国家自然科学基金(30970313)
- 作品数：23 被引量：45H指数：5
- 相关作者：田喜凤余源王洋陈阳沈海娥更多>>
- 相关机构：河北联合大学唐山职业技术学院华北煤炭医学院更多>>
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- 蓝氏贾第鞭毛虫滋养体染色体扫描电镜观察被引量：1
- 2010年
- 目的电镜观察蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体数目及形态。方法用改良TYI-S-33培养基培养贾第虫滋养体。制备分散度较好的染色体玻片标本,对玻片标本进行扫描电镜常规处理,扫描电镜观察。结果在扫描电镜下观察到了蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体,染色体数目为2n=10条,1号染色体为亚中央着丝粒染色体,2号、3号、4号、5号为端着丝粒染色体。结论通过电镜观察认为蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的染色体核型公式为2n=10=2sm+8t。
- 沈海娥李冀路瑶张文丽任兴波布仁满都呼田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫滋养体染色体扫描电镜
- 蓝氏贾第鞭毛虫的免疫逃避机制被引量：4
- 2013年
- 蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)是一种世界性分布的机会性致病原虫,能够引起以腹泻为主要表现的贾第虫病,严重影响人类尤其是儿童的健康和发育。在贾第虫感染过程中,宿主的非特异性和特异性免疫系统均会产生强烈的抗贾第虫效应,但贾第虫通过抗原漂变、L-精氨酸饥饿等机制逃避和抑制宿主的免疫反应,引起宿主的长期或反复感染。本文对宿主的抗贾第虫免疫以及贾第虫的免疫逃避机制做一综述。
- 王洋田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫免疫逃避
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫SUMO基因的克隆、原核表达和生物信息学分析(英文)被引量：1
- 2013年
- 目的克隆、原核表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的小泛素相关修饰物(small ubiquitn-related modifier,SUMO)蛋白,并对其序列进行生物信息学分析。方法提取C2株贾第虫基因组DNA,以基因组DNA为模板PCR获得SUMO基因片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),经测序验证并进行生物信息学分析,将重组质粒pET-28a(+)-SUMO转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了C2株贾第虫SUMO基因原核表达载体pET-28a(+)-SUMO,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDSPAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约12.7kD的位置出现目的蛋白条带,与理论值相符;生物信息学分析显示C2株贾第虫SUMO序列与WB株相同,其蛋白形成类似"泛素折叠"样结构,进化分析表明贾第虫SUMO蛋白与其它现存真核生物亲缘关系较远。结论成功地克隆、表达了贾第虫SUMO蛋白,明确了该蛋白的空间结构和进化地位,为贾第虫SUMO蛋白抗体的制备及相关蛋白功能的研究提供了基础。
- 王洋王沂李冀李思瑾楚晗田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫生物信息学
- 比较基因组学在蓝氏贾第鞭毛虫进化研究中的应用新进展
- 2014年
- 蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)作为一种古老的真核生物,在生物进化过程中的地位举足轻重。比较基因组学能够在基因组水平上深入认识贾第虫的进化关系,进一步明确贾第虫在生物进化中的地位。本文对比较基因组学的主要研究方法进行综述,同时介绍比较基因组学在贾第虫生物进化研究中的应用,对贾第虫比较基因组学的发展进行展望。
- 余源王洋陈阳刘阿倩林志强高雪田喜凤
- 关键词：比较基因组学蓝氏贾第鞭毛虫进化地位
- 双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Centrin基因mRNA表达水平的影响被引量：1
- 2014年
- 目的分析双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对体外C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)中心体蛋白(Centrin)基因mRNA表达水平的影响,探讨其对蓝氏贾第鞭毛虫的抑制作用。方法采用改良型TYI-S-33培养基培养C2株蓝氏贾第鞭毛虫,培养基内分别加入浓度为100μg/ml、200μg/ml的双氢青蒿素,以不含药物组作为阴性对照,分别培养2、4、8、12h后,收集各组虫体并提取总RNA,以此为模板,反转录合成cDNA,采用实时荧光定量RTPCR检测药物作用后Centrin基因mRNA表达水平的相对变化量。结果实时荧光定量RT-PCR检测显示,经双氢青蒿素作用虫体后Centrin基因mRNA表达水平显著降低,培养2、4、8、12h后100μg/ml药物组Centrin基因mRNA相对表达量分别为0.46、0.43、0.35和0.27,200μg/ml药物组分别为0.42、0.38、0.29和0.25。结论双氢青蒿素对C2株蓝氏贾第鞭毛虫Centrin基因mRNA的表达具有明显的抑制作用,且抑制作用随着药物浓度的增高和作用时间的延长而增强,提示双氢青蒿素对蓝氏贾第鞭毛虫具有明显的损伤作用,可供蓝氏贾第鞭毛虫病防治参考。
- 余源王洋陈阳赵丽娜贺宝玲张亚粉田喜凤
- 关键词：实时荧光定量RT-PCR双氢青蒿素中心体蛋白
- 蓝氏贾第鞭毛虫的蛋白质组学研究进展被引量：6
- 2010年
- 蛋白质组是指一个基因组或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。蛋白质组学研究细胞内所有蛋白质的组成及其活动规律,是在细胞整体水平上研究蛋白质的属性(表达水平、翻译后修饰和相互作用),它更能全面具体的反映研究对象的真实状态。近年来,蛋白质组学技术已广泛应用于寄生虫学的各个研究领域。蓝氏贾第鞭毛虫蛋白质组的研究,特别是对其生活史不同阶段蛋白质组的比较分析,不仅为进一步了解其生命活动规律的物质基础提供帮助,也为贾第虫病的致病机理及新药物靶点的探寻提供实验依据和解决途径。
