国家自然科学基金(30171068)
- 作品数:22 被引量:103H指数:6
- 相关作者:伍亚民龙在云刘媛李民侯天勇更多>>
- 相关机构:第三军医大学大坪医院第三军医大学成都军区昆明总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市科学技术委员会院士基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 大鼠脊髓半切块状缺损模型的建立及科学性评估被引量:4
- 2006年
- 目的建立脊髓损伤的半切模型,为科学评价移植物治疗脊髓损伤提供模型。方法通过自行研制的脊髓半切切割刀,半切大鼠腰膨大,形成相同大小的块状缺损,建立半切块状缺损模型,通过BBB评分、运动诱发电位及体感诱发电位检测来综合评价模型的科学性和稳定性。结果该模型可形成相同大小的块状缺损,伤侧后肢术后1天BBB运动功能评分为(0.50±0.53)分,术后84天为(3.63±0.74)分;术后28天伤侧N1波峰潜时MEP为(30.25±3.04)m s、皮层感觉诱发电位(SEP)为(24.03±3.64)m s,较正常组均有显著延长。结论该脊髓块状缺损模型具可靠性和稳定性,适用于评价移植物治疗脊髓损伤。
- 侯天勇伍亚民李强刘洋
- 关键词:脊髓损伤缺损
- 转录调控因子Shh促进胎鼠脊髓神经干细胞体外增殖的效应被引量:7
- 2004年
- 目的:观察体外转录调控因子Shh对脊髓神经干细胞的增殖效应,探讨其在脊髓损伤中可能的应用。方法:以一定含量的Shh处理原代和传代的脊髓神经干细胞,分别在接种细胞后的第2,4,6天计数神经球的形成情况;并用胎牛血清作分化诱导剂,观察Shh中干细胞球的分化情况,8d后,免疫组化双标鉴定并计数神经微丝-200(NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的比例,对比碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作统计学分析。结果:Shh(5~50nmol/L)在体外可以促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖,且表现为剂量依赖性,Shh(50nmol/L)的增殖效应几同bFGF(20μg/L);增殖的细胞可分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,其神经元与星形胶质细胞的比例同bFGF组的分别为64%∶36%和63%∶37%。结论:Shh(5~50nmol/L)在体外可以剂量依赖性的促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖,且增殖的细胞具有多分化潜能,其分化细胞的趋向类似于bFGF组。
- 侯天勇刘媛龙在云伍亚民
- 关键词:干细胞基因表达调控
- 持续性兔脊髓缺血损伤的病理与行为功能变化规律被引量:1
- 2004年
- 目的:建立稳定的兔脊髓缺血损伤实验模型,并探讨其科学性。方法:选取日本大耳白兔24只,采用腹膜后入路结扎腰动脉的方法制模后,将动物分为3组(A组:腰动脉结扎脊髓缺血术后1d;B组:腰动脉结扎脊髓缺血术后3d;C组:腰动脉结扎脊髓缺血术后7d)。采用Jacobs法对兔后肢功能评级,Reuter法对脊髓感觉运动反射功能评分,并取脊髓组织切片行苏木精-伊红染色,观察神经细胞形态改变。结果:腰动脉结扎脊髓缺血术后1,3,7dJacobs分级和Reuter分值差异无显著性意义,脊髓组织苏木精-伊红染色神经元的空泡变性、核固缩的程度和范围于术后1d已趋于稳定。结论:采用腹膜后入路结扎腰动脉的方法可建立稳定而科学的脊髓缺血损伤模型。
- 李民李强伍亚民
- 关键词:脊髓缺血脊髓损伤腹膜后入路行为学
- 维甲酸对神经干细胞的增殖和分化效应被引量:5
- 2005年
- 目的探讨不同浓度维甲酸对神经干细胞的增殖和分化的效应。方法分离、培养胎龄14d的Wistar孕鼠的神经干细胞,通过与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对比观察维甲酸的促增殖效应;运用神经微丝200(NF-200)和神经胶质酸性纤维蛋白(GFAP)对维甲酸诱导分化的细胞进行组化染色,通过4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染胞核,计数各种分化细胞的比例,并对分化的神经元进行胆碱能表型鉴定。结果维甲酸的增殖效应明显弱于bFGF,但其具有明显的促神经元生成的分化效应,并表达递质,在分化第24天,500nmol/L的浓度使分化的神经元占分化的总细胞数的90.80%。结论维甲酸具有显著的促神经干细胞分化成神经元的效应。
- 侯天勇伍亚民张玉波龙在云
- 关键词:维甲酸干细胞分化神经元
- 脊髓神经干细胞在Sapeptide材料上增殖与分化的研究被引量:4
- 2005年
- 目的观察脊髓神经干细胞在Sapeptide材料上的增殖和分化情况,并对分化的细胞进行一定功能检测,探讨其细胞假体在脊髓损伤中应用的可能性。方法观察塑形的Sapeptide材料,将培养的脊髓神经干细胞接种其上,然后鉴定干细胞并通过体积分数5%胎牛血清诱导分化,鉴定分化细胞的类型及比例,并与无材料的干细胞的分化情况相比较,最后对材料上的分化细胞进行缝隙连接蛋白32(CX32)和生长相关蛋白43(GAP-43)染色评价。结果Sapeptide材料在等渗盐水中可塑形,扫描电镜示具有规则的网状排列,脊髓神经干细胞在其上可增殖和分化,分化的细胞较无材料的差异无统计学意义(P>0.05),并且具有大量的CX32和GAP-43阳性细胞。结论脊髓神经干细胞在Sapeptide材料上增殖和分化良好,假体在脊髓损伤的修复中可能具有潜在的应用前景。
- 侯天勇伍亚民龙在云
- 关键词:脊神经干细胞脊髓损伤脊髓神经干细胞诱导分化生长相关蛋白
- 生物活性导管修复周围神经长距离缺损的研究进展被引量:4
- 2004年
- 对近年来有关利用生物活性导管修复周围神经缺损的实验研究进行综述 ,阐明生物活性导管的制作方法 ,强调在改进神经导管制作材料的基础上 ,在导管内加入神经营养因子、细胞外基质成份和种植雪旺氏细胞可提高导管的生物活性。这种具有生物活性的导管可改善轴突再生的微环境 ,提高轴突再生速度 。
- 李强伍亚民
- 关键词:周围神经缺损神经修复
- 星形胶质细胞调控的神经干细胞对脊髓损伤的修复作用
- 神经干细胞(Neural stem cell,NSC)具有自我复制和多向分化潜能,将NSC移植到脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)受损处,可在宿主体内存活、分化,并在一定程度上恢复机体部分功能,但进...
