国家自然科学基金(81100831)
- 作品数：11 被引量：23H指数：3
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- 利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N-甲基-D-天门冬氨酸受体表达的变化
- 2013年
- 目的评价利多卡因致大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的N．甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体表达的变化。方法健康雄性SD大鼠24只，体重220～250g，6月龄，采用随机数字表发法，将其分为2组（n=12）：生理盐水组（N组）和利多卡因组（L组）。L组经尾静脉输注2％利多卡因4mg·kg-1·min-1至大鼠发生Racinel]I级惊厥，N组以等容量等速率生理盐水替代。于惊厥停止后即刻、6、12h（T1-3）时取海马，采用免疫印迹和RT-PCR法检测NR2B蛋白及mRNA的表达水平。结果与N组比较，L组NR2B蛋白及mRNA表达上调。与L时比较，L组T2-3时NR2B蛋白及mRNA表达下调（P〈0．05）。与B时比较，L组L时NR2B蛋白表达下调（P〈0．05）。结论利多卡因诱发大鼠惊厥时海马神经元含NR2B亚基的NMDA受体表达上调，该变化可能与利多卡因诱发惊厥发作有关。
- 文先杰徐世元张庆国王玲玲梁桦刘洪珍王汉兵杨承祥
- 关键词：利多卡因惊厥受体N-甲基-D-天冬氨酸
- 利多卡因对SH-SY5Y细胞的损伤作用被引量：2
- 2011年
- 目的:采用SH-SY5Y细胞体外培养模型,通过观察细胞形态、测定细胞活力和细胞凋亡率,探讨不同浓度利多卡因对SH-SY5Y细胞的损伤作用。方法:SH-SY5Y细胞离体培养,分为4组,即:正常培养组(对照组,未经药物处理);0.5%、1%、2%利多卡因组(L1、L2、L3组),分别用相应浓度的利多卡因处理SH-SY5Y细胞10 min。在药物处理10 min后观察细胞形态,并分别在药物处理后5 min(T1)、10 min(T2)、药物处理结束后15min(T3)、药物处理结束后12 h(T4)测定细胞活力及细胞凋亡率。结果:正常培养SH-SY5Y细胞胞体粗大,呈多角形,出现树突状突起,神经突起,多而粗大,分布成网络,各实验组SH-SY5Y细胞则变圆,回缩,轴突渐消失。各实验组不同浓度的利多卡因对SH-SY5Y细胞活力均有明显影响,利多卡因处理5 min后,各组细胞活力明显下降,且随剂量增加,细胞活力下降明显增加。对照组细胞凋亡率在各时点保持在5.9%～6.3%之间,实验组细胞在利多卡因处理后各时点细胞凋亡率明显增加,且随着浓度的增加,细胞凋亡率也增加。结论:0.5%、1%、2%利多卡因对SH-SY5Y细胞均有损伤作用,且随浓度的增加,损伤程度加重。
- 文先杰徐世元雷洪伊梁桦郑雪琴杨承祥
- 关键词：利多卡因细胞培养SH-SY5Y细胞
- T型钙通道在鞘内注射利多卡因致大鼠脊髓神经毒性中的作用
- 2012年
- 目的评价T型钙通道在鞘内注射利多卡因致大鼠脊髓神经毒性中的作用。方法鞘内置管成功的成年雄性sD大鼠48只，体重230～270g，采用随机数字表法，将其随机分为4组（n=12）：二甲基亚砜组（D组）、10％利多卡因组（L组）、米贝地尔＋利多卡因组（M组）和生理盐水＋利多卡因组（N）组，另取12只大鼠作为正常对照组（C组）。D组和L组分别鞘内注射二甲基亚砜和10％利多卡因20μl，M组和N组分别鞘内注射米贝地尔200μl/10μl和生理盐水10μl后鞘内注射10％利多卡因20μl。于鞘内给药前、给药后2、4、8、12h、1、2、3、4和5d（T0-9）时测定大鼠后肢机械缩足反应阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）。于T6时每组随机取4只大鼠处死取脊髓腰膨大，光镜下观察病理学结果。结果与c组比较，D组各时点MWT和TWL差异无统计学意义（P〉0．05），L组和N组T1-8时MWT升高，T1～7时TWL延长，M组，T1-6时MWT升高，TWL延长（P〈0．05）；与L组和N组比较，M组T1～4时MWT降低，TWL缩短（P〈0．05）。M组较L组和N组脊髓病理学损伤减轻。结论T型钙通道参与了鞘内注射利多卡因致大鼠脊髓神经毒性的过程。