- 田玉娜田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫蛋白质组学
- 体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的超微结构被引量：2
- 2014年
- 目的 :观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia.lamblia)滋养体的超微结构。方法 :用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,以透射电镜观察虫体的超微结构。结果 :虫体冠状面呈倒置的梨形、颜面状;质膜下可见单层排列、大小均匀的小囊泡;胞质内密布无包膜、电子致密的游离核糖体颗粒;内质网扁管状,散布在整个胞质内。两个椭圆形的泡状核位于虫体前部1/2处,核膜完整,边界清晰;其核质浅,密度均匀,核周染色质粒均匀分布在核膜内缘,电子密度高,呈颗粒状;核内各有1个细小、圆形致密的颗粒样核仁。在虫体横切面可见两个椭圆形泡状核,核膜结构完整,边界清晰,核内各有一个圆形颗粒样的核仁。在虫体矢状面可见滋养体背面隆起,腹面凹陷。鞭毛横断面高倍放大观察:呈典型的9组二联微管结构,周围微管与鞭毛纵轴平行。经细胞核高倍放大观察可见:其核膜为典型的双层多孔性单位膜结构,核孔清晰,核质内有明显的圆形核仁。结论 :蓝氏贾第鞭毛虫滋养体具备精密、复杂的超微结构。
- 陈阳田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫滋养体透射电子显微镜超微结构
- 体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的超微结构观察
- 2014年
- 目的:观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia.lamblia)滋养体的超微结构。方法:用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,以透射电镜观察该虫体的超微结构。结果:该虫体冠状面的特点是:呈倒置的梨形,颜面状;在质膜下可见单层排列的小囊泡;其胞质内密布游离核糖体颗粒;其内质网呈扁管状,散布在整个胞质内。该虫体的两个细胞核呈椭圆形,泡状,位于虫体前部的1/2处,核膜完整,核内各有1个细小的核仁。该虫体的鞭毛自基体发出,中体位于虫体的中后部,鞭毛、基体、中体均为高电子密度的管状微管结构。该虫体横切面的特点是:有两个泡状核,核膜完整,呈典型的多孔性双层单位膜结构,核内可见圆形核仁。该虫体的吸盘由一层短阵列微管构成;其鞭毛由电子密度高的周围微管和中央微管组成,在高倍放大的电镜下可见9对与鞭毛纵轴平行的周围微管和2根中央单管,中央单管有辐射丝伸向周围微管。该虫体的尾部腹侧质膜下、尾鞭毛轴丝周围的短肋样funis微管在鞭毛周围形成一层鞘膜样包裹。结论:蓝氏贾第鞭毛虫滋养体具备精密、复杂的超微结构。
- 陈阳田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫滋养体透射电子显微镜超微结构
- C2株蓝氏贾第鞭毛虫组蛋白H3基因的克隆表达与基因分析(英文)
- 2014年
- 目的克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,与WB株蓝氏贾第鞭毛虫进行同源分析,构建C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树。方法 PCR扩增获取H3组蛋白基因,构建pGM-T-H3重组载体,转化E.coli TOP10感受态宿主细胞,挑选阳性克隆并进行序列分析,利用限制性内切酶NcoⅠ和XhoⅠ构建pET28a(+)-H3重组载体,转化E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导组蛋白H3表达,Western blotting鉴定表达,与美国WB株蓝氏贾第鞭毛虫及模式生物H3组蛋白基因和蛋白序列进行同源分析。结果成功克隆表达C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白基因,同源比对结果显示C2株蓝氏贾第鞭毛虫基因序列与美国WB株完全一致,但与其他现存真核生物亲缘关系较为疏远。结论 C2株蓝氏贾第鞭毛虫H3组蛋白分子进化树分析表明贾第虫H3组蛋白基因在进化过程中与其他物种分化较早,本研究结果为进一步研究蓝氏贾第鞭毛虫的生物进化地位提供有价值的实验资料。
- 余源葛爽李明刘阿倩林志强田喜凤
- 关键词：同源性分析分子进化树
- 蓝氏贾第鞭毛虫α-7．1、α-11贾第素的原核表达及抗原活性鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的原核表达蓝氏贾第鞭毛虫的α-7.1、α-11贾第素蛋白。方法经RT-PCR获得α-7.1、α-11贾第素基因片段,经双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),构建成为重组表达载体pET-28a(+)-α-7.1及pET-28a(+)-α-11,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)。IPTG诱导后,收集菌体,裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测。结果成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-α-7.1和pET-28a(+)-α-11,经IPTG诱导后,在大肠杆菌中高效表达,SDS-PAGE及Western blot分析显示,在相对分子量约43kD和35kD的位置分别出现目的蛋白条带,与理论值相符;通过相应α-7.1、α-11贾第素抗血清的Westernblot证实两种贾第素重组蛋白的抗原活性良好;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的重组的α-7.1、α-11贾第素融合蛋白。结论成功地克隆、表达并纯化了具有良好抗原活性的α-7.1、α-11贾第素蛋白。
- 王洋杨志宏王沂曹蕾余源陈阳王卫亮慈雅丽田喜凤
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫原核表达
