您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30771067)

作品数:3 被引量:9H指数:1
相关作者:王韦华张彦明张旭邢福珊徐彦召更多>>
相关机构:西北农林科技大学渭南职业技术学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 2篇乙型
  • 2篇乙型脑炎
  • 2篇乙型脑炎病毒
  • 2篇脑炎
  • 2篇脑炎病毒
  • 2篇E基因
  • 2篇病毒
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇克隆
  • 1篇克隆及原核表...
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇核表达
  • 1篇SEQUEN...
  • 1篇JEV
  • 1篇ISOLAT...
  • 1篇FULL-L...
  • 1篇SWINE

机构

  • 2篇西北农林科技...
  • 1篇渭南职业技术...

作者

  • 2篇张彦明
  • 2篇王韦华
  • 1篇徐彦召
  • 1篇邢福珊
  • 1篇张旭

传媒

  • 1篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇西北农林科技...
  • 1篇Agricu...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2009
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
乙型脑炎病毒SXBJ07株的分离鉴定及序列分析被引量:9
2009年
【目的】分离鉴定乙型脑炎病毒(JEV),确定分离毒株的基因分型及其E区段氨基酸的序列特征。【方法】采用BHK-21细胞培养法,从猪脑组织标本中分离出1株病毒,对其进行细胞和免疫荧光试验,同时采用RT-PCR扩增并克隆该毒株的PrM、E区段核苷酸序列,利用PrM(456-695位)区核苷酸序列与36株参考序列进行基因分型分析,并对E区核苷酸序列与减毒活疫苗株SA-14-14-2株的相应序列进行比对,分析分离株和疫苗株氨基酸的同源性及关键结构域的差异。【结果】分离出的病毒经细胞病变和直接免疫荧光试验证实为乙脑病毒,命名为SX-BJ07;用该病毒感染BHK-21细胞,72 h后所有细胞均发生病变(CPE);用该病毒接种3日龄乳鼠,72 h之内即可导致乳鼠死亡;SXBJ07株PrM(456-695位)区基因分型证实,分离株属于基因Ⅰ型,E区段核苷酸和氨基酸与减毒活疫苗株SA-14-14-2株的同源性分别为87.7%和97.0%,但在E蛋白的活性关键结构域有13个氨基酸存在差异。【结论】从陕西省境内首次成功分离到1株Ⅰ型乙脑病毒,初步确定了该分离株的分子特征,对乙型脑炎的流行病学研究及其防治具有重要意义。
王韦华张旭张彦明邢福珊徐彦召
关键词:E基因
乙型脑炎病毒SXBJ07株E基因的克隆及原核表达
2012年
为构建乙型脑炎病毒(JEV)SXBJ07株E基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行高效表达;根据JEV SXBJ07株基因组全序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增E基因全长;将目的基因插入pGEM-T连接载体,筛选出阳性重组质粒;将该质粒克隆至原核表达载体pET32α中,再转化入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后对其产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot检测。结果表明:扩增到了全长为1 500 bp的JEV SXBJ株E蛋白基因;重组质粒pET-32α-E构建成功;融合蛋白可以与乙脑阳性血清抗体特异性结合。说明在大肠杆菌中成功表达了JEV E蛋白。
王韦华刘桂梅张彦明
关键词:乙型脑炎病毒基因克隆原核表达载体
Cloning and Sequence Analysis of the Full-Length Genome of Japanese encephalitis virus Strain SXBJ07 Isolated from Swine
2009年
A virus strain, showing cytopathic effect in BHK-21 cell, was isolated from swine brains in Shaanxi Province, China, in 2007. The isolate was confirmed as Japanese encephalitis virus (JEV) by immunofluorescence assay (IFA) and reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and named SXBJ07. The complete nueleotide and deduced amino acid sequences of the JEV strain SXBJ07 were determined. Its single open reading frame has a total of 3 432 amino acid residues. An extensive E gene based phylogenetic analysis was performed, the result showed that SXBJ07 strain belongs to genotype I. Comparison of the SXBJ07 genomic sequence with those of the 24 fully sequenced JEV strains in published databases showed nucleotide homology ranging from 99.0 to 83.7%; amino acid homology ranged from 99.8 to 94.8%. Compared SXBJ07 with SA14-14-2 strain, the current live vaccine strain in China, the homology of amino acid in envelope gene was 97.0%; and there were amino acid substitutions in 13 sites of the active domains of E protein (E1-E411).
WANG Wei-hua,ZHANG Yan-ming,XU Xin-gang,XING Fu-shan and TANG Qing-hai College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling 712000,P.R.China
共1页<1>
聚类工具0