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国家自然科学基金(30171026)

作品数：11 被引量：41H指数：3
相关作者：张建业陈蔚文张莲英张鹏举胡晓燕更多>>
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文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 5篇生物学

主题

  • 7篇前列腺
  • 5篇前列腺癌
  • 5篇前列腺肿瘤
  • 5篇肿瘤
  • 5篇细胞
  • 5篇腺癌
  • 5篇腺肿瘤
  • 5篇基因
  • 4篇前列腺癌细胞
  • 4篇腺癌细胞
  • 4篇癌细胞
  • 2篇凋亡
  • 2篇雄激素
  • 2篇受体
  • 2篇特异
  • 2篇启动区
  • 2篇启动子
  • 2篇转染
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇抗原

机构

  • 10篇山东大学

作者

  • 10篇张建业
  • 9篇陈蔚文
  • 7篇张鹏举
  • 7篇张莲英
  • 5篇胡晓燕
  • 5篇姜安丽
  • 4篇贺美兰
  • 4篇孔峰
  • 3篇郭强
  • 2篇崔福爱
  • 2篇贾立宁
  • 2篇杨磊
  • 1篇刘志芳
  • 1篇于雪艳
  • 1篇王廷杰

传媒

  • 7篇山东大学学报...
  • 1篇药学学报
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇中国生物化学...

