰石凋亡乳腺癌