- 郑雪琴文先杰黄腾刘洪珍杨承祥
- 关键词：钙通道药物毒性脊髓
- 钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ在利多卡因诱发神经细胞损伤中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的评价钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在利多卡因诱发神经细胞损伤中的作用。方法培养SH—SY5Y细胞，以5×10^5个／ml的密度接种于96孔（100μl／孔）培养板。采用随机数字表法，将细胞随机分为4组（n=63）：常规培养组（C组）；CaMKlI抑制剂KN93组（K组）在细胞培养液中加入KN93（终浓度1μmol／L）孵育24h；利多卡因组（L组）在细胞培养液中加入利多卡因（终浓度10mmol／L）孵育24h；KN93＋利多卡因组（KL组）在细胞培养液中加入KN93（终浓度1μmol／L）和利多卡因（终浓度10mmol／L）孵育24h。药物孵育24h后，镜下观察细胞病理学结果。于药物孵育前、孵育l、6、12、24h时采用MTT法检测细胞活力及流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果与C组和K组比较，L组和KL组细胞活力降低，细胞凋亡率升高（P〈O．05）。与L组比较，KL组细胞活力升高，细胞凋亡率降低（P〈0．05）。C组和K组各指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）。L组细胞病理学损伤明显，KL组细胞损伤明显减轻。结论CaMKⅡ参与了利多卡因诱发神经细胞的损伤。
- 文先杰徐世元梁桦张庆国郑雪琴刘洪珍王汉兵杨承祥
- 关键词：利多卡因药物毒性
- JNK信号转导通路在利多卡因诱发大鼠脊髓神经毒性中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的 评价c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导通路在利多卡因诱发大鼠脊髓神经毒性中的作用.方法 成年雄性SD大鼠72只,体重220 ～ 260 g,采用随机数字表法分为6组（n=12）：对照组（Ⅰ组）不做任何处理；假手术组（Ⅱ组）仅行鞘内置管术；JNK抑制剂组（Ⅲ组）和二甲基亚砜（DMSO）组（Ⅳ组）分别鞘内注射JNK抑制剂SP600125 25μg和DMS0 20 μl;10％利多卡因组（Ⅴ组）鞘内注射10％利多卡因20 μl; JNK抑制剂＋10％利多卡因组（Ⅵ组）先鞘内注射SP600125 25 μg,30 min后鞘内注射10％利多卡因20μl.于鞘内置管前（T0）、鞘内给药前（T1）、鞘内给药后4、8、12 h、1、2、3、4、5和6 d（T2-10）时测定大鼠后肢机械痛阈和热痛阈.于给药后24h时每组随机取4只大鼠,取脊髓腰膨大标本,采用Western blot法检测磷酸化JNK（p-JNK）的表达,TUNEL法检测脊髓凋亡神经细胞,计算细胞凋亡指数.结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组机械痛阈和热痛阈、Ⅱ组和Ⅳ组脊髓p-JNK表达差异无统计学意义（P＞0.05）,Ⅴ组T2-4,6-8时机械痛阈、T2-4,7时热痛阈、Ⅵ组T2-6时机械痛阈、T2-5时热痛阈升高,Ⅲ组脊髓p-JNK表达下调,细胞凋亡指数降低,Ⅴ组和Ⅵ组脊髓p-JNK表达上调,细胞凋亡指数升高（P＜0.05）；与Ⅴ组比较,Ⅵ组T2-8时机械痛阈和热痛阈降低,给药后24h时脊髓p-JNK表达下调,细胞凋亡指数降低（P＜0.05）.结论 JNK信号转导通路激活可能通过促进脊髓神经细胞凋亡参与利多卡因诱发大鼠脊髓神经毒性的过程.