年份

  • 1篇2006
  • 4篇2005
  • 4篇2004
  • 1篇2003
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
前列腺组织特异性表达载体pPSA-EGFP的构建被引量：2
2004年
目的:构建前列腺组织特异性表达载体。方法:利用基因重组技术将PSA基因上游5.8kb的调控序列克隆至真核表达载体pEGFP鄄1,构建前列腺组织特异性表达载体pPSA鄄EGFP;用脂质体Lipo鄄fectamine将载体pPSA鄄EGFP分别转染前列腺癌细胞株PC鄄3m、乳腺腺癌细胞株MCF鄄7、结肠腺癌细胞株HT鄄29、肝癌细胞株HepG2、宫颈癌细胞株HeLa和肺腺癌细胞株A549多种细胞,转染后48h荧光显微镜下观察GFP的表达情况,pPSA鄄EGFP和phAR共转染PC鄄3m细胞。结果:在pPSA鄄EGFP和phAR共转染的PC鄄3m细胞中绿色荧光蛋白表达明显,MCF鄄7细胞中绿色荧光蛋白表达微弱,其他细胞中荧光蛋白不表达。结论:构建的前列腺表达载体pPSA鄄EGFP具有组织特异性。
贾立宁张建业张莲英孔峰陈蔚文胡晓燕
关键词：EGFP前列腺组织特异性表达共转染PC-3M细胞组织特异性
前列腺癌细胞PC-3M对外源基因pPSA-P21表达的抑制作用被引量：2
2004年
目的:观察外源p21WAF-1/CIP1p21基因在前列腺癌细胞PC-3M中的表达及对细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建前列腺组织特异性表达载体pPSA-p21,用lipofectin转染PC-3M细胞,MTT法检测转染前后的细胞生长情况,转染后72h收集细胞进行Westernblotting检测P21蛋白的瞬时表达,并用流式细胞技术(FCM)分析细胞周期和检测细胞P53蛋白的表达。结果:转染后的细胞生长并未受到明显抑制,转染后72hWesternblotting未检测到P21蛋白,FCM分析显示PC-3M细胞多处于G0～G1期和S期,野生型P53和突变型P53蛋白均未见明显表达。结论:PC-3M细胞对外源p21的表达有抑制作用。
王廷杰张建业陈蔚文张莲英郭强张鹏举
关键词：前列腺肿瘤抗原P21基因
姜黄素对前列腺特异抗原基因表达的抑制被引量：8
2005年
目的研究姜黄素对前列腺特异抗原(PSA)表达的影响。方法化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCap后PSA含量,利用荧光素酶报告基因pGL3构建含PSA基因5′侧启动子区640bpDNA的荧光素酶表达载体pGL3PSA,并将其转染LNCap细胞,不同浓度姜黄素作用24h后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性。Westernblotting检测姜黄素处理过的LNCap细胞雄激素受体(AR)的表达。结果姜黄素抑制PSA、荧光素酶和AR受体的表达,并有浓度依赖性。结论姜黄素通过抑制雄激素受体的表达减弱对PSA基因启动子的作用,从而抑制PSA的表达。
杨磊张莲英陈蔚文孔峰张鹏举胡晓燕张建业崔福爱
关键词：姜黄素雄激素受体前列腺特异抗原前列腺癌
姜黄素对前列腺癌细胞LNCaP增殖的影响被引量：15
2006年
目的:姜黄素对前列腺癌细胞株LNCap增殖和凋亡的影响。方法:用不同剂量的姜黄素分别处理LNCap细胞,显微镜下观察细胞形态;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率;然后检测姜黄素处理LNCap细胞后培养液中总前列腺特异抗原(PSA)的变化,并用免疫印迹W estern b lotting技术检测雄激素受体(AR)的表达。结果:姜黄素能够抑制前列腺癌细胞LNCap的增殖和生长,40μmol/L作用24 h最强,细胞存活率为对照的40%;姜黄素诱导LNCap细胞凋亡,细胞形态呈凋亡特征,且40μmol/L作用最强,凋亡率为9.23%;姜黄素抑制LNCap细胞PSA表达,且40μmol/L姜黄素处理细胞24 h对PSA表达的抑制作用最强,PSA含量仅为对照的20%;W estern b lotting检测结果显示姜黄素抑制AR的表达,并且对AR表达的抑制程度依赖于姜黄素的浓度。结论:姜黄素抑制LNCap细胞增殖,诱导细胞凋亡,且表现出时间和剂量依赖性。姜黄素抑制LNCap细胞PSA与AR受体的表达。
杨磊张莲英陈蔚文胡晓燕张建业崔福爱
关键词：前列腺肿瘤姜黄素LNCAP细胞
maspin基因启动区的初步鉴定被引量：3
2005年
目的:研究maspin基因表达的调控机制。方法:利用PCR技术扩增maspin基因5'上游启动区860bp(-765～+95bp)不同的缺失片段,并将它们分别与荧光素酶(LUC)报告基因相连,构建了6种maspin-LUC报告基因表达质粒,通过转染实验检测maspin启动区不同长度片段在雄激素依赖性前列腺癌细胞(LNCaP)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3M)中驱动荧光素酶表达的活性。并转染雄激素表达受体(AR)到PC-3M细胞,观察雄激素及其受体对不同片段表达活性的作用。结果:maspin基因启动区(-312～247bp)之间含有与雄激素受体相关的负性调控元件,在(+14～95bp)之间含有一个功能性的中文(Sp1)调控元件。结论:maspin基因的表达受雄激素受体及Sp1的调节。
