国家自然科学基金(30970361)
- 作品数：9 被引量：27H指数：3
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- 沁河沉积物重金属垂直分布特征与风险评价被引量：11
- 2013年
- 结合沁河环境参数对其所流经的5个县市22个采样点的垂直分布特征进行分析,采用Hakanson生态风险指数法和SQG(Sediment quality guidelines)法对其表层沉积物生态风险进行评价,并运用富集系数法探讨其主要来源.垂直分布特征分析结果表明:沁河中下游可能曾经发生过铅(Pb)、铜(Cu)的污染,但逐渐得到了缓解;铬(Cr)、镉(Cd)在沁水县可能有一定的持续污染源.SQG分析表明:沁河沉积物中Cu、Zn、Cr呈现出中等生态毒性,可能会对该水域的生物产生一定影响;而沁水县Cd含量较高,对沁河水生生物有高毒性威胁.以山西省土壤背景值作为参比,对沁河生态风险水平由强到弱的重金属依次为Cd>Pb>Cu>Zn>Cr>Mn,其中沁水县生态风险最强,结果与SQG分析一致.富集系数法分析表明,河流中60%的样点呈现出重金属累积现象,Cd作为西大(S11)、卧虎庄(S13)点源污染物,固定的排污口可能是其主要来源.
- 傅鹏王飞马秀平王兰
- 关键词：沉积物重金属
- 河南华溪蟹金属硫蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 2014年
- 目的制备小鼠抗河南华溪蟹金属硫蛋白(MT)单克隆抗体(mAb),并鉴定其免疫学特性。方法分别利用小泛素样修饰蛋白(SUMO)融合表达系统和碱性磷酸酶(phoA)分泌表达载体制备河南华溪蟹重组蛋白SUMO-MT和His-MT,以SUMO-MT为免疫抗原、His-MT为检测抗原,利用杂交瘤技术建立抗河南华溪蟹MT mAb杂交瘤细胞株。采用间接ELISA测定mAb腹水效价,Western blot法、Dot-ELISA分析mAb的特异性。结果成功建立了2株稳定分泌抗MT蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为mAb-MT2和mAb-MT3,均属于IgG1亚类。腹水效价分别为1∶500 000、1∶1000 000,Western blot和Dot-ELISA结果证实2株mAb均能特异性识别重组MT和内源性MT。结论成功制备了具有较高特异性的河南华溪蟹MT mAb。
- 何永吉刘进平王兰
- 关键词：金属硫蛋白单克隆抗体
- 低分子质量壳聚糖对镉胁迫引起河南华溪蟹氧化损伤的保护作用
- 2013年
- 采用浸浴法,研究低分子质量壳聚糖(LMWC)对镉胁迫引起河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)肝胰腺组织中镉积累情况、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响,旨在评价LMWC的保护作用。设置镉处理组(29、58、87mg/L)、LMWC组(20、40、80mg/L)、LMWC组(20、40、80mg/L)和镉(58mg/L)联合处理组,对照组;处理时间为96h。结果显示:与对照组相比,LMWC单独作用下,SOD活性和MDA含量变化不显著,不会引起肝胰腺组织脂质过氧化。但58mg/L镉单独作用下,SOD活性显著降低,MDA含量显著增加,降低了机体抗氧化能力。镉积累量随着镉浓度升高逐渐增加,加入LMWC后镉积累量显著降低,且具有质量浓度-效应关系。GST活性和GSH含量随着镉质量浓度升高逐渐降低,而加入LMWC后其水平比镉染毒组(58mg/L)显著升高。LMWC对镉胁迫引起的肝胰腺组织氧化损伤可以起到良好的保护作用。
- 樊冰心任国锐李瑞金王兰
- 关键词：丙二醛超氧化物歧化酶谷胱甘肽硫转移酶还原型谷胱甘肽镉
- 低分子质量壳聚糖对鲤鱼生长和消化酶活性的影响被引量：2
- 2013年
- 旨在探讨低分子质量壳聚糖(low molecular weight chitosan,LMWC)对鲤鱼(Cyprinus carpio)生长和消化酶活性的影响。采用单因子浓度梯度法,设基础饲料组和质量分数分别为0.25%、0.50%、0.75%、1.0%LMWC组;分别在30、45、60d对不同组鲤鱼质量增加率、投饵系数以及肝胰脏和肠道淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的活性进行动态分析。结果表明:随着LMWC添加量增加和时间延长,与对照组相比,鲤鱼质量增加率、淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性都呈现逐渐升高的趋势,投饵系数呈现逐渐下降的趋势。在45、60d时0.75%LMWC组鲤鱼的质量增加率,淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶活性相对于对照、0.25%、0.50%、1.0%LMWC组,升高趋势最为明显。1.0%LMWC组鲤鱼随着时间延长,质量增加率和消化酶(淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶)活性的升高趋势逐渐变缓;饲料中添加不同质量分数的LMWC对鲤鱼消化酶活性的影响不同,0.75%为LMWC的最适添加量。
