转基因生物新品种培育专项(2008ZX08012-001)
- 作品数：20 被引量：158H指数：8
- 相关作者：张明李飞武李葱葱邢珍娟曲波更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院中国农业大学吉林省农业科学院更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家高技术研究发展计划黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数被引量：3
- 2011年
- [目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数。[方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数。[结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999。nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝。[结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据。
- 仇有文张明辉高学军曲波敖金霞袁肖寒刘营霍楠
- 关键词：REAL-TIMEPCR拷贝数LECTIN
- 16S rDNA克隆文库法探索转基因香石竹对土壤细菌群落的影响被引量：8
- 2012年
- 【目的】通过研究转基因香石竹对土壤细菌群落的影响,为转基因香石竹的环境安全性评价提供依据。【方法】通过构建16S rDNA克隆文库,分析种植转基因和非转基因香石竹的土壤中细菌的群落结构组成。【结果】转基因和非转基因香石竹土壤中,共有的菌群有变形菌门(Proteobacteria)、浮霉菌门(Planctomycetes)、酸杆菌门(Acidobacteria),其中α-变形菌门、β-变形菌门、浮霉菌门为优势菌群;而在放线菌门(Actinobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)及未培养菌(Uncultured bacterium clone)等菌群存在部分差异。【结论】通过16S rDNA克隆文库方法揭示了转基因香石竹的土壤中细菌多样性十分丰富,其栽培对土壤细菌群落结构影响有限。
- 白蓝赵明文贾军伟李鹏王金斌潘爱虎
- 关键词：土壤细菌群落
- 转基因生物检测技术研究进展被引量：3
- 2011年
- 转基因技术的发展,促进了转基因生物(genetically modified organisms,GMO)的数量、多样性不断增加,给GMO检测工作提出了新的挑战,同时也促进了GMO检测方法的发展。GMO检测新方法突破了传统方法中一次只能分析一个靶目标的限制,新方法一次可以检测多个靶目标,向高通量检测的方向发展。作者对最新报道的GMO检测方法作一概述,主要包括实时荧光PCR多靶分析方法,锁式探针-基因芯片方法、液相芯片方法,多重PCR-毛细管电泳方法,生物发光检测方法,以及为GMO检测提供方法决策的支持系统(DSS、GMO示踪)等。
- 李全芬李志辉王慧煜韩雪清
- 关键词：PCR高通量DSS
- 进口加拿大油菜籽真菌与转基因品系检测技术研究
- 油菜是世界上最主要的油料作物之一，在世界农产品贸易发展中占有重要地位。我国是世界油菜籽十大生产国和消费国之一，虽然我国油菜种植面积逐渐扩大，但是由于油菜籽生产规模小、产品质量不高、生产加工技术落后等因素，已远远满足不了人...
- 陈明爱章桂明周德群程颖慧王颖张雪
- 关键词：油菜籽病原真菌转基因多重PCR
- 转基因大豆MON89788检测质粒标准分子的构建与应用被引量：7
- 2010年
- [目的]构建适用于转基因大豆MON89788检测的质粒标准分子。[方法]利用定性PCR和连接、转化等分子克隆技术,将大豆内标准基因lectin、MON89788的3′端特异性序列和5′端特异性序列依次克隆到pMD18-T载体上,获得质粒标准分子pMD-LM3M5,并进行适用性验证。[结果]获得了3700bp的质粒标准分子,其中重组DNA片段1029bp。该质粒标准分子的定性PCR检测灵敏度达到10copy。[结论]该研究构建的质粒标准分子pMD-LM3M5能替代MON89788基体标准品,用于MON89788大豆及其产品的定性PCR检测。
- 李飞武邵改革邢珍娟李葱葱夏蔚张明
- 关键词：转基因生物
- 转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅王建武薛振华
- 关键词：转基因奶牛多重PCR
- 转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因（β2-microglobulin,B...
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅王建武薛振华
- 关键词：转基因奶牛多重PCR
- 文献传递
- 多重PCR检测转基因奶牛方法的建立
- 建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDN...
- 朱振营林祥梅刘建吴绍强仇松寅王建武薛振华
- 关键词：转基因多重PCR
- 文献传递
- 一种有效的大豆精炼油DNA提取新方法——冷冻干燥法被引量：20
- 2009年
- 精炼大豆油中DNA的提取是转基因检测中的难点。实验以大豆油为研究对象,建立了一种有效的DNA提取新方法——冷冻干燥法。通过添加回收实验比较进口试剂盒方法和冷冻干燥法,发现冷冻干燥法提取的DNA浓度高、灵敏度高。采用冷冻干燥法从5种市售一级大豆油中提取DNA,进行了大豆内源Lectin基因、外源CaMV35S启动子、NOS终止子实时荧光PCR检测。结果表明,采用冷冻干燥法提取的大豆精炼油DNA适合PCR检测,可用于转基因检测。
- 白立群吴亚君韩建勋黄文胜孙传范陈颖葛毅强
- 关键词：DNA提取冷冻干燥法实时荧光PCR
- 第二代抗草甘膦大豆PCR检测方法研究被引量：13
- 2009年
- 为建立转基因大豆Roundup RReady2YieldTM(RR2Y)转化体特异性定性PCR检测方法,以lectin基因作为内参照基因,根据RR2Y外源插入片段5’端与植物基因组连接区序列设计特异性引物,从RR2Y中特异性地扩增出223bp的预期产物。对该方法进行重现性、特异性、灵敏度、稳定性和可重复性测试,结果显示:该方法能够特异性检测出RR2Y转化体;将100%RR2Y基因组DNA用A3244基因组DNA进行梯度稀释,以100ngDNA为模板,该方法的检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝;以RR2YDNA含量为10%、1%、0.1%的样品为模板,进行稳定性和可重复性,假阴性率为0。结果表明:此方法适用于RR2Y的转化体特异性定性PCR检测。
- 李飞武李葱葱邢珍娟刘娜康岭生宋新元邵改革张明
- 关键词：转基因生物ROUNDUP
