辽宁省自然科学基金(20042046)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
- 相关作者：赵洪礼聂晶董萍王效杰贲松彬更多>>
- 相关机构：中国人民解放军沈阳军区联勒部中国人民解放军沈阳军区大连疗养院沈阳医学院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 氨基末端激酶信号通路在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨肿瘤特异性凋亡基因(Apoptingene)在诱导Hela细胞凋亡时,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用。方法:用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的Hela;采用流式细胞仪、免疫印迹法(Westernblot)、苔盼蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间条件下Hela细胞诱导凋亡的作用。结果:Apopin基因瞬间转染的Hela细胞可出现明显的细胞凋亡;而且凋亡细胞的数量与Apoptin的转染时间有关;凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多,而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论:Apoptin基因具有诱导Hela细胞凋亡的作用,JNK信号通路的激活可能在Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。
- 花象锋聂晶赵洪礼
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因细胞凋亡
- Apoptin基因/壳聚糖纳米粒的制备及其对U937细胞凋亡的诱导作用被引量：4
- 2008年
- 目的以羧甲基壳聚糖为基质材料,制备apoptin基因缓释微球,探讨其对U937细胞凋亡的作用。方法采用复凝聚法制备apoptin/壳聚糖微球,分别用光镜观察微球形态、内切酶研究其稳定性、DNA电泳阻滞分析apoptin/壳聚糖最佳比例、PCR测定apoptin基因作为复制摸板能力、用MTT法检测其抗肿瘤活性。结果壳聚糖与apoptin基因可形成稳定的微球,其直径在200～300之间,成球性较好,apoptin/壳聚糖微球P/N最佳质量比为5.5:1。微球能够有效防止DNA酶的降解作用,apoptin/微球载体中的基因仍具有DNA复制摸板功能,并能有效地转染U937细胞,转染48h可诱导U937细胞发生凋亡,从而抑制瘤细胞生长。结论apoptin基因与羧甲基壳聚糖可形成稳定的缓释微球,并能有效地转染肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞发生凋亡。
- 关宝丽刘自力赵洪礼王效杰王军乔婉晴
- 关键词：羧甲基壳聚糖基因载体U937细胞细胞凋亡
- 肿瘤特异性凋亡基因诱导人黑色素瘤细胞凋亡机制的研究被引量：2
- 2005年
- 目的研究肿瘤特异性凋亡基因(Apoptin gene)在诱导人黑色素瘤细胞A375发生凋亡时,c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用。方法用含有肿瘤特异性凋亡(Apoptin)基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑色素瘤细胞A375;采用流式细胞仪、免疫印迹法(W estern b lot)、台盼蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间条件下对人黑色素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果Apoptin基因瞬间转染的人黑色素瘤A375细胞出现明显的细胞凋亡,凋亡细胞的数量随Apoptin转染时间延长而增多,磷酸化型JNK蛋白在转染Apoptin 24 h开始表达,48h和72h过表达,而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论Apoptin基因具有诱导人黑色素瘤细胞A375凋亡的作用,JNK信号通路的激活可能在Apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。
- 王效杰齐金萍赵洪礼关宝丽聂晶宋承辉王军
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因细胞凋亡C-JUN氨基末端激酶黑色素瘤
- Apoptin基因诱导A375细胞凋亡信号转导机制被引量：2
- 2007年
- 目的研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin)在诱导人黑色素瘤细胞A 375凋亡中的信号转导机制。方法用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑色素瘤细胞A 375;采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪分析检测A 375的细胞的凋亡;以比色法检测半胱天冬蛋白酶8(caspase-8)和caspase-3的相对活性。结果Apoptin基因瞬间传染的A 375细胞可出现典型的细胞凋亡所具有DNA梯状带;流式细胞术发现实验组细胞凋亡率明显高于其他各组(P<0.01);Cas-pase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化。结论Apoptin基因可通过激活caspase-3诱导人黑色素瘤细胞A 375凋亡。
- 戈全治赵洪礼董萍
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因凋亡半胱天冬蛋白酶
- Caspase-3在Apoptin基因诱导Hela细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2007年