贺美兰姜安丽张鹏举陈蔚文刘志芳张建业
关键词：基因MASPIN核酸前列腺肿瘤
雄激素及其受体对maspin启动子的抑制作用被引量：1
2004年
目的:检测雄激素及其受体对maspin基因启动子的作用。方法:构建含maspin基因5侧启动子区846-759+87bpDNA的荧光素酶报告基因表达载体pGL3-mP,然后与雄激素受体表达载体hAR共转染雄激素非依赖型前列腺癌细胞株PC-3M,用或不用雄激素处理细胞,48h后应用双荧光素酶测定系统,检测荧光素酶的表达活性。结果:hAR可抑制maspin启动子的表达活性,其抑制作用是雄激素配体非依赖性的。结论:maspin启动子区可能含有与雄激素受体结合的负性调控元件。
贺美兰张建业张莲英姜安丽于雪艳张鹏举
关键词：受体雄激素雄激素类启动区
雄激素应答元件假冒DNA对PSA基因启动子的抑制作用被引量：2
2003年
研究雄激素应答元件假冒DNA(AREdecoy)对前列腺特异抗原 (PSA)基因启动子的抑制作用 .联合运用报告基因和假冒DNA策略 ,构建了含PSA基因 5′侧启动子区 6 40bpDNA的萤光素酶表达载体pGL3 PSA ,与人工合成的双链硫代ARE假冒DNA共转染前列腺癌细胞株PC3 M并作用不同的时间 (2 4h、4 8h、72h) .应用双萤光素酶测定系统 ,检测萤光素酶的表达活性 .结果显示 :AREdecoyDNA显著抑制报告基因萤光素酶的表达 ,抑制率可达 95 % ,而对照decoyDNA无此作用 .
张鹏举张建业陈蔚文姜安丽张莲英郭强
关键词：启动子转录因子报告基因
野生型p53基因转染前列腺癌细胞系PC-3m对细胞凋亡的不同影响被引量：2
2004年
目的:观察野生型p53基因转染对前列腺癌细胞PC鄄3m增殖和凋亡的影响。方法:用脂质体Lipofectamine将真核表达载体pCMV鄄p53和pCMV鄄p53mt135分别转染PC鄄3m细胞,MTT法检测转染前后细胞生长情况,转染48h后采用流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率。结果:pCMV鄄p53转染后的PC鄄3m细胞生长明显受到抑制,FCM显示,转染48h后,细胞凋亡率为15%。结论:野生型p53基因瞬间转染PC鄄3m细胞可抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。
贾立宁张莲英张建业孔峰胡晓燕陈蔚文
关键词：基因P53前列腺肿瘤细胞凋亡
NKX3.1基因上游一个30bp负调控区结合蛋白的初步鉴定被引量：1
2005年
目的:鉴定NKX3.1基因上游30bp负调控区的结合蛋白。方法:人工合成30bp负调控序列,用末端转移酶对其进行地高辛标记;提取细胞核蛋白,采用电泳迁移率变动分析(EMSA)方法,检测细胞核提取液中与30bp负调控序列特异结合的核蛋白。结果:在LNCaP细胞及其他不同肿瘤细胞系核提取液中,检测到与30bp负调控序列特异结合的核蛋白,但在不同的细胞系中有不同种类的结合蛋白。结论:NKX3.1基因上游的30bp负调控机制在不同的细胞中普遍存在,不同的细胞核中有不同的结合蛋白,可能涉及不同的调控机理。
姜安丽张鹏举胡晓燕贺美兰陈蔚文孔峰张建业
关键词：DNA结合蛋白负调控同源盒基因
雄激素应答元件陷阱DNA诱导前列腺癌细胞LNCaP凋亡
2005年
目的:研究雄激素应答元件陷阱DNA(AREdecoyDNA)对前列腺癌细胞LNCaP生长活性和凋亡的影响。方法:人工合成双链硫代AREdecoyDNA并提取LNCaP细胞核蛋白,应用电泳迁移率变动分析(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)检测AREdecoyDNA与雄激素受体的特异结合。2μg/mlAREdecoyDNA转染LNCaP细胞,48h后相差显微镜观察细胞超微结构变化;MTT比色法检测细胞生长活性;DNALadder检测细胞凋亡;流式细胞技术(FCM)测定细胞凋亡率。结果:EMSA显示,AREdecoyDNA能特异与核蛋白中雄激素受体结合。LNCaP细胞转染AREdecoyDNA后,镜下可见部分细胞出现凋亡形态学的改变,有凋亡小体形成,细胞体外生长受到抑制,DNALadder可见明显梯形条带。转染后48h的凋亡率为22.5%。结论:AREdecoyDNA能竞争结合雄激素受体(androgenreceptor,AR),阻断AR的作用而诱导LNCaP细胞凋亡。
张鹏举张建业姜安丽陈蔚文贺美兰郭强
关键词：前列腺肿瘤细胞凋亡
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