黑龙江省自然科学基金(2004-05)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
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- 相关机构：哈尔滨医科大学生物化学教研室更多>>
- 发文基金：黑龙江省博士后基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
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- 重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：8
- 2007年
- 目的探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx1(5mg·kg-1和10mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化。结果HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量。与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制。结论rh-Grx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关。
- 吴莉芳刘莹莹房绍红周宏博邹朝霞杨歌德任亚坤
- 关键词：谷氧还蛋白LDHSODP38MAPK
- 重组人谷氧还蛋白1在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测被引量：1
- 2006年
- 为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5mmol/LIPTG,37℃,110±5r/min振荡培养5h,重组蛋白为可溶性,表达量达30%以上.用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,获得蛋白质纯度达90%以上;W estern印迹结果表明,该蛋白具有免疫活性;MTT结果显示,终浓度为10mg/LGrx1重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol/LH2O2作用(P<0.01).
- 刘莹莹邹朝霞周宏博吴莉芳房绍红
- 关键词：表达条件优化纯化
