国家科技重大专项(2009ZX09103-646)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：生物学更多>>
- 单环刺螠纤溶酶Ⅱ的基因克隆被引量：3
- 2011年
- 单环刺螠纤溶酶(UFE)是由本实验室分离纯化出的1组包括4个分子量组分的纤溶酶,各个组分均有提高受试机体继发性纤溶活性的能力,并具有显著的抗凝活性和纤溶活性以及较好的生物安全性。根据该纤溶酶Ⅱ的N-末端氨基酸序列设计简并引物,通过3-’RACE PCR获得该组分蛋白质的部分编码序列,进一步通过5-’RACE PCR获得单环刺螠纤溶酶基因全长cDNA编码序列906 bp,其中开放阅读框795 bp。该基因全长cDNA BLASTx比对结果表明,其编码产物与丝氨酸蛋白酶家族成员具有较高的同源性,通过PROSITE的ScanProsite软件分析得出,该蛋白质含有1个trypsindomain(第32-264位),在NCBI的CDD数据库中分析结果显示该酶是1种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶。
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- 关键词：单环刺螠纤溶酶基因克隆
- 单环刺螠纤溶酶UFEⅠ药效作用和免疫原性的初步研究被引量：5
- 2012年
- 为评价单环刺螠纤溶酶(UFEⅠ)的抗凝血和抗血栓形成作用,并对其免疫原性进行初步研究。文中通过小鼠血液凝固时间实验和大鼠颈动脉血栓形成模型研究UFEⅠ抗凝血和抗血栓作用。用纯UFEⅠ为抗原免疫小鼠,间接ELISA法测定特异性抗体的动态变化及效价。结果 UFEⅠ能明显延长小鼠凝血时间,有效抑制大鼠体内的血栓形成,并显著降低大鼠纤维蛋白原含量(FIB),延长活化部分凝血活酶时间(APTT)。免疫原性的研究结果为UFEⅠ末次免疫小鼠后,产生微量特异性抗体,且抗体水平呈现先升后降的动态变化;方阵法确定了ELISA的优化条件,测定UFEⅠ免疫后产生的抗体效价为1:1 280。本文研究显示,单环刺螠纤溶酶UFEⅠ具有显著的抗凝血和抗血栓形成作用,在小鼠体内产生一过性抗体,但对动物机体不造成负面影响。
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- 关键词：单环刺螠纤溶酶抗凝血作用抗血栓作用免疫原性