- 曾琳李民刘媛龙在云李应玉伍亚民
- 关键词:脊髓损伤神经干细胞星形胶质细胞
- 文献传递
- RAD16-Ⅱ的物理特性及其在神经干细胞假体构建中的应用被引量:4
- 2006年
- 目的:观察RAD16-Ⅱ的物理特性以及神经干细胞在其上黏附和增殖的情况,探讨其构建的细胞假体在脊髓损伤中可能的应用。方法:将RAD16-Ⅱ的饱和水溶液同与之等体积的1.8%的氯化钠溶液混合后静置24h,通过肉眼、光镜和扫描电镜观察其表面结构,并对其吸水性和溶液pH值的动态变化进行评价;将经鉴定的神经干细胞与其共同培养,扫描电镜下观察细胞在材料上的黏附情况,同时应用免疫组化方法评价神经干细胞在材料上的增殖和分化情况。结果:RAD16-Ⅱ在1.8%的氯化钠溶液中塑型后,肉眼和光镜下形态多变,其形状取决于塑型的容器形状;扫描电镜下其为规则的网状,网孔直径为54.00±3.24"m,纤维直径为9.00±1.57"m,网孔底部相互沟通,神经干细胞可在其上迁移和增殖。结论:RAD16-Ⅱ具有良好的物理特性,神经干细胞可在与其构建的假体中迁移和良好地增殖、分化,在脊髓损伤的修复中可能具有潜在的应用前景。
- 侯天勇伍亚民龙在云李应玉
- 关键词:神经干细胞脊髓损伤
- 脊髓损伤的修复治疗策略被引量:17
- 2003年
- 脊髓损伤是一类严重危害人类生命健康的危重疾病。脊髓损伤患者给社会及家庭带来的经济和精神负担也是极其严重的。因此,脊髓损伤后的功能恢复成为了目前世界各国科研工作中的热点和难点。目前研究的成果认为:脊髓损伤后限制神经轴突生长或再生的因素可分为两类:一是神经营养因子和支持引导神经生长的基质成分缺乏;二是脊髓断端产生的囊腔和瘢痕组织以及一些抑制性生长因子等抑制轴突生长。近年来,围绕这两个方面开展了大量的脊髓损伤治疗的研究工作,也取得了一些理论成果,特别是在脊髓移植治疗、神经营养因子的应用、阻断抑制性因子的作用、转基因技术的应用等方面取得了的实验结果令人鼓舞,为截瘫患者燃起了希望。
- 李民李强伍亚民
- 关键词:脊髓损伤胚胎干细胞ESC神经元神经系统
- 原浆型星形胶质细胞调控神经干细胞定向分化的优化比例筛选被引量:3
- 2008年
- 目的将神经干细胞(NSC)与原浆型星形胶质细胞(PAS)以不同比例进行体外共培养,观察NSC的定向分化的差异,筛选出有利于向神经元分化的最佳方案,为体内实验提供依据。方法根据NSC与PAS的比例进行分组:3:1组;2:1组;1:1组;1:2组,共培养10天后,采用免疫组化法对分化神经元进行DAPI荧光标记,在显微镜下随机选取20个视野,每次计数100个细胞,计算神经元在NSC中所占的比例,并进行统计学处理。结果NSC:PAS 2:1组分化得到的神经元数量最多,与分化的胶质细胞比例为65%:35%;而1:1组、3:1组稍低一些,比例分别为61%:39%和59%:41%;1:2组比例最低为57%:43%。结论在离体细胞共培养的实验中,因细胞的比例不同,NSC分化亦存在差异,其中NSC:PAS为2:1时,NSC分化为神经元的比例最高。
- 李民曾琳刘媛龙在云李书林伍亚民
- 关键词:星形胶质细胞神经干细胞分化