- 张娜刘洪珍文先杰刘毅郑雪琴杨承祥
- 关键词：JNK丝裂原活化蛋白激酶类利多卡因脊髓急性毒性试验
- 不同浓度利多卡因对SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶及Caspase-3表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:在离体细胞培养条件下,通过观察利多卡因对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率、细胞凋亡率及Caspase-3表达水平的影响,探讨不同浓度利多卡因对SH-SY5Y细胞的神经毒性损伤作用。方法:神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)离体培养,分为4组,即:正常培养组(Con组,即对照组,未经药物处理);0.5%,1%,2%利多卡因组(L1,L2,L3组):分别用相应浓度的利多卡因处理SH-SY5Y细胞10 min。分别检测LDH释放率、细胞凋亡率及Caspase-3表达水平。结果:正常对照组细胞LDH释放率为11.7%,1%和2%利多卡因处理10 min后,LDH释放率明显增加,分别为18.8%和28.5%。Con组细胞凋亡率为6.1%,L1组、L2组、L3组细胞凋亡率分别为14.9%,19.2%和23.0%。正常对照组Capase-3表达相对较低,0.5%利多卡因处理10 min后Caspase-3表达即有增加,1%和2%利多卡因组Caspase-3表达明显增加。结论:3种浓度利多卡因均可致SH-SY5Y细胞损伤,且随浓度的增加,损伤作用明显。
- 文先杰徐世元郑雪琴梁桦杨承祥张庆国刘洪珍
- 关键词：利多卡因细胞培养乳酸脱氢酶细胞毒性
- 盐酸利多卡因神经毒性损伤大鼠脊髓钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的表达被引量：2
- 2013年
- 目的观察大鼠鞘内注射盐酸利多卡因神经损伤后脊髓钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（calcium／calmodulindependentproteinkinaseⅡ，CaMKⅡ）的表达变化。方法鞘内成功置管的雄性SD大鼠48只，体质量（230±20）g，用随机数字表法将大鼠分成4组（n=12，其中行为学检测大鼠8只，免疫印迹实验大鼠4只）：正常组（C组）、假手术组（S组）、溶媒组（D组）、10％利多卡因组（L组）。分别于给药前、给药后2h、4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d、5d等时点检测大鼠机械缩腿阈值（Mechanicalwithdrawalthreshold，MWT）和热缩腿潜伏期（thermalwithdrawallatency，TWL）。并于给药后12h取4只大鼠脊髓腰膨大，免疫印迹检测大鼠脊髓腰膨大CaMKⅡ的表达。结果C组、S组和D组大鼠MWT的基础值分别为（11．2±3．1）g、（11．8±2．2）g和（11．4±2．4）g，其余各时间点与基础值比较差异无统计学意义（n=8，P〉0．05）；L组大鼠MWT在给药后2h、4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d时点显著增加（n=8，P〈0．01），分别为（22．0±6．6）g、（22．2±5．3）g、（20．5±5．8）g、（18．5±4．3）g、（16．7±3．2）g、（15．2±3．1）g、（15．5±3．5）g、（13．7±2．4）g。与MWT结果相似，C组、S组和D组大鼠TWL的各时间点比较差异无统计学意义（n=8，P〉0．05）；L组大鼠TWL在给药后2h、4h、8h、12h、1d、2d、3d时点显著增加（n=8，P〈0．01）。C组、S组、D组及L组大鼠脊髓CaMKⅡ表达分别为0．17±0．03、0．16±0．03、0．19±0．05、0．42±0．11，L组大鼠表达显著增加（n=4，P〈0．01）。结论鞘内注射盐酸利多卡因可致脊髓CaMKⅡ表达显著增加，提示CaMKⅡ可能与盐酸利多卡因所致的神经损伤有关。
- 文先杰徐世元梁桦刘洪珍王汉兵杨承祥
- 关键词：利多卡因脊髓神经损伤钙