- 任国锐李瑞金王兰
- 关键词：鲤鱼淀粉酶脂肪酶胰蛋白酶
- 急性镉染毒对河南华溪蟹精子质量的影响被引量：4
- 2013年
- 采用急性毒性实验方法,研究了镉(Cd2+)对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)精子质量的影响.实验设置了5个Cd2+浓度组(7.25、14.5、29、58和116mg·L-1)和1个空白对照组,在2个染毒时间(5d和7d)采用特异性的荧光染料和流式细胞术(FCM)对精子成活率、膜完整性、顶体完整性及染色质结构进行了测定.结果显示,随着Cd2+浓度的增加和染毒时间的延长,精子的成活率下降,质膜和顶体缺失率上升,异染色质所占比率上升.在Cd2+浓度为58、116mg·L-1条件下暴露5d后,精子成活率显著降低(p<0.05);Cd2+浓度为116mg·L-1时,精子质膜完整性和染色质结构均有明显的损伤;而顶体状态在Cd2+浓度为29mg·L-1时就呈现显著的损伤(p<0.01).在Cd2+浓度为29、58、116mg·L-1条件下染毒7d后,精子成活率、质膜完整性和顶体完整性降低;在所有的染毒组,DNA结构受到了显著的破坏.结果表明,Cd2+暴露对华溪蟹精子质量有明显的影响.
- 马丹旦雷雯雯吴昊杜丽君王兰
- 关键词：成活率染色质结构镉
- 沁河沿线有机氯农药的分布特征及风险评价被引量：4
- 2013年
- 为了解沁河有机氯农药(OCPs)的残留状况,利用气象色谱仪测定了沁河干流沿线水体和表层沉积物中六六六(HCHs)和滴滴涕(DDTs)的含量,并分析了其来源.结果表明,沁河水体和表层沉积物中大部分样点均检出有机氯农药的残留,其中水体中HCHs和DDTs含量分别为nd-2.23 ng/L和nd-19.35 ng/L;表层沉积物中HCHs和DDTs含量分别为nd-13.72 ng/g和nd-14.02 ng/g.对组成特征的分析表明,沁河沿线中游没有新的商品HCHs的输入,而下游存在一定林丹的使用;沁河中下游有新的DDTs的输入,其主要来源是三氯杀螨醇和历史残留.与国内其他主要河流相比,沁河沿线水体和表层沉积物中有机氯农药的含量处于中等水平.根据淡水生态系统风险评估值进行比较,沁河沿线表层沉积物中有机氯农药的生态风险较低.
- 王飞傅鹏马秀平井维鑫王兰
- 关键词：水体污染表层沉积物
- 河南华溪蟹金属硫蛋白分泌型表达载体的构建、表达及纯化被引量：3
- 2014年
- 目的:构建河南华溪蟹金属硫蛋白(metallothionein,MT)分泌型表达载体并诱导其可溶表达。方法:采用基因重组技术,将河南华溪蟹MT基因亚克隆至碱性磷酸盐启动子(alkaline phosphatase promoter,phoA)分泌型原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过低磷酸盐诱导重组蛋白表达,经Ni2+螯合柱分离纯化后,利用紫外光谱扫描分析、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)及Western blotting检测鉴定重组MT。结果:phoA-MT分泌型表达载体构建成功,工程菌经低磷酸盐诱导后重组MT以可溶形式获得表达,紫外光谱扫描和Western blotting证实表达产物的正确性,SDS-PAGE分析其纯度较高,主要以单体和二聚体的形式存在,其分子质量分别约为7.5、15 kD。结论:成功实现了河南华溪蟹MT的重组表达。
- 刘进平何永吉王兰
- 关键词：金属硫蛋白
- 华溪蟹功能性重组金属硫蛋白的表达及抗血清制备被引量：3
- 2014年
- 采用SUMO融合表达系统表达河南华溪蟹金属硫蛋白(Metallothionein,MT),经Ni离子螯合柱分离纯化后,用SDS-PAGE、紫外光谱扫描鉴定,并对重组MT的金属结合及清除自由基能力进行了检测.同时,利用纯化的融合蛋白SUMO-MT免疫BALB/c小鼠制备抗血清,间接ELISA检测该抗血清的效价,Western blot和免疫组化染色检测其特异性.结果表明,河南华溪蟹MT以可溶形式获得表达,经金属螯合层析纯化后分析仍具有金属结合特性和清除羟自由基的生物学功能.免疫BALB/c小鼠后获得特异性的抗MT抗血清,该抗血清具有较高的效价和良好的特异性,可识别组织MT,用于免疫组化分析.
- 何永吉刘进平李颖君王兰
- 关键词：金属硫蛋白抗血清