- 目的:研究Caspase-3在Apoptin gene诱导Hela细胞凋亡中的作用。方法:用含有Apoptin基因的真核表达载体pcDNAA3瞬间转染体外培养的Hela细胞;Hela细胞瞬间转染后0、24、48、72和96h,分为正常的Hela细胞对照组,pcD-NA3.1质粒转染对照组和实验组。分别采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测Hela细胞的凋亡;以比色法检测Caspase-3的相对活性。结果:以转染后24、48和72hHela细胞的总RNA为模板,经RT-PCR均可扩增出Apoptin cDNA,正常Hela细胞和空载体转染细胞均为阴性表明Apoptin已在转染细胞中表达;Apoptin基因瞬间转染的Hela细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带,表明有凋亡发生;FCM检测发现,以Apoptin基因转染后48h,在DNA直方上的G1峰前,即出现1个明显的亚2倍体峰(亚G1峰,即凋亡峰),并随着转染时间延长而增强。细胞凋亡率与对照组相比较差异显著(P<0.05)。Hela细胞经pcDNAA3质粒转染后24h实验组Caspase-3的活性开始升高,72h达高峰,明显高于正常细胞对照组和pcDNA3.1对照组(P<0.01)。结论:Apoptin基因可通过激活Caspase-3诱导Hela细胞凋亡。
- 曹婧赵洪礼黄敏戈全治宁安红
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因凋亡CASPASE-3基因治疗
- Apoptin基因／壳聚糖缓释微球的制备及其对A375细胞的凋亡诱导作用被引量：3
- 2008年
- 目的:以羧甲基壳聚糖为基质材料,制备apoptin基因缓释微球。方法:采用复凝聚法制备apoptin/壳聚糖微球,分别用光镜观察微球形态、内切酶研究其稳定性、DNA电泳阻滞分析apoptin/壳聚糖最佳比例、PCR测定apoptin基因作为复制摸板能力、用MTT法检测其抗肿瘤活性。结果:壳聚糖与apoptin基因可形成稳定的微球,其直径在200～300nm之间,成球性较好、apoptin/壳聚糖微球P/N最佳质量比为5.5∶1、微球能够有效防止DNA酶的降解作用、apoptin/微球载体中的基因仍具有DNA复制模板功能,并能有效地转染A375细胞,诱导A375细胞发生凋亡,从而抑制瘤细胞生长。结论:apoptin基因与羧甲基壳聚糖可形成稳定的缓释微球,并能有效地转染肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞发生凋亡。
- 刘姗姗贲松彬赵洪礼
- 关键词：羧甲基壳聚糖基因载体细胞凋亡
- 肿瘤特异性凋亡基因诱导人淋巴瘤细胞凋亡的机制被引量：8
- 2005年
- 目的:研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptingene)在诱导人淋巴瘤细胞U937凋亡时,cJun氨基末端激酶(JNK)信号通路的作用。方法:用含有apoptin基因的真核表达载体,瞬时转染体外培养的人淋巴瘤细胞U937。采用流式细胞仪、Westernblot、台盼蓝染色及RTPCR等研究其在不同时间条件下诱导U937细胞凋亡的作用。结果:Apopin基因瞬时转染U937细胞48h,可出现明显的凋亡;而且凋亡细胞的数量与apoptin基因的转染时间有关。诱导后24h,U937细胞中出现磷酸化的JNK蛋白的表达,诱导后48h达高峰;而非磷酸化的JNK蛋白表达无明显变化。结论:Apoptin基因具有诱导U937细胞凋亡的作用。JNK信号通路的激活,可能在apoptin基因诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥着重要作用。
- 贲松彬赵洪礼聂晶李红扬
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因细胞凋亡
- Apoptin基因活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡
- 2005年
- 为研究肿瘤细胞凋亡基因(apoptin gene)诱导人黑素瘤细胞系A375凋亡时是否通过活化caspase-3 发挥作用,用含有apoptin基因的真核表达载体短时转染体外培养的人黑素瘤细胞A375;采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测A375细胞的凋亡;以比色法检测caspase-3的相对活性。结果表明,apoptin基因短时转染的A375细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带;流式细胞术显示实验组细胞凋亡率明显高于其它各组(P<0.01);转染后24h实验组caspase-3的活性开始升高,72 h达高峰,明显高于其它各组(P< 0.01)。结论:apoptin基因可活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。
- 赵洪礼董萍
- 关键词：黑素瘤细胞凋亡CASPASE-3细胞凋亡基因人黑素瘤细胞流式细胞术检测
- RhIL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 目的探讨重组人白细胞介素18(rhIL-18)对核辐射所致小鼠脾细胞凋亡的抑制作用及其对免疫功能的调节调节。方法对32只C57小鼠分4组进行核辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用细胞死亡ELISA试剂盒测定胞浆中核小体含量,用DAN琼脂糖电泳检测凋亡细胞DNA片段,用淋巴细胞转化实验测定rhIL-18对脾细胞免疫功能的调节作用。结果与对照组比较,rhIL-18能够明显降低核辐射所致的小鼠脾细胞凋亡;提高核辐射损伤后小鼠的脾细胞细胞转化能力。结论rhIL-18可能通过抑制核辐射诱导的细胞凋亡而增强小鼠脾细胞功能。
- 王效杰赵洪礼桂国平
- 关键词：核辐射IL-18细胞凋亡
- 肿瘤特异性凋亡基因诱导人宫颈癌细胞凋亡作用被引量：2
- 2011年
- 目的研究肿瘤特异性凋亡蛋白基因(apoptin)在诱导人宫颈癌细胞凋亡过程中信号转导机制。方法用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人宫颈癌细胞(hela);采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测hela细胞的凋亡;以比色法检测胱天蛋白酶-8(caspase-8)和胱天蛋白酶-3(caspase-3)的相对活性。结果 Apoptin基因瞬间转染的hela细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带;流式细胞术检测发现,实验组细胞凋亡率〔(40.45±0.76)%〕明显高于正常对照组〔(3.25±0.16)%〕和载体对照组〔(3.55±0.12)%〕(P<0.01);caspase-3的活性升高,但caspase-8活性无明显变化。结论 Apoptin基因可通过激活caspase-3诱导hela细胞凋亡。
- 邢安辉桂国平赵洪礼徐英俐贲松彬
- 关键词：肿瘤特异性凋亡基因凋亡胱天蛋白酶