- Cav3．2通道对背根节慢性压迫痛大鼠脊髓CaMKⅡ表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的:观察Cav3.2通道对背根节慢性压迫痛大鼠脊髓CaMKⅡ表达的影响,探讨Cav3.2-CaMKⅡ通路在神经病理性疼痛中的作用。方法:雄性SD大鼠60只,体重250±20 g,随机分为5组,每组12只(其中行为学实验8只,免疫印迹实验4只)。分别是正常对照组(C组);模型组(CCD组);生理盐水组(NS组);错义寡聚核苷酸组(MS-Cav3.2组);反义寡聚核苷酸组(AS-Cav3.2组)。分别于鞘内置管前(T1),鞘内置管后3 d(T2),鞘内给药后1 d(T3)、4 d(T4),CCD模型制备后5d(T5)、10 d(T6)、15 d(T7)检测大鼠机械缩腿阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)。并于CCD模型制备后5 d,各组取4只大鼠处死,取脊髓腰膨大,采用免疫印迹法检测Cav3.2及CaMKⅡ的表达。结果:与C组比较,CCD组大鼠在模型制备后第5 d、10 d、15 d时MWT及TWL均显著降低。鞘内注射NS和Cav3.2错义寡聚核苷酸对CCD大鼠MWT及TWL无影响,鞘内注射Cav3.2反义寡聚核苷酸可增加CCD大鼠MWT和TWL,减轻大鼠机械痛敏和热痛敏。C组大鼠脊髓Cav3.2和CaMKⅡ蛋白均有表达。大鼠在制备CCD模型后5 d Cav3.2及CaMKⅡ蛋白表达均显著增加。鞘内注射NS及Cav3.2错义寡聚核苷酸对Cav3.2及CaMKⅡ蛋白表达无影响,鞘内注射Cav3.2反义寡聚核苷酸则可显著抑制Cav3.2及CaMKⅡ蛋白的表达。结论:抑制脊髓Cav3.2通道的表达可降低慢性背根节压迫痛大鼠脊髓CaMKⅡ的表达。
- 文先杰刘洪珍梁桦徐世元张庆国赖小红王汉兵杨承祥
- 关键词：脊髓背根节神经病理性疼痛
- 钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ在神经病理性痛大鼠脊髓Cav3．2T型钙通道表达上调中的作用
- 2012年
- 目的探讨钙／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在神经病理性痛大鼠脊髓cav 3．2T型钙通道表达上调中的作用。方法雄性sD大鼠48只，体重220～250g，3月龄，采用随机数字表法，将大鼠随机分为6组（n=8）：假手术组（s组）、神经病理性痛组（NP组）、二甲基亚砜组（D组）、不同浓度CaMKⅡ特异性抑制剂KN93组（K1-3组）。采用背根神经节慢性压迫法建立神经病理性痛模型。D组和K1-3组于造摸后5d鞘内注射二甲基亚砜和KN9315、30、60nmol／L，容积10μ1。于造模前、造模后5d鞘内给药前、鞘内给药后30、60min、3、6、8h时测定机械缩足阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）。于鞘内给药后8h测定痛阈后处死，取脊髓腰膨大，采用RT-PCR及Westernblot法检测Cav3．2mRNA及其蛋白表达水平。结果与s组比较，NP组、D组、K。组MWT降低，TwL缩短，Cav3．2mRNA及蛋白表达上调（P〈0．05）。与NP组比较，K1-3，组MWT升高，TWL延长，cav3．2mRNA及蛋白表达下调，且呈浓度依赖性（P〈0．05），D组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CaMKII通过上调大鼠脊髓cav3．2T型钙通道的表达而参与大鼠神经病理性痛的形成和维持.
- 文先杰梁桦仲吉英郑雪琴赖晓红刘洪珍王汉兵杨承祥
- 关键词：钙通道脊髓
- 鞘内注射利多卡因致大鼠神经损伤模型的建立被引量：10
- 2011年
- 目的建立鞘内注射利多卡因致大鼠神经损伤模型。方法成年雄性SD大鼠55只，体重200—220g，采用随机数字表法，将其随机分为5组（n=11）：正常对照组（C组）、溶媒组（D组）、5％利多卡因组（k组）、10％利多卡因组（L10组）和15％利多卡因组（L15组）。D组、L5组、L10组和L15分别鞘内注射二甲基亚砜、5％、10％、15％利多卡因20m。五组各取8只大鼠，分别于鞘内给药前（基础状态）、给药后1、2、3、4、5、7d时进行后肢运动功能障碍评分，并测定机械缩足反应阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）。五组各取3只大鼠，于鞘内给药后1d时处死，取脊髓L1-5节段，光镜下观察脊髓组织病理学结果。结果与C组比较，D组和L5组运动功能障碍评分、MWT和TWL差异无统计学意义（P〉0．05），L10组给药后1、2d时MWT升高，TWL延长（P〈0．05）；L15组给药后1、2d时运动功能障碍评分升高，给药后1、2、3d时MWT升高，TWL延长（P〈0．05）。L10组和L15组脊髓组织病理学损伤明显。结论鞘内注射10％利多卡因适合用于建立大鼠神经损伤模型。
- 文先杰郑雪琴徐世元梁桦雷洪伊杨承祥仲吉英王汉兵
- 关键词：利多卡因药物毒性
