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江苏省自然科学基金(BK2009451)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：司进渠利利沈鹏王彦云更多>>
相关机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原虫
  • 1篇疟原虫
  • 1篇子孢子
  • 1篇肽段
  • 1篇细胞
  • 1篇环子孢子蛋白
  • 1篇恶性疟
  • 1篇恶性疟原虫
  • 1篇肝细胞
  • 1篇靶向
  • 1篇靶向作用
  • 1篇EGFP

机构

  • 1篇南京医科大学...

作者

  • 1篇王彦云
  • 1篇沈鹏
  • 1篇渠利利
  • 1篇司进

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
恶性疟原虫环子孢子蛋白肝细胞靶向肽段CSR2 a-EGFP 的原核表达、纯化及鉴定被引量：1
2014年
目的：从恶性疟原虫FCC1／HN株环子孢子蛋白（circumsporozoite protein，CSP）的全长编码基因中扩增4个CSP基因编码片段，克隆至原核表达载体pET28 a／EGFP 中进行表达纯化，观察环子孢子蛋白肽段与EGFP融合蛋白对肝细胞的靶向结合能力，探讨其作为原发性肝癌基因治疗的靶向分子载体的可行性。方法根据恶性疟原虫FCC1／HN株环子孢子蛋白的编码序列设计4对引物，利用聚合酶链反应（ PCR ）扩增出4段CSP 的编码基因，将其克隆到原核表达载体pET28 a／EGFP中，与EGFP融合表达，在大肠杆菌BL21中用IPTG诱导表达，表达产物用Ni2＋螯合柱亲和纯化，采用SDS-PAGE对纯化的融合蛋白检测；并观察重组环子孢子蛋白对不同组织细胞的结合能力。结果从恶性疟原虫FCC1／HN株CSP基因中成功扩增到4段分别为300、90、120、80 bp的基因片段，且在原核表达载体pET28 a／EGFP中经诱导表达出相对分子质量约39＆#215;103、31＆#215;103、33＆#215;103和30＆#215;103大小的融合蛋白： CSR1a-EGFP、CSR1b-EGFP、CSR2a-EGFP及CSR2b-EGFP；通过Ni2＋亲和柱纯化获得重组CSP融合蛋白，能被疟原虫阳性血清特异识别，且CSR2 a-EGFP能够与肝癌和正常肝细胞特异性地结合，与其他组织来源的细胞则未见反应。结论重组环子孢子蛋白CSR2a-EGFP能够与肝组织特异性地结合，作为原发性肝癌基因治疗的靶向分子具有一定的潜在应用价值。
渠利利王彦云龚来玲沈鹏朱进司进
关键词：恶性疟原虫环子孢子蛋白肝细胞靶向作用
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