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天津市科技发展战略研究计划项目(05WFGPGX06900)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
高瀛岱
王金宏
熊冬生
刘娟妮
杨纯正
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相关机构:
中国医学科学院中国协和医科大学
中国医学科学院北京协和医学院
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发文基金:
天津市科技发展战略研究计划项目
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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中国医学科学...
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杨纯正
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药物生物技术
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中国免疫学杂...
年份
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2008
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抗CD3 ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体的高密度发酵与纯化
被引量:2
2008年
在发酵罐上采用高密度发酵的方法对抗CD3ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体工程菌进行了培养,其发酵结果是每升发酵液的湿菌菌重150g,OD550值达121;以免疫亲和层析的方法纯化抗CD3ScFv/抗PgPScFv双功能抗体,经计算抗体产量可达146.6mg/L;间接免疫荧光测定结果经流式细胞仪分析计算表明,抗CD3ScFv/抗PgP ScFv双功能抗体能与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合。
王金宏
刘娟妮
纪庆
高瀛岱
熊冬生
杨纯正
关键词:
抗CD3
高密度发酵
免疫亲和层析法纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体
被引量:1
2008年
目的:制备可以纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体的免疫亲和层析柱。方法:纯化的抗抗CD3ScFv单克隆抗体与预活化的Sepharose4B偶联制成免疫亲和层析柱,采用自制的免疫亲和层析柱纯化由摇瓶发酵获得的抗Pgp/抗CD3双功能抗体,采用间接免疫荧光法测定抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体能与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合活性。结果:成功地制备了可以纯化抗Pgp/抗CD3双功能抗体的免疫亲和层析柱,采用此柱纯化的抗体与Jurkat细胞及K562/A02细胞特异性结合的活性与带有E-tag纯化标志的抗体基本一致。结论:此介质可以替代价格高昂的E-tag亲和层析介质在纯化Pgp/抗CD3双特异双功能抗体中的应用,同时还可以避免由于E-tag纯化标志而带来的免疫原性问题,此项研究工作为抗Pgp/抗CD3双功能抗体将来在临床应用奠定了基础。
王金宏
刘娟妮
高瀛岱
邵晓枫
熊冬生
杨纯正
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