长春市科技局资助项目(09YJ47)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：吉林农业大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：长春市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 白喉毒素DAB_(389)-αMSH重组毒素的构建及表达被引量：2
- 2010年
- 利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和NcoI酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389-αMSH,转化菌经1 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组毒素。结果表明扩增的片段与理论值一致,重组质粒的DNA序列分析正确;SDS-PAGE表明重组毒素相对分子量为43.76 KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%。Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-αMSH的工程菌株,并获得表达蛋白。
- 李泽鸿刘文涛李昌昊张国利
- 关键词：重组毒素
