江苏省卫生厅面上基金(H201124)
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
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- 异柠檬酸脱氢酶1-R132H突变体慢病毒载体的构建与鉴定
- 2015年
- 近年来,研究结果显示异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因突变在胶质瘤中发生频繁.本研究旨在构建IDH1-R132H突变体的慢病毒载体,现报道如下.
- 施金龙陈建施炜沈剑虹左浩倪兰春
- 关键词:异柠檬酸脱氢酶慢病毒载体突变体基因突变胶质瘤
- 血清游离DNA甲基化检测对胶质瘤的意义被引量:2
- 2013年
- 目的 探讨血清游离DNA甲基化水平检测对胶质瘤的意义.方法 采用亚硫酸氢盐测序(BSP)法检测65例胶质瘤患者血清、组织和30例正常血清Alu甲基化水平并进行分析.结果 患者血清中Alu平均甲基化水平为47.30%[(35.40±54.25)%],正常血清是57.90%[(55.25±61.45)%,P<0.01];肿瘤组织Alu平均甲基化水平为40.30%[(36.80±54.20)%],与血清中一致(r=0.882);另外,高级别组的甲基化水平都低于低级别组(P<0.01);Alu甲基化水平越高预示更高的生存率(P<0.01);受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.861(0.789 ~ 0.933,P<0.01).结论 血清游离DNA中Alu低甲基化的检测有助于胶质瘤的诊断及预后判断.
- 龚铭杰陈建戚菁施金龙夏亮施炜
- 关键词:胶质瘤血清甲基化
- 胶质瘤细胞中异柠檬酸脱氢酶1基因突变对肿瘤细胞的生长抑制及作用机制被引量:2
- 2014年
- 目的 观察胶质瘤细胞中异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因突变对肿瘤细胞的生长抑制作用并探讨其机制.方法 构建表达IDH1 R132H突变体的慢病毒载体,转染U87胶质瘤细胞,通过免疫荧光染色观察细胞增殖,原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡,水溶性四唑盐(WST)法绘制细胞生长曲线,比色法检测细胞内还原性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)、还原性谷胱甘肽(GSH)含量,荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量;构建裸鼠动物模型,绘制肿瘤生长体积曲线与重量柱形图.结果 表达IDH1 R132H突变体的胶质瘤细胞生长明显抑制,免疫荧光染色以及TUNEL法证实细胞增殖减少、凋亡增多;细胞内NADPH水平降低伴随GSH含量降低和ROS蓄积,H2O2(1 mmol/L)可明显增加胶质瘤细胞的生长抑制作用,GSH(1 mmol/L)则可减弱抑制作用.结论IDH1基因R132H突变可显著抑制胶质瘤细胞生长,细胞内GSH含量降低和ROS蓄积可能是其重要机制.
- 左浩施金龙施炜倪兰春陈建
- 关键词:胶质瘤活性氧还原性谷胱甘肽